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公开(公告)号:CN109265520A
公开(公告)日:2019-01-25
申请号:CN201811118414.9
申请日:2018-09-21
Applicant: 中国人民解放军第二军医大学
Abstract: 本发明涉及一种高效识别蛋白丝氨酸庚糖基化的多克隆抗体、制备方法及其应用,所述抗体用于检测包含不同构型丝氨酸庚糖基化修饰的天然蛋白以及新型抗生素的筛选与发现。抗体的制备过程包括:先利用Wittig反应构建出七碳糖骨架,后利用Sharpless不对称氧化反应得到6位两种绝对构型的庚糖,在硫苷和三氯亚胺酯介导的糖基化反应的帮助下,获得与生物体内糖基化修饰构型一致的丝氨酸庚糖,后利用多肽固相合成方法获得相应的糖肽,序列为:Ac-GS(Hep)GL-OH;将得到的半抗原偶联到载体蛋白BSA上,得到抗原,用抗原免疫动物,收集免疫新西兰兔血液制备抗血清,并通过亲和纯化得到IgG。本发明制备的抗体特异性好,效价高。