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公开(公告)号:CN119193930A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411503637.2
申请日:2024-10-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了鉴别PRRSV的PCR检测引物和探针及检测试剂盒。本发明首先针对PRRSV保守基因ORF6设计并筛选得到特异性引物和探针,所述引物分别由SEQ ID No.1‑2所示的两条核苷酸序列组成,所述探针序列为SEQ ID No.3所示。本发明进一步公开用于鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒的TaqMan荧光定量PCR检测试剂盒,包括:特异性引物、TaqMan探针及阳性对照。应用本发明提供的特异性引物和探针可以快速准确鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒,具有良好的敏感性和特异性,有效解决现有检测方法对PRRSV的新的变异株或重组毒株检测覆盖力不足的缺陷,降低了假阴性漏检的可能。
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公开(公告)号:CN117451988A
公开(公告)日:2024-01-26
申请号:CN202310994974.5
申请日:2023-08-08
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种牛轮状病毒信号增强型胶体金免疫层析试纸条及其应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水垫,还包括位于下方的PVC板,硝酸纤维素膜上具有山羊抗鼠IgG喷涂的质控线,以及兔抗牛轮状病毒多克隆抗体喷涂的检测线,胶体金垫上涂覆有辣根过氧化物酶标记的鼠抗牛轮状病毒的单克隆抗体BoRV‑3D4与胶体金颗粒的缀合物。本发明通过将偶联标记HRP的抗体标记在胶体金的表面,利用TMB显色液增强显色,利用酶信号放大检测效果,并通过对试纸条胶体金垫、样品垫处理液、检测线抗体浓度等条件进行摸索,优化试纸条反应条件,为牛轮状病毒诊断提供了一种简便、快速、灵敏的现地检测方法。
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公开(公告)号:CN116789850A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310596122.0
申请日:2023-05-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向DCs的禽腺病毒重组蛋白及其在制备禽腺病毒亚单位疫苗中的应用,属于生物技术领域。所述的靶向DCs的禽腺病毒重组蛋白是将禽腺病毒fiber蛋白与鸡骨髓源树突状细胞的靶向肽SP序列融合后,利用柔性Linker将融合靶向肽序列的fiber蛋白序列插入鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白B亚单位的N末端和C末端之间构建得到的。其中,禽腺病毒fiber蛋白为禽腺病毒血清4型、8b型或11型fiber蛋白或是含有上述至少两种血清型禽腺病毒fiber蛋白关键抗原表位的融合蛋白。优选的,所述的靶向DCs的禽腺病毒重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑4任一所示。本发明的提出为预防禽腺病毒特别是多血清型禽腺病毒混合感染提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN116555490A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310377490.6
申请日:2023-04-10
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒及猪德尔塔冠状病毒双重重组酶聚合酶扩增快速检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有分别用于扩增猪流行性腹泻病毒及猪德尔塔冠状病毒的引物。本发明建立了一种双重RPA法以实现同时检测PEDV和PDCoV。双重RPA法体系优化结果显示,在36℃,反应时间为21min且PDCoV:PEDV引物体积为1:4的条件下,对两种病毒检测的灵敏度可达到104copies/μL,且特异性强,无交叉反应现象。94份临床样品的检测结果显示,双重RPA法与RT‑qPCR法和RT‑PCR法的符合率可达80%以上。相比较于RT‑PCR,具有更短的检测时间以及更高的敏感性,对仪器、场地和检测环境的要求更低,为今后PEDV以及PDCoV的预防及快速检测提供了更有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN113174354A
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN202110416205.8
申请日:2021-04-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N1/04 , A23K10/18 , A61K35/747 , A61K9/50 , A61P37/04 , A61P43/00 , C12R1/225
Abstract: 本发明提供了一种重组罗伊氏乳酸杆菌及其制备方法、制剂和应用,涉及微生物的技术领域。具体地,本发明提供了一种能够表达和分泌乳铁蛋白肽的重组罗伊氏乳酸杆菌,采用喷雾干燥法制备的微胶囊菌剂及其在制备动物饲料添加剂、预防和/或治疗动物疾病、提高动物生长性能和免疫力中的应用。重组罗伊氏乳酸杆菌及其制剂,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌,沙门氏菌等耐药菌都有杀菌作用;同时,对猪大肠杆菌病、猪传染性胃肠炎、猪副伤寒等仔猪肠道疾病有一定的抵抗作用,还能提高断乳仔猪的免疫机能并改善其肠道微生态环境,促进断乳仔猪健康生长,可达到良好的抗生素替代效果,具有极高的实用价值和经济价值。
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公开(公告)号:CN107937607B
公开(公告)日:2020-12-01
