新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L

    公开(公告)号:CN1508254A

    公开(公告)日:2004-06-30

    申请号:CN02155025.5

    申请日:2002-12-19

    Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,是一种应用于噬菌体展示外源随机多肽的新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L。该载体通过在pCANTAB5X的SfiI和NotI酶切位点之间插入衔接片段Xba I-Stu I-Sal I-Kpn I-[G4S]3-Not I而获得。该载体由于提供了Sfi I,Xba I,Stu I,Sal I和Kpn I 5个常用内切酶克隆位点,故方便了外源基因的定向克隆,提高了克隆效率,有利于扩大噬菌体展示肽库库容量;又由于在噬菌体PIII蛋白基因和外源展示蛋白基因之间引入了由15个氨基酸组成的柔性多肽接头基因[G4S]3,并在该基因中适当使用了大肠杆菌稀有密码子,从而降低了所展示的外源蛋白与PIII蛋白之间的相互干扰,保持了外源蛋白和PIII蛋白的功能与活性。本发明适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量(>300个氨基酸)功能蛋白。

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