化学胁迫法分离纯化勤奋金属球菌

    公开(公告)号:CN1974757A

    公开(公告)日:2007-06-06

    申请号:CN200610136866.0

    申请日:2006-12-14

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 一种分离勤奋金属球菌(Metallosphaera sedula)的方法。将待分离样品在含有化学胁迫剂的培养基A中,于75℃下连续震荡富集二次,得到富集物B,再在70℃下连续震荡富集三次,得到富集物E,然后在相同条件下连续进行四次震荡稀释分离,最后得到稀释物即纯化的M.sedyla菌株。本发明选用勤奋金属球菌具有较高抗性,而对其它细菌和真菌都具有较高毒性的化学胁迫剂,在富集和纯化过程中造成强大的化学胁迫效应,对勤奋金属球菌进行定向富集和纯化,突破了一般稀释法难以分离勤奋金属球菌的难点。该方法主要适用于金属球菌属(Metallosphaera)古生菌的分离纯化。

    化学胁迫法分离纯化勤奋金属球菌

    公开(公告)号:CN100410365C

    公开(公告)日:2008-08-13

    申请号:CN200610136866.0

    申请日:2006-12-14

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 一种分离勤奋金属球菌(Metallosphaera sedula)的方法。将待分离样品在含有化学胁迫剂的培养基A中,于75℃下连续震荡富集二次,得到富集物B,再在70℃下连续震荡富集三次,得到富集物E,然后在相同条件下连续进行四次震荡稀释分离,最后得到稀释物即纯化的M.sedula菌株。本发明选用勤奋金属球菌具有较高抗性,而对其它细菌和真菌都具有较高毒性的化学胁迫剂,在富集和纯化过程中造成强大的化学胁迫效应,对勤奋金属球菌进行定向富集和纯化,突破了一般稀释法难以分离勤奋金属球菌的难点。该方法主要适用于金属球菌属(Metallosphaera)古生菌的分离纯化。

    一种分离嗜温硫氧化硫化杆菌的方法

    公开(公告)号:CN101012441A

    公开(公告)日:2007-08-08

    申请号:CN200610032337.6

    申请日:2006-09-28

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 一种分离嗜温硫氧化硫化杆菌(Sulfobacillus thermosulfidooxidans)的方法。将待分离样品在70-80℃下预处理,再接入培养基1,在50-55℃和55-60℃中静置处理,然后转接到培养基2中,在50-55℃中连续震荡富集三次,得到富集物3,再在相同温度下进行连续四次震荡稀释分离,最后得到稀释物4即纯化的S.thermosulfidooxidans菌株。本发明既突破了平板分离法的限制,又有效地克服了一般稀释法难以分离中度嗜温浸矿菌的难点,为此类菌的分离纯化找到了一条快速有效的途径。该方法主要适用于能产生芽孢的革兰氏阳性菌,重点针对嗜温硫氧化硫化杆菌。

    克隆细菌促旋酶—gyrB基因的通用引物

    公开(公告)号:CN100430413C

    公开(公告)日:2008-11-05

    申请号:CN200610136701.3

    申请日:2006-11-17

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种克隆细菌促旋酶-gyrB基因的通用引物,该通用引物的上游引物核苷酸序列为:5’-CCNGGNATG TAYATHGG-3’,所述下游引物的核苷酸序列为:5’-CATYTCNCCNARNCCYTTRWANCKYTG-3’。与已有的gyrB基因引物相比,本发明的引物包含更多的遗传信息量。用本发明的引物扩增出的PCR产物与许多细菌的gyrB基因的全长序列接近。因此,在应用本发明的通用引物对同种不同株系之间的细菌进行分型时,其特异性和敏感性更强。

    一种分离嗜温硫氧化硫化杆菌的方法

    公开(公告)号:CN100413959C

    公开(公告)日:2008-08-27

    申请号:CN200610032337.6

    申请日:2006-09-28

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 一种分离嗜温硫氧化硫化杆菌(Sulfobacillus thermosulfidooxidans)的方法。将待分离样品在70-80℃下预处理,再接入培养基1,在50-55℃和55-60℃中静置处理,然后转接到培养基2中,在50-55℃中连续震荡富集三次,得到富集物3,再在相同温度下进行连续四次震荡稀释分离,最后得到稀释物4即纯化的S.thermosulfidooxidans菌株。本发明既突破了平板分离法的限制,又有效地克服了一般稀释法难以分离中度嗜温浸矿菌的难点,为此类菌的分离纯化找到了一条快速有效的途径。该方法主要适用于能产生芽孢的革兰氏阳性菌,重点针对嗜温硫氧化硫化杆菌。

    克隆细菌促旋酶-gyrB基因的通用引物

    公开(公告)号:CN101012263A

    公开(公告)日:2007-08-08

    申请号:CN200610136701.3

    申请日:2006-11-17

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种克隆细菌促旋酶-gyrB基因的通用引物,该通用引物的上游引物核苷酸序列为:5’-CC(ATGC)GG(ATGC)ATG TA(CT)AT(ATC)GG-3’,所述下游引物的核苷酸序列为:5’-CAT(CT)TC(ATGC)CC(ATGC)A(AG)(ATGC)CC(CT)TT(AG)(AT)A(ATGC)C(GT)(CT)TG-3’)。与已有的gyrB基因引物相比,本发明的引物包含更多的遗传信息量。用本发明的引物扩增出的PCR产物与许多细菌的gyrB基因的全长序列接近。因此,在应用本发明的通用引物对同种不同株系之间的细菌进行分型时,其特异性和敏感性更强。

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