一种基于生长轴相关基因血液生化标记选育武定鸡的方法

    公开(公告)号:CN105510573B

    公开(公告)日:2017-06-27

    申请号:CN201511017350.X

    申请日:2015-12-29

    Abstract: 本发明涉及一种基于生长轴相关基因血液生化标记选育武定鸡的方法,属于家禽血液生化标记技术领域,其具体步骤为:1)采集待测武定鸡的血液,制备血清,检测血清中IGF‑1的浓度值;2)将步骤1)测得的浓度值与武定鸡血液生化标记进行对比,将待测武定鸡区别为快长型武定鸡和慢长型武定鸡。本发明通过测定生长轴上相关基因GH、GHBP和IGF‑1在慢长型和快长型武定鸡中的浓度变化,结合测量的武定鸡的体尺指数,确定慢长型和快长型武定鸡体型血液生化标记,不断筛选优质鸡只,为武定鸡的早期育种提供理论基础,同时也是探索武定鸡的育种新方法,为云南地方鸡种在育种工作中提供新思路。

    一种从鸡血中提取大量高纯度DNA的方法

    公开(公告)号:CN102660537A

    公开(公告)日:2012-09-12

    申请号:CN201210126927.0

    申请日:2012-04-27

    Abstract: 本发明公开了一种从鸡血中提取大量高纯度DNA的方法,包括以下步骤:吸取解冻的DNA保存液保存的鸡血样品到含试剂X的离心管中;用移液枪反复垂悬,直到使原血样变为澄清的液体状;离心,弃掉上清液;加入试剂Y,轻轻悬浮上一步离心后的沉淀物;加入Rnase A,混匀后,37℃温浴30min;加入5mol/L高氯酸钠,手动振荡混合10min;水浴,期间每隔5min手工晃动一次;加入预冷的三氯甲烷,混合5min;离心,吸取上清到另一离心管中;加入等体积的异丙醇,缓慢摇动,即可见絮状DNA;用预冷的75%乙醇洗涤2次,晾干,用适量的TE溶解,4℃存放一周,转至-20℃长期保存;本发明提取DNA耗时较短、提取的DNA样品纯度高,浓度大、质量好,能完全满足下游分子生物学实验的要求。

    B型牛库布病毒实时荧光定量检测方法

    公开(公告)号:CN118547112A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202410625415.1

    申请日:2024-05-20

    Abstract: 本发明属于病毒检测领域,提供了B型牛库布病毒实时荧光定量检测方法,包括以下步骤:确定特异性引物:针对BKV 3D基因的保守区域,采用一对特异性引物;核酸提取及反转录:用Trizol Reagent法提取总RNA,将RNA核酸反转录成cDNA,并保存于‑20℃;制备阳性标准品:用BKV的cDNA为模板,使用引物进行PCR反应及电泳检测,对PCR鉴定为阳性的克隆质粒测序,并构建出重组质粒,将测序结果正确的重组质粒作为模板;反应体系及条件的优化:反应体系为20μL体系,其对0.2~0.6μL引物浓度和57~64℃退火温度进行优化;建立标准曲线;本发明通过建立BKV实时荧光定量PCR检测方法,该方法操作简单、特异性强、敏感性高、重复性好,为BKV感染的临床诊断及分子流行病学调查提供了技术支撑。

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