公开(公告)号：CN109182558B

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN201811336852.2

申请日：2018-11-12

Applicant: 中山大学孙逸仙纪念医院

Inventor： 马广伟 ,  周怡婷 ,  杨嘉文 ,  张雪妍 ,  郭雅彬

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种能预示和鉴定绵羊羊毛自然长度的分子标记引物对及应用，引物对，如序列表Seq ID No.1和Seq ID No.2所示。应用如下：设计引物对，并提取绵羊基因组DNA进行扩增，然后酶切，获得酶切产物；酶切产物电泳分离，根据电泳分离结果进行基因型判定；进行关联分析，并估计性状的最小二乘均值，结果为3种基因型中具有GG基因型群体的羊毛自然长度显著高于AA基因型和GA基因型群体，最后确定选取GG基因型的母羊做育种群体。本发明能预示和鉴定绵羊羊毛自然长度，为绵羊羊毛的品质性状改良提供了一个更为有效的分子标记方法，应用于筛选羊毛纤维自然长度长的绵羊分子辅助育种领域。本发明操作简单、费用低。

公开(公告)号：CN109182558A

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201811336852.2

申请日：2018-11-12

Applicant: 中山大学孙逸仙纪念医院

Inventor： 马广伟 ,  周怡婷 ,  杨嘉文 ,  张雪妍 ,  郭雅彬

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种能预示和鉴定绵羊羊毛自然长度的分子标记引物对及应用，引物对，如序列表Seq ID No.1和Seq ID No.2所示。应用如下：设计引物对，并提取绵羊基因组DNA进行扩增，然后酶切，获得酶切产物；酶切产物电泳分离，根据电泳分离结果进行基因型判定；进行关联分析，并估计性状的最小二乘均值，结果为3种基因型中具有GG基因型群体的羊毛自然长度显著高于AA基因型和GA基因型群体，最后确定选取GG基因型的母羊做育种群体。本发明能预示和鉴定绵羊羊毛自然长度，为绵羊羊毛的品质性状改良提供了一个更为有效的分子标记方法，应用于筛选羊毛纤维自然长度长的绵羊分子辅助育种领域。本发明操作简单、费用低。

公开(公告)号：CN111793642B

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202010681641.3

申请日：2020-07-15

Applicant: 中山大学孙逸仙纪念医院

Inventor： 尹东 ,  张寅 ,  黄泳欣 ,  陈捷 ,  汪单兰 ,  郭雅彬

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种用于高效稳定过表达长链非编码RNA的克隆载体及其应用。本发明的克隆载体是含有IRDR‑L‑IRDR‑R盒的双链环状质粒，IRDR‑L‑IRDR盒包括IRDR‑L序列、CMV启动子、BGH poly(A)序列、IRDR‑R序列、PKG启动子和筛选基因序列。本发明的克隆载体使外源的lncRNA稳定表达，且保持原有的长度，有效的保持其功能特性，更真实地反应其功能。

公开(公告)号：CN111793642A

公开(公告)日：2020-10-20

申请号：CN202010681641.3

申请日：2020-07-15

Applicant: 中山大学孙逸仙纪念医院

Inventor： 尹东 ,  张寅 ,  黄泳欣 ,  陈捷 ,  汪单兰 ,  郭雅彬

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种用于高效稳定过表达长链非编码RNA的克隆载体及其应用。本发明的克隆载体是含有IRDR-L-IRDR-R盒的双链环状质粒，IRDR-L-IRDR盒包括IRDR-L序列、CMV启动子、BGH poly(A)序列、IRDR-R序列、PKG启动子和筛选基因序列。本发明的克隆载体使外源的lncRNA稳定表达，且保持原有的长度，有效的保持其功能特性，更真实地反应其功能。

公开(公告)号：CN107686848A

公开(公告)日：2018-02-13

申请号：CN201710880749.3

申请日：2017-09-26

Applicant: 中山大学孙逸仙纪念医院

Inventor： 郭雅彬 ,  胡开顺 ,  陈震 ,  李瑜

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/85

CPC classification number: C12N15/907 ,  C12N9/22 ,  C12N15/85 ,  C12N2800/107 ,  C12N2800/90 ,  C12N2810/10

Abstract: 本发明公开一种转座子协同CRISPR/Cas9系统的稳定敲除单质粒载体及其应用，属于基因工程领域。该单质粒载体是含有IRDR-L-IRDR-R盒的双链环状质粒，所述IRDR-L-IRDR-R盒包括IRDR-L序列、启动子、gRNA scaffold序列、Cas9蛋白序列、抗性筛选基因序列和IRDR-R序列。本发明的单质粒载体仅需要一次构建、一次转染即可实现sgRNA和Cas9蛋白的表达，该法过程简单、高效、快捷，大大简化质粒构建流程，缩短实验周期，提高工作效率。本发明的载体带有转座酶识别序列，不使用病毒，能方便、快速、安全地建立基因敲除稳定株；包括嘌呤霉素筛选抗性，便于稳定株的筛选。