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公开(公告)号:CN116144743B
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202211621752.0
申请日:2022-12-16
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC: C12Q1/6858 , C12Q1/6876 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于多重长PCR结合高通量测序同时实现多个同源序列SNP分型的引物、试剂盒及方法。本发明通过跨过同源序列中SNP的侧翼序列(约200bp),根据特定的引物设计原则设计特异性的多重长PCR扩增引物(2000‑3000bp),扩增采用特异性和扩增效率较高的聚合酶并参考降落PCR反应条件做多重长PCR反应,多重长PCR产物可用于基于NGS测序平台的SNP分型鉴定。本发明的方法基于多重长PCR反应和巢式多重PCR反应,可同时实现对多个同源序列SNP精准分型,克服了KASP和三引物等位基因PCR技术通量小的缺点;相比于全基因测序,本发明只扩增目的序列,具有较低的成本和较高的性价比。
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公开(公告)号:CN106854680A
公开(公告)日:2017-06-16
申请号:CN201710160439.4
申请日:2017-03-17
Applicant: 上海星耀医学科技发展有限公司 , 上海翼和应用生物技术有限公司 , 东华大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6858 , C12Q2537/143 , C12Q2545/101 , C12Q2561/125
Abstract: 本发明提供了CYP2C19基因*2、*3、*17位点的多态性检测试剂盒,试剂盒包括PCR缓冲液,DNA聚合酶,LDR缓冲液,DNA连接酶,阳性对照,阴性对照。本发明可对提取好的DNA直接进行PCR‑LDR反应,对样本中的CYP2C19基因进行定性检测,并依靠内参基因序列作为内对照、利用UDG酶预防污染。本发明的试剂盒扩增方法简单、程序简短、操作简便、预防污染,检测结果特异性强、敏感度高、结果明晰、可信度高,可用于全血中CYP2C19基因定性检测。
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公开(公告)号:CN105695581A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201610136155.7
申请日:2016-03-10
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种基于二代测试平台的中通量基因表达分析方法,包括:按照多个基因的相对表达量将相应的PCR引物分为两组,并在组内调整引物浓度比例;构建标准品竞争性模板和待测样品竞争性模板,进行三轮多重竞争性PCR反应;混合第三轮反应产物作为二代测试平台文库上机测序,提取数据并分析,即可得到不同样本间多个基因相对表达量差异。本发明基于高速发展的二代测序平台,准确快速定量目标模板和内参照模板,并可以同时对多个样本进行5个目的基因表达差异分析,流程简单易行,价格低廉;当需要分析多样本间多基因表达差异时,不失为一种具有高准确度,通量适中,成本廉价的方法。
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公开(公告)号:CN116162692A
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202310055436.X
申请日:2023-01-18
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种端粒酶催化亚基TERT表达量检测试剂盒及其检测方法,所述试剂盒包括端粒酶TERT基因和内参GAPDH基因的RT‑PCR引物及探针、端粒酶TERT基因和内参GAPDH基因特异性的逆转录引物、阳性对照质控品和阴性对照质控品。本发明选择两种不同颜色标记的TaqMan探针分别检测内参基因及端粒酶cDNA,端粒酶活性检测准确度可达98%以上,准确度远高于现有的端粒酶活性检测技术;定量PCR法全程闭环操作,无产物交叉污染,操作简单,具有良好的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN105695581B
公开(公告)日:2020-03-10
申请号:CN201610136155.7
申请日:2016-03-10
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC: C12Q1/6869
Abstract: 本发明涉及一种基于二代测试平台的中通量基因表达分析方法,包括:按照多个基因的相对表达量将相应的PCR引物分为两组,并在组内调整引物浓度比例;构建标准品竞争性模板和待测样品竞争性模板,进行三轮多重竞争性PCR反应;混合第三轮反应产物作为二代测试平台文库上机测序,提取数据并分析,即可得到不同样本间多个基因相对表达量差异。本发明基于高速发展的二代测序平台,准确快速定量目标模板和内参照模板,并可以同时对多个样本进行5个目的基因表达差异分析,流程简单易行,价格低廉;当需要分析多样本间多基因表达差异时,不失为一种具有高准确度,通量适中,成本廉价的方法。
