一种耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN119081984B

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202411586405.8

    申请日:2024-11-08

    Inventor: 刘占英

    Abstract: 本发明公开了一种耐受低pH值的工程希瓦氏重组菌及其构建方法,涉及基因工程技术领域,该工程希瓦氏重组菌是以希瓦氏菌(Shewanella oneidensis)MR‑1为出发菌株,向其中引入编码质子转运蛋白的外源基因所得。构建方法为:S1:获得线性化载体pYYDT;S2:将外源基因片段与线性化载体pYYDT利用T4连接酶连接,转入大肠杆菌DH5α的感受态,挑选出阳性克隆进行菌落PCR和测序,获得重组质粒;S3:将重组质粒导入到大肠杆菌DAP营养缺陷型菌株中,进行筛选;S4:利用接合转移技术将大肠杆菌携带的重组质粒转移到希瓦氏菌(Shewanella oneidensis)MR‑1中,即得希瓦氏重组菌。本发明改造后的菌株不仅适用于微生物燃料电池,还可以用于处理高酸性工业废水,拓展了希瓦氏菌的应用领域。

    一株高产耐温速溶型黄原胶的野油菜黄单胞菌及其应用

    公开(公告)号:CN117568232B

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202311763508.2

    申请日:2023-12-21

    Inventor: 刘占英 孙晗

    Abstract: 本发明公开了一株高产耐温速溶型黄原胶的野油菜黄单胞菌及其应用,属于微生物技术领域,该野油菜黄单胞菌为Xanthomonas campestris Y‑11,于2023年05月12日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:63460。本发明提供的野油菜黄单胞菌,黄原胶产胶率相比于原始菌株提升10%~20%,发酵所得黄原胶溶解速度快、不易结团并耐高温等特性,适用于耐温速溶型黄原胶的发酵生产中;同时,对野油菜黄单胞菌进行遗传稳定性分析,进行连续传代培养,每隔2次传代测定黄原胶的产胶率,在连续传代12次后的黄原胶产胶率和胶品质变化幅度不显著,证明其稳定性良好,可以作为工业生产菌株进行耐温速溶型黄原胶的放大化生产。

    一株高产耐温速溶型黄原胶的野油菜黄单胞菌及其应用

    公开(公告)号:CN117568232A

    公开(公告)日:2024-02-20

    申请号:CN202311763508.2

    申请日:2023-12-21

    Inventor: 刘占英 孙晗

    Abstract: 本发明公开了一株高产耐温速溶型黄原胶的野油菜黄单胞菌及其应用,属于微生物技术领域,该野油菜黄单胞菌为Xanthomonas campestris Y‑11,于2023年05月12日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:63460。本发明提供的野油菜黄单胞菌,黄原胶产胶率相比于原始菌株提升10%~20%,发酵所得黄原胶溶解速度快、不易结团并耐高温等特性,适用于耐温速溶型黄原胶的发酵生产中;同时,对野油菜黄单胞菌进行遗传稳定性分析,进行连续传代培养,每隔2次传代测定黄原胶的产胶率,在连续传代12次后的黄原胶产胶率和胶品质变化幅度不显著,证明其稳定性良好,可以作为工业生产菌株进行耐温速溶型黄原胶的放大化生产。

    一种小分子玉米皮多糖的提取方法

    公开(公告)号:CN115651092B

    公开(公告)日:2023-11-03

    申请号:CN202211429093.0

    申请日:2022-11-15

    Abstract: 本发明公开了一种小分子玉米皮多糖的提取方法,步骤为:取玉米皮进行粉碎过筛;使用酸性低共熔溶剂对过筛的玉米皮进行加热浸提,加入水搅拌分散均匀之后,过滤分离;将过滤液旋蒸去除水分子得到多糖低共熔溶剂浓缩液,加入无水乙醇,静置,离心分离,经无水乙醇洗涤,冷冻干燥得到玉米皮粗多糖;将玉米皮粗多糖经过乙醇分级醇沉纯化得到小分子玉米皮多糖。本发明的技术方案使用酸性低共熔溶剂提取的玉米皮多糖分子量小,工艺简单;本发明优选使用乳酸/氯化胆碱低共熔溶剂提取到的玉米皮粗多糖的提取率高,且乳酸与氯化胆碱的摩尔比为10:1,降低了工艺成本。

