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公开(公告)号：CN101724295A
公开(公告)日：2010-06-09
申请号：CN200910241487.1
申请日：2009-12-03
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了LE Green混合染料及其在双链核酸检测中的应用。本发明核酸染料是由LC Green和Eva Green与适当的稀释液配置而成。将双链核酸模板(基因组DNA，质粒DNA等)与合适浓度的荧光染料LE Green Mix混合，利用Modulus分光光度计、荧光酶标仪、实时定量PCR仪等荧光检测仪器对染料与纯化的双链核酸结合后所产生的荧光强度进行定量检测。本发明和传统的双链核酸紫外测定法相比更快速、准确、稳定。且较一般的双链核酸荧光测定方法特异性强，灵敏度高，能够快速对双链核酸如基因组DNA进行定量检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101173315A
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：CN200710175519.3
申请日：2007-09-30
Applicant: 中国农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明公开了一种简单快速同时检测沙门氏菌(Salmonella)、产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)和大肠杆菌的方法并由此发明了一种检测试剂盒。首先采用热裂解法(沙门菌，大肠杆菌)和酶解法(李斯特菌)提取三种微生物的DNA模板，并分别针对沙门氏菌、产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)和大肠杆菌设计了特异性的引物，实际扩增片段分别为沙门氏菌320bp、产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)440bp、大肠杆菌706bp。本发明和经典方法的细菌分离、鉴定和血清学分型试验方法相比更快速、准确。且较一般的多重PCR方法特异性强，灵敏度高，能够同时对以上三种病原菌进行检测和鉴定。
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公开(公告)号：CN101724295B
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN200910241487.1
申请日：2009-12-03
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了LE Green混合染料及其在双链核酸检测中的应用。本发明核酸染料是由LC Green和Eva Green与适当的稀释液配置而成。将双链核酸模板(基因组DNA，质粒DNA等)与合适浓度的荧光染料LE Green Mix混合，利用Modulus分光光度计、荧光酶标仪、实时定量PCR仪等荧光检测仪器对染料与纯化的双链核酸结合后所产生的荧光强度进行定量检测。本发明和传统的双链核酸紫外测定法相比更快速、准确、稳定。且较一般的双链核酸荧光测定方法特异性强，灵敏度高，能够快速对双链核酸如基因组DNA进行定量检测。
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公开(公告)号：CN101153340A
公开(公告)日：2008-04-02
申请号：CN200710175518.9
申请日：2007-09-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明是利用PCR技术鉴定已知DNA序列的两侧未知序列的方法。它是通过对已知序列的限制性内切酶位点进行酶切，回收酶切产物与一段带有酶切位点的一段特定序列(S序列)进行连接。连接后产物用两套巢式特异引物来进行扩增。其中两套引物的正向巢式引物分别选取已知序列上的常见启动子序列或者终止子序列，也可以是靠近未知边界的目的基因。其中两套引物的反向巢式引物则取自只有一端有特异酶切位点的一段特定序列。使用上述引物进行PCR扩增，运用巢式引物进行PCR产物初步鉴定，最后对所得片断进行克隆和测序鉴定。本发明通过引入特定片断序列将对未知基因序列的扩增转化成了对已知序列的扩增，该发明技术设计简单可行，操作限制少，应用范围广，结果分析简便可靠，而且成本低廉。
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公开(公告)号：CN101187633A
公开(公告)日：2008-05-28
申请号：CN200710179816.5
申请日：2007-12-18
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种双链核酸精确定量的方法。该方法用EvaGreenTM染料溶液与待测双链核苷酸溶液混合避光室温孵育，利用Modulus分光光度计、荧光酶标仪、实时定量PCR仪等荧光检测仪器对染料与纯化的双链核酸结合后所产生的荧光强度进行定量检测。本发明和传统的双链核酸紫外测定法相比更快速、准确、稳定。且较一般的双链核酸荧光测定方法特异性强，灵敏度高，能够快速对双链核酸如基因组DNA进行定量检测。
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公开(公告)号：CN100554946C
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200710179816.5
申请日：2007-12-18
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种双链核酸精确定量的方法。该方法用EvaGreenTM染料溶液与待测双链核苷酸溶液混合避光室温孵育，利用Modulus分光光度计、荧光酶标仪、实时定量PCR仪等荧光检测仪器对染料与纯化的双链核酸结合后所产生的荧光强度进行定量检测。本发明和传统的双链核酸紫外测定法相比更快速、准确、稳定。且较一般的双链核酸荧光测定方法特异性强，灵敏度高，能够快速对双链核酸如基因组DNA进行定量检测。
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