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公开(公告)号:CN115094083A
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN202210951880.5
申请日:2022-08-09
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的刚毛柽柳遗传转化体系的构建方法,属于植物基因工程技术领域。为解决目前刚毛柽柳转化体系无法获得稳定的遗传性状的问题,本发明提供了一种农杆菌介导的刚毛柽柳遗传转化体系的构建方法,具体步骤包括获取刚毛柽柳外植体并将在暗条件下预培养、制备含有农杆菌的侵染液、侵染、共培养和抗性芽的筛选,最终获得刚毛柽柳遗传转化株系。本发明优化了刚毛柽柳组织扩繁体系,提高了转化效率,建立了刚毛柽柳的稳定遗传转化体系,为农杆菌稳定转化刚毛柽柳打下坚实的基础,为后续刚毛柽柳基因功能及调控机制深入研究和转基因新品系的获得奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号:CN115067207A
公开(公告)日:2022-09-20
申请号:CN202210871170.1
申请日:2022-07-22
Applicant: 东北林业大学
IPC: A01H1/06
Abstract: 本发明涉及植物种子诱变领域,公开一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法,包括如下步骤:将白桦种子用流水冲洗;将冲洗过的容器中震荡加水,记录此时容器内液体的体积,浸泡后排水;向容器中加入处理液,在振荡器上低温诱变处理;向容器中加入解毒剂,在震荡器上震荡,将震荡后的解毒剂排出;向容器中加入蒸馏水,在震荡器上震荡,将震荡后的蒸馏水排出;将种子吸干水分后,种子播种;统计发芽率,将萌发的白桦幼苗假植,移栽至温室大棚,观察诱变M1代白桦植株表型,统计可观测突变表型的种类和数目;或胁迫处理筛选突变体,消毒、扩繁后,鉴定目标性状。本发明解决了白桦自发的基因突变频率很低、传统育种的周期很长的问题。
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公开(公告)号:CN107410031A
公开(公告)日:2017-12-01
申请号:CN201710875800.1
申请日:2017-09-25
Applicant: 东北林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系,它涉及一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系。本发明要解决现有刚毛柽柳愈伤组织分化及再生难的问题。本发明将刚毛柽柳无菌外植体,通过诱导,分化培养建立了基于愈伤组织分化的无性快繁体系,克服了以顶芽或腋芽进行微繁快繁和扦插等繁殖技术外植体数量有限的问题。本发明以刚毛柽柳外植体获得愈伤组织并成功分化最终形成完整植株,解决了刚毛柽柳组织培养技术中的愈伤组织分化及再生这一关键问题和难题,是刚毛柽柳组织培养研究中的一个重要创新。
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公开(公告)号:CN106884020A
公开(公告)日:2017-06-23
申请号:CN201710283893.9
申请日:2017-04-26
Applicant: 东北林业大学
CPC classification number: C12N15/8205
Abstract: 一种快速高效的白桦转基因方法,它涉及一种植物转基因的方法。本发明的目的是要解决现有白桦稳定转化效率低和转化周期太长的问题。本发明的方案为:选取苗高为5~6cm的白桦组培苗,诱导培养愈伤组织;转移至含目的基因序列的根癌农杆菌侵染液中,抽真空处理后,暗培养;进行抗性苗筛选,将筛选的抗性苗转移到加选择剂和抑菌剂的生根培养基中培养,分子检测验证成功后,即完成。与现有技术相比,平均转化率提高了2.71倍。且用愈伤组织侵染转化周期比用叶片和茎为外植体转化周期缩短1/3以上。本发明应用转基因领域。
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公开(公告)号:CN106367436A
公开(公告)日:2017-02-01
申请号:CN201610766871.3
申请日:2016-08-29
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 刚毛柽柳瞬时转化方法,涉及一种植物瞬时转基因的方法。本发明是要解决现有刚毛柽柳稳定转化周期太长,刚毛柽柳原瞬时转化方法的转化效率低的问题。方法:一、选取继代培养的刚毛柽柳组培苗,将选取的刚毛柽柳组培苗放入高渗透处理液中浸泡;二、将高渗处理过的刚毛柽柳组培苗迅速转移至加有含目的基因的根癌农杆菌的侵染液中,置于真空泵中对其抽真空,置于恒温振荡器侵染;三、取出侵染完成后的组培苗,洗涤,吸干水分,插入共培养固体培养基,共培养。本方法使得柽柳瞬时转化效率大大提高。瞬时转入标记基因GUS基因的酶活性测定结果显示,本发明比柽柳原始瞬时转化方法的GUS活性提高了2.45倍。本发明用于植物瞬时转基因领域。
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公开(公告)号:CN115094083B
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202210951880.5
申请日:2022-08-09
