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公开(公告)号:CN107937349B
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN201711207218.4
申请日:2017-11-27
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12P21/02
Abstract: 本发明提供一种稳定表达非洲猪瘟病毒P54蛋白的Vero细胞系,其保藏号为CGMCC No.14316。该细胞系不仅能识别非洲猪瘟的多克隆抗体,而且还能与非洲猪瘟感染猪的阳性血清发生特异性反应。本发明的非洲猪瘟P54抗原的单克隆Vero细胞系可用于稳定表达非洲猪瘟病毒P54蛋白,可作为细胞模型或病毒感染模型进行应用,细胞传代稳定性好,生长速度快,培养条件简单,能保证大量供应,对于非洲猪瘟的检测及致病机理研究具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105463067B
公开(公告)日:2019-05-17
申请号:CN201510155670.5
申请日:2015-04-02
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了用于鉴定日本血蜱的靶序列、引物、鉴定方法及试剂盒,属于蜱虫检测与鉴定技术领域。所述靶序列如SEQ ID NO.1所示,是首次扩增出的日本血蜱COI全长序列的一段。本发明提供了可特异性扩增日本血蜱COI部分序列的引物对,分别如SEQ ID No.2‑5所示,通过两次PCR反应可实现对日本血蜱快速、准确的鉴定。本发明克服了传统日本血蜱分类鉴定对标本完成性要求高、对鉴定者的专业分类水平要求高等诸多问题,提供的PCR引物及鉴定方法以及试剂盒操作方便,灵敏度高、特异性强、简单快速、成本低,能够满足日本血蜱快速、准确的物种分子鉴定需求,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105505921B
公开(公告)日:2018-12-21
申请号:CN201510159413.9
申请日:2015-04-03
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6888
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,具体提供了奥斯特线虫/马歇尔线虫COI基因的扩增引物及其应用。所述奥斯特线虫/马歇尔线虫COI基因的扩增引物如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,其可以有效扩增出现有技术中通用引物LCO1490和HCO2198不能扩增的奥斯特线虫/马歇尔线虫的COI目的片段。满足反刍动物奥斯特线虫/马歇尔线虫的物种分子鉴定需求,同时也能为奥斯特线虫/马歇尔线虫种系发生关系研究、反刍动物胃肠道寄生虫病防控提供可靠的分子技术指导。
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公开(公告)号:CN105463067A
公开(公告)日:2016-04-06
申请号:CN201510155670.5
申请日:2015-04-02
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
Abstract: 本发明提供了用于鉴定日本血蜱的靶序列、引物、鉴定方法及试剂盒,属于蜱虫检测与鉴定技术领域。所述靶序列如SEQ ID NO.1所示,是首次扩增出的日本血蜱COI全长序列的一段。本发明提供了可特异性扩增日本血蜱COI部分序列的引物对,分别如SEQ ID No.2-5所示,通过两次PCR反应可实现对日本血蜱快速、准确的鉴定。本发明克服了传统日本血蜱分类鉴定对标本完成性要求高、对鉴定者的专业分类水平要求高等诸多问题,提供的PCR引物及鉴定方法以及试剂盒操作方便,灵敏度高、特异性强、简单快速、成本低,能够满足日本血蜱快速、准确的物种分子鉴定需求,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104232587A
公开(公告)日:2014-12-24
申请号:CN201410443339.9
申请日:2014-09-02
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12P21/02 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种稳定表达施马伦贝格病毒(SBV)核衣壳蛋白的BHK-21细胞系,其保藏号为CGMCC No.7616,命名为BHK-21-pLV-EGFP-SBV-N。细胞免疫荧光试验结果表明,该细胞系不仅与SBV的单克隆抗体2C8发生特异性反应,而且还能识别SBV感染牛的阳性血清。稳定表达SBV N蛋白的BHK-21细胞系可用于施马伦贝格病的检测,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN103695565A
公开(公告)日:2014-04-02
申请号:CN201310741946.9
申请日:2013-12-27
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12Q2565/301
