公开(公告)号：CN116218696A

公开(公告)日：2023-06-06

申请号：CN202111478770.3

申请日：2021-12-06

Applicant: 上海凯赛生物技术股份有限公司 ,  CIBT美国公司 ,  凯赛(太原)生物技术有限公司

Inventor： 刘文波 ,  董辰 ,  张明明 ,  刘修才

IPC: C12N1/19 ,  C12P7/44 ,  C12R1/72

Abstract: 本发明公开了一种生产二元酸的基因工程菌及其应用。通过在生产二元酸的菌株中下调GOGAT基因的表达、同时过量表达GDH基因获得所述基因工程菌。具体以现有维斯假丝酵母为出发菌株，采用基因组编辑的方法对铵氮吸收途径中的GS‑GOGAT和GDH途径进行遗传修饰，通过下调GOGAT阻断/弱化GS‑GOGAT途径，并过量表达GDH途径的方式，改造铵氮吸收途径，以此得到二元酸产量显著提高的生产长链二元酸的菌株。

公开(公告)号：CN116218696B

公开(公告)日：2025-04-11

申请号：CN202111478770.3

申请日：2021-12-06

Applicant: 上海凯赛生物技术股份有限公司 ,  CIBT美国公司 ,  凯赛(太原)生物技术有限公司

Inventor： 刘文波 ,  董辰 ,  张明明 ,  刘修才

IPC: C12N1/19 ,  C12P7/44 ,  C12R1/72

Abstract: 本发明公开了一种生产二元酸的基因工程菌及其应用。通过在生产二元酸的菌株中下调GOGAT基因的表达、同时过量表达GDH基因获得所述基因工程菌。具体以现有维斯假丝酵母为出发菌株，采用基因组编辑的方法对铵氮吸收途径中的GS‑GOGAT和GDH途径进行遗传修饰，通过下调GOGAT阻断/弱化GS‑GOGAT途径，并过量表达GDH途径的方式，改造铵氮吸收途径，以此得到二元酸产量显著提高的生产长链二元酸的菌株。

公开(公告)号：CN115992114A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202111222424.9

申请日：2021-10-20

Applicant: 上海凯赛生物技术股份有限公司 ,  CIBT美国公司

Inventor： 董辰 ,  刘修才

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/72

Abstract: 本发明公开了一种CRISPRa基因激活系统、包含其的基因工程菌及其应用。所述CRISPRa基因激活系统包含：dCas9表达盒、scRNA表达盒和激活因子表达盒；其中：所述dCas9表达盒包括dCas9基因及其上游的第一启动子；所述scRNA表达盒包括编码所述scRNA的核苷酸序列及其上游的第二启动子；所述激活因子表达盒包括激活因子基因及其上游的第三启动子。本发明的CRISPRa基因激活系统能够在不添加诱导剂、不构建大体量表达载体的情况下灵活调控不同的基因组内源基因，为维斯假丝酵母中开发可靠的基因表达量上调的工具，解决外源基因过表达载体承受空间的限制。

公开(公告)号：CN115992164A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202111223619.5

申请日：2021-10-20

Applicant: 上海凯赛生物技术股份有限公司 ,  CIBT美国公司

Inventor： 董辰 ,  刘修才

IPC: C12N15/81 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N1/19 ,  C12R1/72

Abstract: 本发明公开了一种CRISPRi基因抑制系统、包含其的基因工程菌及其应用。所述CRISPRi基因抑制系统包含：dCas9表达盒和sgRNA表达盒；其中：所述dCas9表达盒包括dCas9基因及其上游的第一启动子，所述sgRNA表达盒包括编码所述sgRNA的核苷酸序列及其上游的第二启动子；所述dCas9基因编码如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明的CRISPRi基因抑制系统通过启动子的选择，能够在不破坏目的基因序列的情况下灵活抑制其在维斯假丝酵母中的表达，并可以灵活控制抑制效果，丰富基因表达的调控手段；还可以规避传统基因改造方法带来的弊端，避免基因敲除带来的对目的基因与细胞生理功能网络的彻底破坏。