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公开(公告)号：CN118726472A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410912906.4
申请日：2024-07-09
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域和植物基因工程领域，公开了一种农杆菌介导的鸢尾青种转化方法。该方法的主要步骤包括：选取子房膨大但尚未成熟的鸢尾青种，4℃冷藏48h；调整含有目标载体的工程农杆菌菌液至适当浓度，收集菌株，使用LSA进行重悬；使用75％酒精和5％次氯酸钠对青种进行消毒；将消毒后的青种沿着果荚棱切开，对种子造成伤口；将造成伤口的种子放入AS液体中浸泡30min，放入LSA侵染液中，150rpm·min‑1 28℃条件下摇培侵染14h；经上述方式处理后的外植体置于超净台中晾干，转接于共培养基PSA中暗培养7d；转入筛选培养基PWH中光照培养；荧光灯照射PCR扩增筛选阳性植株。
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公开(公告)号：CN117051014B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202311226151.4
申请日：2023-09-22
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了一种燕子花抗寒基因MYB97及其应用，属于植物基因工程育种领域。本发明基于植物基因克隆技术从燕子花中分离、克隆出MYB97基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。在此基础上构建酵母表达载体pGBKT7‑IlMYB97，经转录激活试验验证发现该蛋白具有转录激活活性，转录激活域位于蛋白的C端；构建过表达载体并利用叶盘转化法将上述基因导入烟草中，获得转基因植株，通过对低温处理和冷冻处理前后的表型分析，结果表明非转基因的植株的抗寒性明显低于转燕子花MYB97基因的植株，表明燕子花MYB97基因是潜在的抗寒育种基因。本发明提供的燕子花MYB97可以为耐寒育种基因资源开发利用提供参考，也为鸢尾属植物耐寒性研究提供理论基础。
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公开(公告)号：CN116003556B
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202211597023.6
申请日：2022-12-19
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明属于植物基因育种领域，具体涉及一种燕子花bHLH3蛋白及其编码基因和应用。所述的燕子花bHLH3蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码该蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，该基因能够在烟草花中调控花青素的合成，使烟草花色加深，这个特性与已报道的其它花青素调控基因的效果明显不同，同时能够使烟草花的着色提前。因此，该基因具有同时调控花青素合成和着色时期的双重作用，这在其它物种中尚未被发现。本发明提供的燕子花bHLH3蛋白及其编码基因不仅可以为燕子花花色育种提供重要基因资源，而且可以应用到其它花卉植物的育种中去。
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公开(公告)号：CN116284290B
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202211547493.1
申请日：2022-12-05
Applicant: 东北林业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/02 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了一种来源于燕子花花被片转录因子IlWRKY22。本发明提供了一种燕子花WRKY转录因子基因IlWRKY22。构建IlWRKY22基因的过表达载体，经过农杆菌介导的遗传转化，将过表达载体转入野生型拟南芥与烟草，能够明显推迟转基因拟南芥与烟草开花。IlWRKY22基因可应用于作物的基因工程遗传育种，培育晚花的品种。
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公开(公告)号：CN116042652A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211547501.2
申请日：2022-12-05
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/02 , A01H6/20
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及燕子花早花基因IlSEP3及其应用。燕子花（Iris laevigata）观赏价值高，抗寒能力强，是东北地区较为珍贵的一种园林水景绿化材料，但燕子花观赏期较短，严重限制了燕子花的推广应用。SEP3属于MADS‑box基因家族，作为花器官发育ABCDE模型中的E类基因，参与花器官原基形成，研究表明其具有促进开花的功能。本发明提供燕子花早花基因IlSEP3，其过表达导致拟南芥开花时间提前。本发明可为燕子花及其他鸢尾属植物花期调控机制的解析奠定基础，并为花期调控分子育种提供基因资源和技术支持。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116814651B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202310800033.3
申请日：2023-06-30
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/02 , A01H6/00
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域，具体涉及一种燕子花MYB4a转录因子在调控植物花柱伸长中的应用。所述的燕子花MYB4a转录因子基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，该基因在烟草中异位过表达之后能够使转基因烟草花柱伸长且高于雄蕊，对烟草育性产生了影响。本发明通过系统研究，提出了燕子花MYB4a转录因子在调控植物花柱发育的生物学功能，作为一个优秀的基因资源，为园林植物果实不育性培育提供了一种新途径。
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公开(公告)号：CN117070557A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311281188.7
申请日：2023-10-07
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域和植物基因工程领域，公开了一种快速高效的农杆菌介导的鸢尾种子遗传转化方法。该方法的主要步骤包括：成熟鸢尾种子消毒和针刺后用作遗传转化材料，调整农杆菌菌液浓度至适当值以用于侵染受体材料，依次经共培养、播种、荧光检测和PCR扩增后，鉴定转基因鸢尾植株。本发明方法无需组织培养步骤，且大部分操作过程无需在无菌条件下进行，避免了由于无菌和组培操作带来的繁琐、耗时等缺点，是一种简单、快捷、成本低、重复性较好的遗传转化方法，对于快速创制转基因鸢尾新种质具有重要的意义和价值。
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公开(公告)号：CN117051014A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202311226151.4
申请日：2023-09-22
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了一种燕子花抗寒基因MYB97及其应用，属于植物基因工程育种领域。本发明基于植物基因克隆技术从燕子花中分离、克隆出MYB97基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。在此基础上构建酵母表达载体pGBKT7‑IlMYB97，经转录激活试验验证发现该蛋白具有转录激活活性，转录激活域位于蛋白的C端；构建过表达载体并利用叶盘转化法将上述基因导入烟草中，获得转基因植株，通过对低温处理和冷冻处理前后的表型分析，结果表明非转基因的植株的抗寒性明显低于转燕子花MYB97基因的植株，表明燕子花MYB97基因是潜在的抗寒育种基因。本发明提供的燕子花MYB97可以为耐寒育种基因资源开发利用提供参考，也为鸢尾属植物耐寒性研究提供理论基础。
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公开(公告)号：CN116284290A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202211547493.1
申请日：2022-12-05
Applicant: 东北林业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/02 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了一种来源于燕子花花被片转录因子IlWRKY22。本发明提供了一种燕子花WRKY转录因子基因IlWRKY22。构建IlWRKY22基因的过表达载体，经过农杆菌介导的遗传转化，将过表达载体转入野生型拟南芥与烟草，能够明显推迟转基因拟南芥与烟草开花。IlWRKY22基因可应用于作物的基因工程遗传育种，培育晚花的品种。
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公开(公告)号：CN118086382A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410437276.X
申请日：2024-04-12
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域和植物基因工程领域，公开了一种速效的农杆菌介导的鸢尾花粉遗传转化方法。该方法的主要步骤包括：选取茎干健壮、叶片无病虫害、花朵饱满未完全绽放的植株，于早上9点对其进行去雄，套袋；调整含有目标载体的工程农杆菌菌液至适当浓度，离心收集菌株，使用MSS重悬液重悬菌株，室温静止3h；收集花朵刚绽放花药未炸开时的花粉，将花粉转移至去雄花朵的柱头上，使用1ml注射器注射农杆菌MSS重悬液至含有花粉的柱头，用手指轻轻摩挲柱头，使花药充分浸泡在重悬液中，套密封遮光袋静置30min；授粉8h后，使用注射器吸取重悬液注射花粉管，使用密封遮光袋避光3d，然后去除遮光袋，使用授粉袋套袋，支架绑在处理植株上，避免倒伏；秋天收取种子后，使用MH液体培养基进行筛选培养，进行转基因植株鉴定。
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