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公开(公告)号：CN103740865B
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201410034604.8
申请日：2014-01-25
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒特异性混合抗体诱捕病样中病毒，不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应，专门针对烟草生产过程对烟草中上部叶片为害较为严重且不能从症状区分病原而建立的一种单管同时检测3种病毒中的1、2或3种不同病毒组合的方法，检测时间仅需5小时。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合，同时设置健康烟草随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照，从而快速、准确、灵敏的检测田间烟草植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等。
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公开(公告)号：CN101974654A
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201010519281.3
申请日：2010-10-26
Applicant: 云南省烟草公司昭通市公司 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 , 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明是一种马铃薯Y病毒烟草分离物不同株系的检测方法。通过马铃薯Y病毒特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用马铃薯Y病毒不同株系外壳蛋白基因简并引物进行一步法反转录聚合酶链式反应(one stepRT-PCR)、利用限制性内切酶EcoR V对PCR产物进行酶切，琼脂糖凝胶电泳检测目的片段。该方法将快速、特异和高灵敏度的免疫捕捉RT-PCR与快捷的PCR产物酶切鉴定，从而快速、简便的检测马铃薯Y病毒烟草分离物不同株系。
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公开(公告)号：CN103740865A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201410034604.8
申请日：2014-01-25
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒特异性混合抗体诱捕病样中病毒，不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应，专门针对烟草生产过程对烟草中上部叶片为害较为严重且不能从症状区分病原而建立的一种单管同时检测3种病毒中的1、2或3种不同病毒组合的方法，检测时间仅需5小时。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合，同时设置健康烟草随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照，从而快速、准确、灵敏的检测田间烟草植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等。
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公开(公告)号：CN109254019B
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN201811105047.9
申请日：2018-09-21
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N23/04
Abstract: 本发明提供了一种烟草脆裂病毒粒体原位分离固定电子显微镜诊断方法，包括取样、切丝固定、负染色、电镜观察等步骤。整个过程仅用时十几分钟，具有快速、准确、高效等特点。
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公开(公告)号：CN109211954A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201811105112.8
申请日：2018-09-21
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N23/22 , G01N23/2202
Abstract: 本发明提供了一种马铃薯X病毒粒体的原位分离固定电子显微镜诊断方法，包括取样、切丝固定、负染色、电镜观察分析等步骤。整个过程仅用时十几分钟，具有快速、准确、高效等特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101824490B
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN201010172289.7
申请日：2010-05-14
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明提供了一种水稻矮缩病毒的快速检测方法，其步骤包括通过水稻矮缩病毒抗体特异捕获水稻矮缩病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用水稻矮缩病毒特异性引物进行一步法反转录聚合酶链式反应one step RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳检测目的片段；该方法利用抗体的高效价及特异性，可特异快速的获得目的片段，为研究病毒的分子变异而进行的基因组序列扩增提供了快捷特异的方法，从而完善了免疫捕获RT-PCR的技术。
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公开(公告)号：CN102128929A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010592484.5
申请日：2010-12-16
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种水稻矮缩病毒三抗夹心酶联检测试剂盒，试剂盒包含阳性对照、阴性对照、水稻矮缩病毒多克隆抗体、水稻矮缩病毒单克隆抗体、酶标抗体及其它材料和药品，所说的其它材料和药品包括被缓冲液、PBST、病毒抽提缓冲液、封闭缓冲液、底物缓冲液、底物、5块酶标板及20个一次性滴管，水稻矮缩病毒多克隆抗体在分离提纯水稻矮缩病毒后，通过家兔免疫分离血清得到；所述的水稻矮缩病毒单克隆抗体在分离提纯水稻矮缩病毒后，通过小鼠免疫、细胞融合、克隆纯化得到；本发明制备的试剂盒检测灵敏度高、特异性强，可规模化生产用于水稻矮缩病的田间监测。
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公开(公告)号：CN101824490A
公开(公告)日：2010-09-08
申请号：CN201010172289.7
申请日：2010-05-14
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明提供了一种水稻矮缩病毒的快速检测方法，其步骤包括通过水稻矮缩病毒抗体特异捕获水稻矮缩病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用水稻矮缩病毒特异性引物进行一步法反转录聚合酶链式反应one step RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳检测目的片段；该方法利用抗体的高效价及特异性，可特异快速的获得目的片段，为研究病毒的分子变异而进行的基因组序列扩增提供了快捷特异的方法，从而完善了免疫捕获RT-PCR的技术。
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公开(公告)号：CN109254019A
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201811105047.9
申请日：2018-09-21
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N23/04
Abstract: 本发明提供了一种烟草脆裂病毒粒体原位分离固定电子显微镜诊断方法，包括取样、切丝固定、负染色、电镜观察等步骤。整个过程仅用时十几分钟，具有快速、准确、高效等特点。
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