    枯草芽孢杆菌BC-9及其在降解半纤维素中的应用

    公开(公告)号:CN116536221A

    公开(公告)日:2023-08-04

    申请号:CN202310721265.X

    申请日:2023-06-16

    Inventor: 崔金娜 刘占英

    Abstract: 本发明涉及微生物技术领域,特别是涉及枯草芽孢杆菌BC‑9及其在降解半纤维素中的应用。本发明所述枯草芽孢杆菌BC‑9的半纤维素降解率达到44.65%~44.68%,相对于原始菌株半纤维素降解率提高了120.28%~120.42%,且该菌株经过连续12代传代培养后其半纤维素降解率能达到45%以上,具有良好的遗传稳定性,是一株半纤维素降解能力更高的菌株,可用于降解半纤维素,为木质纤维素的降解和利用提供一种优质的菌种资源。

    一株可分泌纤维素酶的大肠杆菌及其在降解纤维素中的应用

    公开(公告)号:CN111733103A

    公开(公告)日:2020-10-02

    申请号:CN202010623641.8

    申请日:2020-06-29

    Inventor: 刘占英 庞建 郝敏

    Abstract: 本发明公开了一株可分泌纤维素酶的大肠杆菌及其在降解纤维素中的应用。大肠杆菌具体为Escherichia coli ZH-4,其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO:M2019850。实验证明,Escherichia coli ZH-4可以降解富含纤维素和半纤维素的玉米秸秆。Escherichia coli ZH-4具有分泌纤维素酶的能力且能够降解纤维素,为有效利用木质纤维素废物提供了新途径。本发明具有重要的应用价值。

    一种粪肠球菌菌株及其应用

    公开(公告)号:CN106167785B

    公开(公告)日:2019-05-28

    申请号:CN201610748236.2

    申请日:2016-08-29

    Inventor: 刘占英

    CPC classification number: Y02E50/17

    Abstract: 本发明公开了一种粪肠球菌菌株及其应用。本发明提供一种粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CTB,其保藏编号为CGMCC 12734。本发明还保护粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CTB在生产乙醇和L‑乳酸中的应用。本发明还保护一种生产乙醇的方法和一种生产L‑乳酸的方法。本发明提供的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CTB可以利用廉价原料玉米秸秆、沙柳和生物柴油行业副产物甘油等直接生产L‑乳酸和乙醇,降低了原料成本,减少原料预处理成本。本发明为大宗化学品L‑乳酸和乙醇的廉价生产、青贮饲料和微生物饲料的开发和生产提供了优良菌种。

    混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法

    公开(公告)号:CN105941828A

    公开(公告)日:2016-09-21

    申请号:CN201610317675.8

    申请日:2016-05-16

    CPC classification number: Y02P60/877

    Abstract: 本发明涉及一种混合菌种联合发酵生产复合饲料的方法,该方法利用玉米麸皮为主要原料通过黑曲霉、木霉、枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌分批培养,联合转化固态发酵生产微生物饲料,包括原料的预处理、霉菌发酵剂的复配、酵母复合发酵菌剂的混配、乳酸菌发酵剂的制作、分步固态发酵、干燥和粉碎等工艺步骤。本发明可以充分高效的利用玉米麸皮资源,提高其附加值。可使肠道中的有害菌落减少,有效发挥调理保健,提高饲料利用率,防病促长,减少抗生素等药物使用,提高畜禽产品品质的功效,减轻排泄物臭味,改善养殖环境,是一种喂养畜禽用质优价廉的绿色生物饲料。

    一种来源于粪肠球菌CTB的二糖水解酶GenA的制备方法

    公开(公告)号:CN119242613A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202411077037.4

    申请日:2024-08-07

    Inventor: 刘占英 韩晓东

    Abstract: 本发明公开了一种来源于粪肠球菌CTB的二糖水解酶GenA的制备方法,涉及水解酶技术领域。包括:S1:通过PCR从粪肠球菌CTB的基因组中扩增GenA基因,并将PCR扩增产物通过TEV/LiC系统将GenA基因克隆到Pet30质粒载体上,得到重组质粒;S2:将重组质粒转化至感受态大肠杆菌中;S3:对过量表达GenA基因的大肠杆菌进行裂解、筛选和纯化,即可得到二糖水解酶GenA。本发明通过PCR扩增、克隆、裂解、筛选和纯化等步骤得到的酶不仅能水解麦芽糖、还能水解乳糖和纤维二糖,为麦芽糖、乳糖、纤维二糖的水解提供了一种新的选择。

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