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公开(公告)号:CN116656686A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310642413.9
申请日:2023-06-01
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , A61K31/7088 , A61P25/28
Abstract: 本发明公开了一种长单链DNA,所述DNA长单链含有TfR适配体和Tau适配体。制备方法包括以下步骤:第一步、将磷酸化DNA模板与DNA引物混合在NaCl溶液中,所述DNA模板包含TfR适配体和Tau适配体;第二步、将第一步所得的混合物进行热循环;第三步、退火后,加入T4DNA连接酶和T4DNA连接酶缓冲液16℃下孵育过夜,然后加热到65℃保持10分钟,使T4DNA连接酶失活,得到环状DNA模板;第四步、环状DNA模板与dNTPs和phi29DNA聚合酶依次加入RCA反应缓冲液中,置于30℃反应2h,即得长单链DNA。所述长单链DNA应用于阿尔茨海默症(AD)的治疗干预。本申请通过引入TfR适配体和Tau适配体,通过滚环扩增的方法合成含多价适配体的DNA长单链,能够更精准有效的治疗Tau蛋白病介导的AD。