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导的刚毛柽柳遗传转化体系的构建方法,属于植物基因工程技术领域。为解决目前刚毛柽柳转化体系无法获得稳定的遗传性状的问题,本发明提供了一种农杆菌介导的刚毛柽柳遗传转化体系的构建方法,具体步骤包括获取刚毛柽柳外植体并将在暗条件下预培养、制备含有农杆菌的侵染液、侵染、共培养和抗性芽的筛选,最终获得刚毛柽柳遗传转化株系。本发明优化了刚毛柽柳组织扩繁体系,提高了转化效率,建立了刚毛柽柳的稳定遗传转化体系,为农杆菌稳定转化刚毛柽柳打下坚实的基础,为后续刚毛柽柳基因功能及调控机制深入研究和转基因新品系的获得奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号:CN115747225A
公开(公告)日:2023-03-07
申请号:CN202210943431.6
申请日:2022-08-08
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明涉及一种山新杨PdbGRF1基因及其应用,属于植物基因工程育种技术领域。为解决现有技术无法将山新杨的GRF转录因子应用于耐盐木本植物的培育的问题,本发明提供了一种山新杨PdbGRF1基因,其基因的cDNA序列如SEQ ID No:1所示。本发明提供的山新杨PdbGRF1基因可用于提高植物耐盐性或选育耐盐转基因植物。构建山新杨PdbGRF1基因的过表达载体,通过农杆菌介导法获得稳定转化的山新杨过表达PdbGRF1株系,通过盐胁迫下表型及相关生理指标测定结果证实,过表达PdbGRF1基因明显提高了山新杨的耐盐能力,因此将山新杨PdbGRF1基因用于选育耐盐转基因植物具有非常重要的应用前景。
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公开(公告)号:CN115747225B
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202210943431.6
申请日:2022-08-08
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明涉及一种山新杨PdbGRF1基因及其应用,属于植物基因工程育种技术领域。为解决现有技术无法将山新杨的GRF转录因子应用于耐盐木本植物的培育的问题,本发明提供了一种山新杨PdbGRF1基因,其基因的cDNA序列如SEQ ID No:1所示。本发明提供的山新杨PdbGRF1基因可用于提高植物耐盐性或选育耐盐转基因植物。构建山新杨PdbGRF1基因的过表达载体,通过农杆菌介导法获得稳定转化的山新杨过表达PdbGRF1株系,通过盐胁迫下表型及相关生理指标测定结果证实,过表达PdbGRF1基因明显提高了山新杨的耐盐能力,因此将山新杨PdbGRF1基因用于选育耐盐转基因植物具有非常重要的应用前景。
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公开(公告)号:CN115067207B
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202210871170.1
申请日:2022-07-22
Applicant: 东北林业大学
IPC: A01H1/06
Abstract: 本发明涉及植物种子诱变领域,公开一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法,包括如下步骤:将白桦种子用流水冲洗;将冲洗过的容器中震荡加水,记录此时容器内液体的体积,浸泡后排水;向容器中加入处理液,在振荡器上低温诱变处理;向容器中加入解毒剂,在震荡器上震荡,将震荡后的解毒剂排出;向容器中加入蒸馏水,在震荡器上震荡,将震荡后的蒸馏水排出;将种子吸干水分后,种子播种;统计发芽率,将萌发的白桦幼苗假植,移栽至温室大棚,观察诱变M1代白桦植株表型,统计可观测突变表型的种类和数目;或胁迫处理筛选突变体,消毒、扩繁后,鉴定目标性状。本发明解决了白桦自发的基因突变频率很低、传统育种的周期很长的问题。
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公开(公告)号:CN111118036B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202010136928.8
申请日:2020-03-02
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明涉及刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因及其应用,属于植物基因工程育种技术领域。为解决无法利用刚毛柽柳的PHD转录因子编码基因培育优良耐盐植物的问题,本发明提供了刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因,即如SEQ ID No:1所示的刚毛柽柳ThPHD3基因的cDNA序列,该cDNA序列编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。构建刚毛柽柳ThPHD3基因的过表达和抑制表达载体,通过瞬时侵染获得转基因刚毛柽柳,试验证实其过表达株系具有明显的耐盐能力。ThPHD3基因的同源和异源过表达结果均表明了该基因能够明显提高转基因植物的耐盐能力,可用于提高植物耐盐性或选育耐盐性转基因植物。
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