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公开(公告)号:CN108168992B
公开(公告)日:2020-08-25
申请号:CN201611115172.9
申请日:2016-12-07
Applicant: 中国科学院大连化学物理研究所
IPC: G01N1/40
Abstract: 本发明涉及材料分析化学和翻译后修饰蛋白组学等领域。本发明涉及一种糖肽的分离富集方法,该方法是使用一种具有二维多孔晶体结构的高掺氮量的碳材料与蛋白酶解物接触,利用材料与糖肽间的亲水作用、静电作用、CH3‑π等作用,采用固相萃取(SPE)或者分散固相萃取(dSPE)分离模式分离富集糖肽,并对样品进行质谱分析。该方法通过优化上样液、淋洗液和洗脱液的组成、酸碱性、缓冲盐等参数,实现了对糖肽的选择性富集。该方法具有稳定性好、选择性高、吸附量大、灵活性强、操作简便可控等优点,可用于标准品和复杂样品的糖肽富集。
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公开(公告)号:CN109932463A
公开(公告)日:2019-06-25
申请号:CN201711350885.8
申请日:2017-12-15
Applicant: 中国科学院大连化学物理研究所
Abstract: 本发明涉及一种基于纳孔有机共价骨架材料的内源性肽富集方法。本方法使用一种具有六方堆、均一孔道结构的共价有机骨架聚合物材料,以蛋白及其酶解液的混合物,以及人血清样品为模式样品,利用材料均一孔径对蛋白等大分子的排阻作用和材料与内源性肽间的疏水及静电作用,采用固相萃取(SPE)或者分散固相萃取(dSPE)分离模式,通过优化上样液、淋洗液和洗脱液的组成、酸碱性、缓冲盐等参数,实现了对复杂样品中内源性肽的高效选择性富集。该方法具有稳定性好、选择性高、吸附量大、灵活性强、操作简便可控等优点,可用于各种复杂生物样品中的内源性肽富集。
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公开(公告)号:CN108168992A
公开(公告)日:2018-06-15
申请号:CN201611115172.9
申请日:2016-12-07
Applicant: 中国科学院大连化学物理研究所
IPC: G01N1/40
Abstract: 本发明涉及材料分析化学和翻译后修饰蛋白组学等领域。本发明涉及一种糖肽的分离富集方法,该方法是使用一种具有二维多孔晶体结构的高掺氮量的碳材料与蛋白酶解物接触,利用材料与糖肽间的亲水作用、静电作用、CH3‑π等作用,采用固相萃取(SPE)或者分散固相萃取(dSPE)分离模式分离富集糖肽,并对样品进行质谱分析。该方法通过优化上样液、淋洗液和洗脱液的组成、酸碱性、缓冲盐等参数,实现了对糖肽的选择性富集。该方法具有稳定性好、选择性高、吸附量大、灵活性强、操作简便可控等优点,可用于标准品和复杂样品的糖肽富集。
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公开(公告)号:CN111808164A
公开(公告)日:2020-10-23
申请号:CN201910292397.9
申请日:2019-04-12
Applicant: 中国科学院大连化学物理研究所
IPC: C07K1/16
Abstract: 本发明涉及分析化学和翻译后修饰蛋白组学领域。本发明提供一种富集分离磷酸化蛋白的方法,该方法是以多氢键响应性聚合物作为富集材料,采用柱固相萃取模式或分散固相萃取模式从复杂生物样品中提取出磷酸化蛋白。所述多氢键响应性聚合物材料是利用表面引发-原子转移自由基聚合方法将异丙基丙烯酰胺和硫脲衍生物在基底材料表面共聚所得。该方法通过优化上样液,淋洗液和洗脱液的有机溶剂种类和浓度、缓冲盐类型和浓度、pH、温度等富集参数,实现了对磷酸化蛋白的高选择性富集。该方法具有选择性高、吸附量大、方法灵活可控、操作简便易行等优点,适用于生物样品中磷酸化蛋白的高选择性富集。
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公开(公告)号:CN109932224A
公开(公告)日:2019-06-25
申请号:CN201711366365.6
申请日:2017-12-18
Applicant: 中国科学院大连化学物理研究所
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明提供了一种富集提取循环肿瘤DNA的方法,属生物技术领域。本发明具体步骤如下:1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中,形成微固相萃取柱,采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱,将生物样品溶解于上样液中,并上样到微固相萃取柱上,循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100-1000:1;2)采用5-200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱,3)采用5-100倍柱体积的洗脱液洗脱得DNA;上述整个过程在10-60℃进行。所述循环肿瘤DNA富集材料为双组分聚合物功能化材料。本发明方法在提取循环肿瘤DNA方面表现出了高选择性和高通量等特点,可以实现对循环肿瘤DNA的有效分离和富集。
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公开(公告)号:CN109929832A
公开(公告)日:2019-06-25
申请号:CN201711367616.2
申请日:2017-12-18
Applicant: 中国科学院大连化学物理研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明提供一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法,属生物技术领域。本发明采用分散固相萃取模式,具体步骤如下:1)先采用上样液平衡DNA富集材料,将该DNA富集材料与生物样品以质量比100-1000:1混合,孵化0.5-720min,过滤或者离心分离,弃上混合层清液,收集沉淀;2)采用1-6清洗液与沉淀混合,孵化0.5分钟-60分钟,过滤或者离心分离,弃上层清液,收集沉淀;3)采用pH 8-13洗脱液与沉淀混合,孵化0.5分钟-60分钟,过滤或者离心分离,收集上清液,得ctDNA,上述整个过程在10-60℃进行,所述DNA富集材料为双组分聚合物。本发明的方法在提取循环肿瘤DNA方面表现出了高选择性和高通量等特点,可以实现循环肿瘤DNA的有效分离和富集。
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公开(公告)号:CN109932463B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN201711350885.8
申请日:2017-12-15
Applicant: 中国科学院大连化学物理研究所
Abstract: 本发明涉及一种基于纳孔有机共价骨架材料的内源性肽富集方法。本方法使用一种具有六方堆、均一孔道结构的共价有机骨架聚合物材料,以蛋白及其酶解液的混合物,以及人血清样品为模式样品,利用材料均一孔径对蛋白等大分子的排阻作用和材料与内源性肽间的疏水及静电作用,采用固相萃取(SPE)或者分散固相萃取(dSPE)分离模式,通过优化上样液、淋洗液和洗脱液的组成、酸碱性、缓冲盐等参数,实现了对复杂样品中内源性肽的高效选择性富集。该方法具有稳定性好、选择性高、吸附量大、灵活性强、操作简便可控等优点,可用于各种复杂生物样品中的内源性肽富集。
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