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公开(公告)号:CN101607081B
公开(公告)日:2011-11-30
申请号:CN200910145908.0
申请日:2009-06-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开家畜使用的抗布鲁氏病的疫苗及这种疫苗所用的抗原蛋白的制备方法。本发明的布鲁氏菌疫苗所用的抗原蛋白为布鲁氏菌bcsp31蛋白,特别是布鲁氏菌bcsp31重组蛋白。重组抗原蛋白的制备方法是以从布鲁氏菌提取的细菌总DNA为模板,根据布鲁氏菌bcsp31基因的核苷酸全序列设计一对引物进行聚合酶链反应,克隆获得bcsp31蛋白基因,然后转入酵母表达载体,获得重组表达载体,再将其导入酵母表达细菌中,获得重组毕赤酵母表达菌,增殖并进行诱导表达重组毕赤酵母表达菌,经分离纯化得到所用的抗原蛋白。
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公开(公告)号:CN101984068A
公开(公告)日:2011-03-09
申请号:CN201010162779.9
申请日:2010-03-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种微生物检测技术,特别是一种对布鲁氏菌进行诊断检测的试剂盒,以及这种试剂盒的使用方法。本发明的布鲁氏菌检测试剂盒至少由两对特异性扩增引物构成。本发明的原理是利用环介导等温扩增反应(简称LAMP反应),由Bst DNA聚合酶和根据靶基因序列设计的两对特殊的内、外引物(即内引物FIP/BIP和外引物F3/B3),特异性识别靶序列上的六个独立区域,启动循环链置换反应,在靶标DNA区启动互补链合成,结果在同一链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎-环DNA混合物。
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公开(公告)号:CN102764435B
公开(公告)日:2014-04-16
申请号:CN201210274528.9
申请日:2012-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗的佐剂及制备方法,这种佐剂中有重组猪白介素2(PorcineInterleukine-2,pIL-2)。本发明的猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗佐剂是由猪白介素2被一种脂质基质和乳化剂包裹构成的粒径为50-1000nm的纳米颗粒。
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公开(公告)号:CN102772793A
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN201210176460.0
申请日:2012-05-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌DNA疫苗及其构建方法及这种疫苗的应用。本发明的布鲁氏菌DNA疫苗中包含了布鲁氏菌P39和18KD基因,并可以在真核细胞中通过IRES介导共表达。本发明的布鲁氏菌DNA疫苗中有SEQ1基因序列。本发明的布鲁氏菌DNA疫苗及其构建方法是以流产布鲁氏菌2型CVCC 12的总DNA为模板,分别用P39S引物SEQ2、SEQ3和18KDS引物SEQ4、SEQ5进行聚合酶链式反应,目标基因,再将目标基因酶切后转化JM109感受态细胞,得到命名为pQC-P39/18KD的阳性质粒。再将pQC-P39/18KD和pcDNA3.1质粒酶切后用T4DNA连接酶进行连接,然后再转化E.coli DH5α,得到pcDNA-P39/18KD重组质粒。
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公开(公告)号:CN101899533B
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN201010163349.9
申请日:2010-04-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种用于检测牛流行热病毒的试剂盒,以及这种试剂盒的使用方法。本发明的检测试剂盒中至少有两对用于进行环介导等温扩增的特异性引物F3、B3、FIP和BIP;本发明所涉及的方法是利用环介导等温核酸扩增技术进行检测。本发明具有不需要热循环反应,不必在PCR仪中进行扩增,所使用的设备简单,耗时较短的优点。
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公开(公告)号:CN102764435A
公开(公告)日:2012-11-07
申请号:CN201210274528.9
申请日:2012-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗的佐剂及制备方法,这种佐剂中有重组猪白介素2(PorcineInterleukine-2,pIL-2)。本发明的猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗佐剂是由猪白介素2被一种脂质基质和乳化剂包裹构成的粒径为50-1000nm的纳米颗粒。
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公开(公告)号:CN101607081A
公开(公告)日:2009-12-23
申请号:CN200910145908.0
申请日:2009-06-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开家畜使用的抗布鲁氏病的疫苗及这种疫苗所用的抗原蛋白的制备方法。本发明的布鲁氏菌疫苗所用的抗原蛋白为布鲁氏菌bcsp31蛋白,特别是布鲁氏菌bcsp31重组蛋白。重组抗原蛋白的制备方法是以从布鲁氏菌提取的细菌总DNA为模板,根据布鲁氏菌bcsp31基因的核苷酸全序列设计一对引物进行聚合酶链反应,克隆获得bcsp31蛋白基因,然后转入酵母表达载体,获得重组表达载体,再将其导入酵母表达细菌中,获得重组毕赤酵母表达菌,增殖并进行诱导表达重组毕赤酵母表达菌,经分离纯化得到所用的抗原蛋白。
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公开(公告)号:CN102703505A
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201210156941.5
申请日:2012-05-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/10 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌重组腺病毒、该重组腺病毒的制备方法,以及这种重组腺病毒在布鲁氏菌基因工程疫苗中的用途。本发明的共表达布鲁氏菌重组腺病毒活载体中包括有布鲁氏菌L7/L12和BCSP31基因,其序列为SEQ№1,并以复制缺陷型Ad5腺病毒为载体。
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公开(公告)号:CN101948929A
公开(公告)日:2011-01-19
申请号:CN201010516857.0
申请日:2010-10-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种用于检测鸭疫里默氏杆菌的试剂盒,以及这种试剂盒的使用方法。本发明涉及的检测鸭疫里默氏杆菌的试剂盒中至少有两对用于进行环介导等温扩增的特异性引物F3、B3、FIP和BIP,为方便使用,本发明的试剂盒中还有甜菜碱、硫酸镁、dNTPs、ThermoPol反应缓冲液和Bst DNA聚合酶;或者还加有显色剂SYBR GREEN I。本发明具有便于在基层应用,检测耗时短,成本低,操作简单方便的优点。
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公开(公告)号:CN101487017B
公开(公告)日:2010-11-10
申请号:CN200910004789.7
申请日:2009-02-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种重组蛋白制备方法及用这种蛋白制备猪瘟间接血凝检测试剂盒及方法。其蛋白制备方法是从猪瘟病毒(CSFV)基因的保守区中选取一段与牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)基因同源性低于35%对应氨基酸为A1的核苷酸序列S1,再将其中的第4个氨基酸改变为亲水性氨基酸,得到氨基酸A2,再对A2对应的核苷酸序列S2进行改变,分别得到另外3段新的核苷酸序列,用联接核苷酸顺序串联,得到序列S9,其对应的氨基酸序列为A3,经相应处理后得到核苷酸序列S10,将S10人工合成、酶切、与载体pGEX-4T-1连接,重组载体导入大肠杆菌诱导表达,从表达产物中分离纯化得到重组蛋白。
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