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公开(公告)号：CN113186205A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202010030601.2
申请日：2020-01-13
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP76AK5v2的编码基因序列；本发明所提供的CYP76AK5v2基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP76AK5v2在丹参组织中的表达情况，发现其在丹参根和根周皮高丰度表达；构建了CYP76AK5v2‑RNAi载体及CYP76AK5v2‑过表达(CYP76AK5v2‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP76AK5v2‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP76AK5v2‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP76AK5v2具有反调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究有助于解析植物次生代谢途径分子机制，为丹参酮的合成生物学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN112522220A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN201910793404.3
申请日：2019-08-27
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条参与调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP71BE37的编码基因序列；本发明所提供的CYP71BE37基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP71BE37在丹参组织中的表达情况，发现其在丹参花和根的周皮部高丰度表达；构建了CYP71BE37‑RNAi载体及CYP71BE37‑过表达(CYP71BE37‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；超高效液相色谱(UPLC)检测分析发现，在CYP71BE37‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量显著降低，而在CYP71BE37‑oe株系中，丹参酮类化合物含量升高。本发明提供的CYP71BE37具有催化产生丹参酮类化合物的能力，为利用生物技术手段提高丹参酮类化合物的含量奠定基础。
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公开(公告)号：CN113186205B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202010030601.2
申请日：2020-01-13
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP76AK5v2的编码基因序列；本发明所提供的CYP76AK5v2基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP76AK5v2在丹参组织中的表达情况，发现其在丹参根和根周皮高丰度表达；构建了CYP76AK5v2‑RNAi载体及CYP76AK5v2‑过表达(CYP76AK5v2‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP76AK5v2‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP76AK5v2‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP76AK5v2具有反调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究有助于解析植物次生代谢途径分子机制，为丹参酮的合成生物学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN112143742A
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201910571191.X
申请日：2019-06-28
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因序列；本发明所提供的CYP72A395基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP72A395的转录表达谱，发现其在丹参花和根周皮高丰度表达；构建了CYP72A395‑RNAi载体及CYP72A395‑过表达(CYP72A395‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP72A395‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP72A395‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP72A395具有负调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究为提高丹参中丹参酮产量提供了新思路，并为丹参酮合成生物学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN107699576A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201710849664.9
申请日：2017-09-20
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/50
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8243
Abstract: 本发明公开了一条调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF82的编码基因序列；本发明所提供的SmAP2/ERF82基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明构建了SmAP2/ERF82-RNAi载体及SmAP2/ERF82-过表达载体，通过遗传转化方法转化丹参，获得转基因毛状根，与对照株系相比，SmAP2/ERF82-RNAi株系中二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A的含量显著降低，SmAP2/ERF82-过表达株系中二氢丹参酮I、隐丹参酮的含量显著上升。本发明提供的SmAP2/ERF82具有正调控丹参酮类化合物生物合成的功能，该类化合物具有治疗心血管疾病的显著疗效。本发明创新了丹参酮合成调控分子机制的研究思路，为丹参酮的合成生物学研究奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107699576B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN201710849664.9
申请日：2017-09-20
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/50
Abstract: 本发明公开了一条调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF82的编码基因序列；本发明所提供的SmAP2/ERF82基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明构建了SmAP2/ERF82‑RNAi载体及SmAP2/ERF82‑过表达载体，通过遗传转化方法转化丹参，获得转基因毛状根，与对照株系相比，SmAP2/ERF82‑RNAi株系中二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A的含量显著降低，SmAP2/ERF82‑过表达株系中二氢丹参酮I、隐丹参酮的含量显著上升。本发明提供的SmAP2/ERF82具有正调控丹参酮类化合物生物合成的功能，该类化合物具有治疗心血管疾病的显著疗效。本发明创新了丹参酮合成调控分子机制的研究思路，为丹参酮的合成生物学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN107699577A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201710849712.4
申请日：2017-09-20
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/06
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8243
Abstract: 本发明公开了一条调控丹酚酸合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF8的编码基因序列；本发明所提供的SmAP2/ERF8基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明构建了SmAP2/ERF8-RNAi载体及SmAP2/ERF8-过表达载体，遗传转化丹参，获得转基因毛状根，与对照株系相比，SmAP2/ERF8-RNAi株系中丹酚酸B的含量显著降低，SmAP2/ERF8-过表达株系中丹酚酸B的含量显著上升。本发明提供的SmAP2/ERF8具有正调控丹酚酸类化合物生物合成的功能，该类化合物具有治疗心血管疾病的显著疗效。本发明创新了丹酚酸合成调控分子机制的研究思路，为丹酚酸的合成生物学研究奠定基础，同时为开展丹参优良品种选育提供靶基因。
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公开(公告)号：CN112626075B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN201910948116.0
申请日：2019-10-08
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条参与调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF152的编码基因序列；本发明提供的SmAP2/ERF152基因具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列。本发明检测了SmAP2/ERF152在丹参植株中的表达情况，发现其在丹参根和根的周皮部高丰度表达；亚细胞定位实验表明SmAP2/ERF152定位于细胞核；转录激活实验表明SmAP2/ERF152具有转录激活活性；构建了SmAP2/ERF152‑RNAi载体及SmAP2/ERF152‑过表达(SmAP2/ERF152‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在SmAP2/ERF152‑RNAi株系中，隐丹参酮和丹参酮IIA含量降低，而在SmAP2/ERF152‑oe株系中，隐丹参酮和丹参酮IIA的含量显著升高。本发明提供的SmAP2/ERF152具有正向调控丹参酮生物合成的功能，为利用生物技术提高丹参酮类化合物含量奠定基础。
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公开(公告)号：CN112143742B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN201910571191.X
申请日：2019-06-28
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因序列；本发明所提供的CYP72A395基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP72A395的转录表达谱，发现其在丹参花和根周皮高丰度表达；构建了CYP72A395‑RNAi载体及CYP72A395‑过表达(CYP72A395‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP72A395‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP72A395‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP72A395具有负调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究为提高丹参中丹参酮产量提供了新思路，并为丹参酮合成生物学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN112626075A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN201910948116.0
申请日：2019-10-08
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条参与调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF152的编码基因序列；本发明提供的SmAP2/ERF152基因具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列。本发明检测了SmAP2/ERF152在丹参植株中的表达情况，发现其在丹参根和根的周皮部高丰度表达；亚细胞定位实验表明SmAP2/ERF152定位于细胞核；转录激活实验表明SmAP2/ERF152具有转录激活活性；构建了SmAP2/ERF152‑RNAi载体及SmAP2/ERF152‑过表达(SmAP2/ERF152‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在SmAP2/ERF152‑RNAi株系中，隐丹参酮和丹参酮IIA含量降低，而在SmAP2/ERF152‑oe株系中，隐丹参酮和丹参酮IIA的含量显著升高。本发明提供的SmAP2/ERF152具有正向调控丹参酮生物合成的功能，为利用生物技术提高丹参酮类化合物含量奠定基础。
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