申请号:CN201711241581.8
申请日:2017-11-30
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组、含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组由上游引物和下游引物组成。此外,本发明采用该DPO引物组结合实时荧光定量PCR方法,建立了一种特异、快速检测猪传染性胃肠炎病毒的DPO‑real time RT‑PCR检测方法,该方法简单、特异性强、灵敏度高,能够实现现有检测技术所无法完成的定量、快速、特异、敏感的结果判定。因此,本发明的提出为猪传染性胃肠炎病毒的快速准确检测提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN109633173A
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201910008503.6
申请日:2019-01-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531 , C12N15/66 , C12N15/81 , C07K14/08
CPC classification number: G01N33/68 , C07K14/005 , C12N15/66 , C12N15/815 , C12N2720/10022 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种用于检测IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有偶联有IBDV VP3蛋白的免疫磁珠,其中,所述的IBDV VP3蛋白是通过毕赤酵母表达系统表达,纯化后获得。本发明利用毕赤酵母表达系统表达的重组VP3蛋白作为抗原,建立了一种新的检测IBDV血清抗体的免疫磁珠间接ELISA方法。与商品化IBDV血清抗体检测试剂盒相比较,操作过程比商品化IBDV血清抗体检测试剂盒节省了约1h,且显著节省了血清的用量。实验结果表明本发明以IBDV VP3重组蛋白作为抗原建立的检测鸡血清中IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA方法,具有良好的特异性和敏感性,重复性好,符合率高,能够缩短检测时间且操作简便。本发明的提出为抗鸡IBDV血清抗体的快速检测提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN109633173B
公开(公告)日:2022-02-22
申请号:CN201910008503.6
申请日:2019-01-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531 , C12N15/66 , C12N15/81 , C07K14/08
Abstract: 本发明公开了一种用于检测IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有偶联有IBDV VP3蛋白的免疫磁珠,其中,所述的IBDV VP3蛋白是通过毕赤酵母表达系统表达,纯化后获得。本发明利用毕赤酵母表达系统表达的重组VP3蛋白作为抗原,建立了一种新的检测IBDV血清抗体的免疫磁珠间接ELISA方法。与商品化IBDV血清抗体检测试剂盒相比较,操作过程比商品化IBDV血清抗体检测试剂盒节省了约1h,且显著节省了血清的用量。实验结果表明本发明以IBDV VP3重组蛋白作为抗原建立的检测鸡血清中IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA方法,具有良好的特异性和敏感性,重复性好,符合率高,能够缩短检测时间且操作简便。本发明的提出为抗鸡IBDV血清抗体的快速检测提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN110607282B
公开(公告)日:2021-05-25
申请号:CN201910788857.7
申请日:2019-08-26
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒,并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明,本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测,与PCR结果一致,表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测,尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料,同时,也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。
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公开(公告)号:CN110734879A
公开(公告)日:2020-01-31
申请号:CN201911107985.7
申请日:2019-11-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/20 , A23K10/18 , A23K50/30 , A61K35/747 , A61P1/00 , A61P37/04 , A61P31/14 , A61P31/04 , C12R1/225
Abstract: 本发明提供了一株罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21及其应用,涉及益生菌技术领域。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21,其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No.M 2019601。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21在肠道内定植性能好,黏附性好,定植后能有效抑制TGEV感染,提高仔猪抵抗病毒侵染、抵抗细菌感染的能力和免疫力。此外,本发明还提供了罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21株在提高仔猪抗传染病能力中应用的方法。
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