一种植物胞嘧啶单碱基编辑器及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN119639719A

    公开(公告)日:2025-03-18

    申请号:CN202411517675.3

    申请日:2024-10-29

    Abstract: 本发明提供了一种植物胞嘧啶单碱基编辑器及其构建方法和应用,涉及植物基因工程技术领域。本发明所述的单碱基编辑器命名为hyPopCBE,该编辑器包含hA3A/Y130F胞嘧啶脱氨酶、优化后的人源Rab51单链DNA结合蛋白结构域、nCas9核酸酶和尿嘧啶糖基化酶抑制剂的融合蛋白、噬菌体MS2外壳蛋白和尿嘧啶糖基化酶抑制剂的融合蛋白表达单元以及整合了MS2结合序列的向导RNA转录表达单元。相比现有植物胞嘧啶单碱基编辑器,本发明构建的单碱基编辑器能够显著提高植物等位基因的编辑效率,稳定性更强;将其应用于杨树中,能够成功创制出抗除草剂杨树新种质,为杨树功能基因组的研究和分子育种提供了技术支持。

    一种染色体步移文库的构建方法

    公开(公告)号:CN101230490A

    公开(公告)日:2008-07-30

    申请号:CN200810100936.6

    申请日:2008-02-26

    Inventor: 李伟 李慧 陈晓阳

    Abstract: 本发明提供了一种染色体步移文库构建方法,其包括采用至少一种粘性末端限制性内切酶消化基因组DNA,得到粘性末端DNA片段,用单链核酸外切酶处理粘性末端DNA片段,使其成为平末端DNA片段,与接头分子连接,得到染色体步移文库。本发明的方法大大增加了构建文库的种类、降低了构建文库的成本,有效提高了染色体步移PCR的扩增效率和染色体步移结果的准确性。

    一种染色体步移文库的构建方法

    公开(公告)号:CN101230490B

    公开(公告)日:2013-01-30

    申请号:CN200810100936.6

    申请日:2008-02-26

    Inventor: 李伟 李慧 陈晓阳

    Abstract: 本发明提供了一种染色体步移文库构建方法,其包括采用至少一种粘性末端限制性内切酶消化基因组DNA,得到粘性末端DNA片段,用单链核酸外切酶处理粘性末端DNA片段,使其成为平末端DNA片段,与接头分子连接,得到染色体步移文库。本发明的方法大大增加了构建文库的种类、降低了构建文库的成本,有效提高了染色体步移PCR的扩增效率和染色体步移结果的准确性。

    一种快速分析烟草花冠中花青素苷的方法

    公开(公告)号:CN102004138A

    公开(公告)日:2011-04-06

    申请号:CN201010278170.8

    申请日:2010-09-10

    Abstract: 本发明公开了快速分析烟草中花青素苷的方法,该方法包括对烟草花冠提取液进行高效液相色谱法分离和采用质谱法鉴定花青素苷分子结构。该方法可以在短时间内分析大量烟草花冠中花青素苷样品,分析速度迅速,分析结果准确,降低了分析成本,为不采用高新分析仪器,如超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),进行花青素苷合成相关基因在烟草中的异源表达研究提供了一种有效、快捷、实用的分析方法。

    一种油松体细胞胚发生与植株再生方法

    公开(公告)号:CN104381131B

    公开(公告)日:2016-06-29

    申请号:CN201410573714.1

    申请日:2014-10-24

    Abstract: 本发明公开了一种油松体细胞胚胎发生和植株再生方法,包括1)采集油松球果并进行表面灭菌,获得无菌合子胚;2)将无菌合子胚接种到胚性愈伤组织诱导培养基上,进行愈伤组织诱导培养;3)将获得的胚性愈伤组织接种于体细胞胚成熟培养基上,进行体细胞胚发生培养;4)将成熟的体细胞胚接种于萌发培养基中进行萌发培养,获得体胚苗;5)将体胚苗进行炼苗、移栽,即得。通过本发明的诱导方法,首次通过诱导胚性愈伤组织的途径获得了大量稳定生长的油松体细胞胚,并获得完整小植株。本发明方法中愈伤组织诱导率、体细胞胚发生率、萌发率高,可以在短期内形成大量优良的油松试管苗,可进行规模化、工厂化生产。

    一种钝顶螺旋藻细胞壁多糖及其提取方法和应用

    公开(公告)号:CN118930678A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202411204875.3

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明提供了一种钝顶螺旋藻细胞壁多糖及其提取方法和应用,涉及螺旋藻多糖提取技术领域。本发明以钝顶螺旋藻渣为原料,通过单因素实验优化提取过程,获得钝顶螺旋藻细胞壁多糖。本发明的提取方法获得钝顶螺旋藻细胞壁多糖的纯度达到68%以上,得率为1.8%以上。本发明通过对钝顶螺旋藻细胞壁多糖进行体外抗氧化活性测定,发现钝顶螺旋藻细胞壁多糖可有效清除DPPH自由基、羟基自由基,总还原力较强。本发明的提取方法不仅为钝顶螺旋藻多糖的深入研究提供理论支持,还为钝顶螺旋藻多糖的资源开发利用提供科学依据。

    一种钝顶螺旋藻可溶性多糖及其提取方法和应用

    公开(公告)号:CN118930677A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202411203938.3

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明提供了一种钝顶螺旋藻可溶性多糖及其提取方法和应用,涉及螺旋藻多糖提取技术领域。本发明以钝顶螺旋藻粉为原料,使用响应面法优化提取工艺,获得钝顶螺旋藻可溶性多糖。本发明的提取方法获得钝顶螺旋藻可溶性多糖的得率在7%以上。本发明通过CCK‑8评价可溶性多糖对肿瘤细胞生长及杀伤作用,结果表明其能够抑制4T1、HeLa、HCT116多种肿瘤细胞生长。本发明通过建立4T1荷瘤小鼠模型评价可溶性多糖的体内抗肿瘤活性,表明WSP‑TCA在体内能够有效抑制实体瘤的生长,抗肿瘤效果显著。本发明提取获得的钝顶螺旋藻可溶性多糖具有良好生物安全性且具备抗肿瘤活性的天然物质,为其在癌症防治等领域的应用提供可能。

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