Abstract: 本发明提供了一种焦磷酸测序技术检测小反刍兽疫疫苗毒的试剂盒,其包括小反刍兽疫特异性引物及焦磷酸测序引物,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2-4所示。通过提取待测样品的RNA,以上述特异性引物进行RT-PCR扩增,若引物扩增片段长度为180bp,再进行焦磷酸测序反应,若测序片段与N基因目标片段(SEQ ID NO.1)完全相同的,确定为小反刍兽疫疫苗毒,若测序片段与目标片段有一个或一个以上碱基不同,则判定样品为阴性。本发明试剂盒可用于对小反刍兽疫疫苗毒进行快速检测,具有高通量、低成本的特点,产物可直接用于测序,不需要进行二次处理,操作极为简便,所需样品量小,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN103275219A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310221585.5
申请日:2013-06-05
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
IPC: C07K16/10 , G01N33/577 , C12N5/20 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种施马伦贝格病毒核衣壳蛋白单克隆抗体,其是由保藏号为CGMCC No.7617的杂交瘤细胞SBV-N McAb2C8分泌产生的。该杂交瘤细胞的制备方法为:提取SBV基因组RNA,经RT-PCR扩增获得N基因序列,并插入到原核表达载体中,转化大肠杆菌进行诱导表达以及蛋白纯化;将纯化蛋白作为抗原免疫动物,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞,经筛选获得可稳定分泌抗施马伦贝格病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。该单克隆抗体为施马伦贝格病ELISA检测方法的建立提供物质基础。
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公开(公告)号:CN102433392B
公开(公告)日:2013-05-15
申请号:CN201110415602.X
申请日:2011-12-13
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
Abstract: 本发明提供了一种用于检测裂谷热病毒S片段的引物和探针,其中上游引物5’-GGATTACTTTCCTGTGATATCTGTTG-3’,下游引物5’-GTATCCTGGGAGGRCCATCWC-3’(R为A或G,W为T或A),探针5’-F1-ACTCCACTGACACAACACGACGACCACT-Q1-3′,F1为报告荧光基团,Q1为淬灭荧光基团。本发明还提供了裂谷热病毒S片段的实时荧光RT-PCR检测方法,该方法以裂谷热病毒假病毒颗粒为模板,用上述引物和探针进行实时荧光RT-PCR反应,根据反应结果判定是否为裂谷热病毒。本发明探针灵敏度高,特异性好,与非洲猪瘟、虹彩病毒、羊痘病毒均无交叉反应。
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公开(公告)号:CN102417905A
公开(公告)日:2012-04-18
申请号:CN201110425163.0
申请日:2011-12-16
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
Abstract: 本发明提供了一种动物组织样品中病原核酸的提取试剂。该试剂pH为7-9,溶剂是水,溶质是如下终浓度的物质:4M-6M异硫氰酸胍,20mM-25mM柠檬酸钠,0.2%-0.5%质量百分比的十二烷基肌氨酸钠(SLS)。采用该试剂提取核酸成本低廉,无有毒有害试剂,安全快速,适用于提取动物组织样品中病原核酸。
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公开(公告)号:CN108707583A
公开(公告)日:2018-10-26
申请号:CN201810500641.1
申请日:2018-05-23
Applicant: 中国检验检疫科学研究院
IPC: C12N5/10 , C12Q1/02 , A61K39/155 , A61P31/14 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本公开提供了一种可诱导稳定表达小反刍兽疫病毒P蛋白的细胞株,该细胞株的保藏编号为CGMCC NO.14317。可选地,所述小反刍兽疫病毒P蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。另一方面,本公开还提供了如上所述的细胞株在筛选药物中的用途。另一方面,本公开还提供了如上所述的细胞株在制备疫苗中的用途。另一方面,本公开还提供了如上所述的细胞株在制备检验试剂盒中的用途。通过上述技术方案,本发明提供了可诱导稳定小反刍兽疫病毒P蛋白表达的细胞株,一方面能够用于筛选药物、制备疫苗和检验抗体;另一方面,对于深入研究P蛋白的致病机理及其在小反刍兽疫的预防与控制方面具有重要意义。
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