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公开(公告)号:CN118064558A
公开(公告)日:2024-05-24
申请号:CN202410124430.8
申请日:2024-01-29
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC: C12Q1/6851
Abstract: 本申请涉及分子检测领域,公开了一种利用实时荧光定量PCR技术精确检测端粒绝对长度的方法,包括以下步骤:1,合成端粒引物和内参引物;2,提取基因组DNA;3,qPCR扩增;4,以标准品的端粒或者内参CT值作为横坐标,标准品3个浓度梯度的log2为纵坐标构建端粒和内参的拟合方程,待测样本与校正品带入拟合方程分别计算端粒T/S值,校正品的绝对长度/检测长度得到校正系数,待测样本的T/S值都要用校正系数进行校正,样本的绝对长度利用校正后T/S*标准品绝对长度得到。本申请的方法,检测结果的稳定性大大提高,且检测结果更加准确,实现了利用实时荧光定量PCR技术个性化检测端粒绝对长度。
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公开(公告)号:CN116144743A
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202211621752.0
申请日:2022-12-16
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC: C12Q1/6858 , C12Q1/6876 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于多重长PCR结合高通量测序同时实现多个同源序列SNP分型的引物、试剂盒及方法。本发明通过跨过同源序列中SNP的侧翼序列(约200bp),根据特定的引物设计原则设计特异性的多重长PCR扩增引物(2000‑3000bp),扩增采用特异性和扩增效率较高的聚合酶并参考降落PCR反应条件做多重长PCR反应,多重长PCR产物可用于基于NGS测序平台的SNP分型鉴定。本发明的方法基于多重长PCR反应和巢式多重PCR反应,可同时实现对多个同源序列SNP精准分型,克服了KASP和三引物等位基因PCR技术通量小的缺点;相比于全基因测序,本发明只扩增目的序列,具有较低的成本和较高的性价比。
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公开(公告)号:CN101245389A
公开(公告)日:2008-08-20
申请号:CN200810035152.X
申请日:2008-03-25
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种微量DNA的多重PCR检测方法,通过改变引物浓度和引物添加方式来避免多重PCR技术中引物过多造成的竞争抑制问题,可用于起始样本非常有限的DNA,尤其是一些很珍贵的临床样本,如受精卵,激光捕获显微切割获得的细胞等。本发明整个检测方案操作过程简单,特异性高,并且灵敏度与PCR效率都很高,易于自动化,在实际应用中有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN119776556A
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202411785750.4
申请日:2024-12-06
Applicant: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一组用于细菌检测的高保守引物及应用。本发明通过对微生物16S rRNA基因序列进行高效比对和筛选后,开发一组用于快速、精准的外源微生物检测方法的高保守引物。其主要应用于细胞和基因治疗产品的质量控制。本发明通过使用高度保守的16S rRNA引物设计方法,结合简并碱基和概率分析,确保了检测的广泛覆盖率和高度特异性;能够覆盖98%以上的目标微生物。本发明设计的引物兼具高效性与灵活性,能够根据具体的检测需求,兼容TaqMan探针和SYBR Green荧光染料体系,适用于多种微生物检测场景,确保了检测的多样性和适用性。
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公开(公告)号:CN114777464A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210293810.5
申请日:2022-03-23
Applicant: 东华大学
Abstract: 本发明公开了一种引导交换介质湍流流动方向的定形机烘箱风道,包括:风道本体,所述风道本体的一端设有进风口;引流喷嘴,所述引流喷嘴的内部为引流通道,引流喷嘴的一端为连接口,引流喷嘴的另一端为出风口;引流喷嘴设于风道本体的底面处,且连接口与风道本体连通;所述引流喷嘴设有若干个,若干个引流喷嘴沿着进风方向依次设置。引流喷嘴具有引流通道,使得热风在离开风道本体后,通过具有一定长度的引流通道,再从出风口喷出,喷出的交换介质则能分布均匀并垂直吹向织物,喷出的气体流量均匀、温度均匀,本发明具有能使交换介质垂直吹向织物、保证定形中的织物整体干燥均匀、热定形干燥效率高、定形后织物的手感丰富性佳的优点。
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