公开(公告)号：CN113917133A

公开(公告)日：2022-01-11

申请号：CN202111164677.5

申请日：2021-09-30

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 宋路红

IPC: G01N33/532

Abstract: 本发明公开了微球标记抗体的方法。本发明中，使用涡旋混合仪将微球充分振荡分散后，用流式进行微球计数。取适量微球，用加入50mM MES(pH5pH6.0)重悬洗涤，再重悬于含5mg/ml EDC、5mg/ml NHS的50mM MES(pH6.0)溶液沉淀，使用涡旋振荡机对其进行涡旋振荡处理，之后使用超声震荡机对其进行超声震荡处理结束之后，将微球溶液加入到离心机的内部，对其进行离心处理，离心过程结束之后，取出离心液中的上清液，将其废弃不用；之后使用清水再对溶液重复洗涤一次备用进行活化；用100mM MES(pH6.0)溶液洗涤后，加入100mM MES(pH6.0)溶液和适量捕获抗体，使抗体与微球进行偶联；加入250～～300μl封闭液重悬进行封闭，封闭液为99.88％PBS溶液、含0.1％BSA溶液和0.02％Tween20的PBS溶液，从而使微球表面空余的位点被BSA填满，检测抗体不会被非特异性的吸附到微球上，而只会跟特异性的目的蛋白结合，从而提高了检测的准确性。

公开(公告)号：CN112415185A

公开(公告)日：2021-02-26

申请号：CN202011147863.3

申请日：2020-10-23

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 周志鹏

IPC: G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种室温稳定的单组分TMB显色液，包括以下组分：聚乙烯醇0.001g/L‑20g/L，阿拉伯糖0.16g/L‑30g/L，柠檬酸1mM‑100mM，乙二胺四乙酸二钠1mM‑20mM，30％过氧化氢水溶液1mM‑10mM，TMB 1mM‑3mM，DMSO 20ml/L‑30ml/L，Proclin300 0.04％，磷酸氢二钠1mM‑25mM，超纯水定容至1L。所述单组分TMB显色液采用柠檬酸和磷酸氢二钠缓冲液，且缓冲液的pH值为3.1‑3.6。所述聚乙烯醇为1788低粘度型聚乙烯醇，且聚乙烯醇的聚合度为1700，醇解度为88％。一种室温稳定的单组分TMB显色液的制备方法，包括以下步骤：步骤一：试剂母液配制：1.1：50g/L低粘度聚乙烯醇1788配制：准确称取5g 1788低粘度型聚乙烯醇于烧杯中，加入适量超纯水，置于65℃恒温水浴锅中，通过玻璃棒持续搅拌使颗粒分散均匀，溶解后继续保温2小时，超纯水定容至100ml，使用0.45μm滤膜过滤。

公开(公告)号：CN110806374A

公开(公告)日：2020-02-18

申请号：CN201910931952.8

申请日：2019-09-29

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 郭爱龙

IPC: G01N15/14 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明公开了一种Annexin V凋亡检测的Binding Buffer及其制备方法，解决细胞分群不明显，染色指数低等问题；与市面上商品化Binding Buffer相比，本试剂可以明显提高染色指数，使细胞之间分群更明显。

公开(公告)号：CN110672500A

公开(公告)日：2020-01-10

申请号：CN201910931637.5

申请日：2019-09-29

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 黄振宇

IPC: G01N15/14 ,  G01N1/28 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明公开了一种非肝素抗凝血液样本的Th检测方法，使用淋巴细胞分离液对非肝素抗凝的样本进行处理，获得外周血单个核细胞(PBMC)，去除抗凝剂对细胞活化和细胞因子分泌的影响，同时在刺激/阻断阶段，加入血清，给细胞提供足够的营养物质；经抗体染色、固定破膜后，可成功用于Th细胞因子的检测，从而扩大了Th检测样本类型的范围。可使研究人员或检测人员充分利用样本进行Th检测，避免了因收集了非肝素抗凝的样本造成样本浪费和重复采集，大大提高了效率。

公开(公告)号：CN110672499A

公开(公告)日：2020-01-10

申请号：CN201910931602.1

申请日：2019-09-29

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 郭爱龙

IPC: G01N15/14 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明公开了一种Annexin V凋亡检测的阳性质控液及其制备方法，应用于Annexin V或PI/7-AAD单染，在正常收集的细胞中加入适量的阳性质控液，冰上孵育30分钟，即可使细胞死亡，再与等量的活细胞混合，可形成比例接近的活细胞和死细胞，Annexin V或PI/7-AAD单染时，可检测到比例接近的阳性细胞群和阴性细胞群，可非常方便地用于仪器的补偿调节。操作简单、重复性好、方便补偿调节、保证结果的可靠性。

