公开(公告)号：CN116536245A

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202310425737.7

申请日：2023-04-20

Applicant: 东南大学

Inventor： 倪成铭 ,  孙子林 ,  孙博 ,  周云婷 ,  陈扬

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于细胞分化技术领域，具体为一种构建人胰腺星状细胞来源类胰岛的制备方法，具体为：使用酶消化法从人体胰腺组织中提取胰腺星状细胞，使用MSC完全培养液(不含血清)对胰腺星状细胞培养得到球体细胞团；使用无菌DPBS溶液对球体细胞团清洗两次，使用诱导液I对球体细胞团培养3天，诱使球体细胞朝胰腺祖细胞方向分化；使用诱导液II对球体细胞团培养3天，诱使球体细胞朝内分泌祖细胞分化；使用诱导液III对球体细胞团培养7天，诱使球体细胞朝内分泌细胞特异性分化；使用诱导液IV对球体细胞团培养10天，诱使球体细胞往成熟类胰岛分化。本发明采用分步诱导方法，能够高效的诱导胰腺星状细胞向类胰岛(多种细胞)分化。

公开(公告)号：CN116590217A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202310425416.7

申请日：2023-04-20

Applicant: 东南大学

Inventor： 倪成铭 ,  孙子林 ,  孙博 ,  周云婷 ,  蔡珍生

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于属于细胞培养技术领域，具体为一种保持胰腺星状细胞相对静息态的方法；所述培养方法具体包括：对胰腺组织进行预处理，获得得到胰腺外分泌细胞团块；使用无菌DPBS溶液(杜氏磷酸盐缓冲液)对胰腺外分泌细胞团块进行多次冲洗，使胰腺外分泌细胞团块沉降；然后使用MSC完全培养液对沉降后的胰腺外分泌细胞团块进行培养即可获得相对静息态胰腺星状细胞。本发明培养出的胰腺星状细胞能够保持相对静息状态，避免其活化，有助于研究静息状态下的胰腺星状细胞生理结构及功能，进而可为研究胰腺星状细胞在糖尿病、胰腺纤维化发生发展过程中的作用提供细胞实验模型。

公开(公告)号：CN116179469A

公开(公告)日：2023-05-30

申请号：CN202211433739.2

申请日：2022-11-16

Applicant: 东南大学

Inventor： 周云婷 ,  孙子林 ,  孙博 ,  徐伟 ,  倪成铭

IPC: C12N5/071 ,  A61K35/39 ,  A61P3/10

Abstract: 本发明公开一种胰岛星状细胞向胰岛β样细胞分化的诱导方法，所述诱导方法包括以下步骤：准备贴壁细胞；对贴壁细胞进行重组激活素‑A、碱性成纤维细胞生长因子处理，诱导细胞内胚层化；对内胚层化细胞进行视黄酸、表皮生长因子和ITS细胞培养添加物处理，诱导细胞胰腺特异化；对胰腺特异化细胞进行胰高血糖素样肽1受体的激动剂、骨形态发生蛋白4和烟酰胺处理，诱导胰岛星状细胞分化细胞形成并成熟化；对胰岛类β样细胞表型鉴定。本发明诱导方法通过分步诱导，不同诱导阶段添加不同诱导分化激活剂，可有效促进胰岛星状细胞向圆形类胰岛细胞簇分化，达到高效诱导胰岛星状细胞向胰岛β样细胞分化技术。