公开(公告)号：CN106932563A

公开(公告)日：2017-07-07

申请号：CN201710039375.2

申请日：2017-01-19

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 袁志波

IPC: G01N33/531

CPC classification number: G01N33/531

Abstract: 本发明公开了一种基于血清的ELISA标准品稀释液的制备方法，包括以下步骤，a.用缓冲液配制若干动物血清，血清浓度为5％‑95％，浓度梯度为5％，在各个浓度的动物血清中加入目标蛋白，取若干健康的人血清样本，加入目标蛋白，配置后目标蛋白浓度与动物血清中接近；b.对加入目标蛋白后的各个浓度的动物血清与人血清样本做常规ELISA实验操作；c.制作OD曲线：Excel表横轴为动物血清浓度，纵轴为OD值制作OD曲线；d.确定与人血清样本OD平均值相交的动物血清浓度，即人血清中目标蛋白在ELISA实验中的反应性状与该交点所示浓度的动物血清相近；e.利用d中所得浓度的动物血清做加标回收实验，确认回收率是否在80％到‑120％，如有偏差，上下微调该动物血清浓度即可。

公开(公告)号：CN119510767A

公开(公告)日：2025-02-25

申请号：CN202411355972.2

申请日：2024-09-27

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 宋路红 ,  王帅 ,  张建洋

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种用于可溶性IL‑6蛋白含量检测的酶联免疫检测试剂盒，包含有IL‑6‑1C7和IL‑6‑2E11两种抗人IL‑6单克隆抗体。IL‑6‑1C7单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.1，轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.2；IL‑6‑2E11的重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.3，轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.4。本发明的酶联免疫试剂盒能够有效检测可溶性IL‑6含量，利用该试剂盒检测发现，健康人血清中含有一定基础水平的可溶性IL‑6蛋白，炎性、自身免疫性疾病等患者血清可溶性IL‑6含量明显升高，与患者的临床分期和病理有相关性，炎性患者体液中可溶性IL‑6含量检测具有临床价值。

公开(公告)号：CN113917159A

公开(公告)日：2022-01-11

申请号：CN202111162892.1

申请日：2021-09-30

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 宋路红

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  G01N15/14

Abstract: 本发明公开了一种淋巴细胞亚群的流式检测方法。本发明中，以量子点偶联产物荧光效率测定、偶联产物的免疫反应性测定和量子点偶联产物检测目的蛋白抗原的方式通过将荧光微球偶联抗体检测目的蛋白，从而达到了更加快速准确的检测方式，从而提高了检测速率，为人们的研究带来了更多的便利。流式细胞术整体表现出其快速，高灵敏度，高准确性和重复性的优势；灵敏度高：高度灵敏的荧光标记与检测系统；高效：减少样本处理与生物源性污染接近生物体的分析条件：全血检测保留细胞及生化微环境更准确反映了体内状况，从而提高了试验数据的准确性，为后续的治疗监测研究提供了更专业准确的数据。

公开(公告)号：CN113884676A

公开(公告)日：2022-01-04

申请号：CN202111164659.7

申请日：2021-09-30

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 宋路红

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/533 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种通过将荧光微球偶联抗体检测目的蛋白的方法。本发明中，进行抗体标记与纯化；在1.5mL的微量离心管中加入50μL的量子点，然后加入1OμLEDC和10μLsulfo—NHS溶液，加磷酸盐缓冲液补至800μL，不停地混合溶液，室温下反应20min；加入纯化的抗体200μL，37℃振荡反应2h；加入100μL甘氨酸，封闭量子点上未反应的羧基；将偶联反应所得到的产物4℃，12000r/min离心20min，所得沉淀即为纯化的偶联有荧光微球的P1目的蛋白抗体，以量子点偶联产物荧光效率测定、偶联产物的免疫反应性测定和量子点偶联产物检测目的蛋白抗原的方式通过将荧光微球偶联抗体检测目的蛋白，从而达到了更加快速准确的检测方式，从而提高了检测速率，为人们的研究带来了更多的便利。

公开(公告)号：CN112415211A

公开(公告)日：2021-02-26

申请号：CN202011147882.6

申请日：2020-10-23

Applicant: 杭州联科生物技术股份有限公司

Inventor： 黄振宇

IPC: G01N33/96

Abstract: 本发明公开了一种标准品稀释液的简易制备方法，包括以下步骤：步骤一：在成分明确的缓冲液中，加入不同浓度的生化试剂，浓度范围为0％‑10％，浓度梯度为0.5％；步骤二：在各个浓度的标准品稀释液和若干待测样本中，加入等量高浓度的目标蛋白，加入目标蛋白的体积不超过整个体系的10％，并使加入目标蛋白的终浓度位于标曲范围的中段；步骤三：对加入目标蛋白后的标准品稀释液、加入目标蛋白后的待测样本以及不加目标蛋白的待测样本按常规ELISA实验方案操作；步骤四：绘制OD曲线：横坐标为不同浓度的标准品稀释液，纵坐标为OD值；本发明的标准品稀释液成分明确、制备方法相对简易，该配方的标准品稀释液不易长菌，具有突出性的进步。