公开(公告)号：CN112322646A

公开(公告)日：2021-02-05

申请号：CN202011279881.7

申请日：2020-11-16

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李晓娟 ,  张原 ,  鲁雨晴 ,  边佳辉 ,  姚晓敏 ,  张耿 ,  苏晓 ,  刘佩佩

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/62 ,  C12N15/29 ,  C12P21/02 ,  C07K14/415 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明公开了植物膜结合转录因子原核表达纯化的方法，包括如下步骤，步骤1：设计引物构建原核表达载体；步骤2：原核系统中蛋白的表达；步骤3：蛋白纯化。本发明在传统原核表达纯化的基础上，根据膜结合蛋白的蛋白结构与性质，优化了其纯化方法，并筛选了相应的诱导表达条件与纯化缓冲液配置方法，实现了对膜结合蛋白的原核高浓度纯化表达。

公开(公告)号：CN115267260B

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202210923781.6

申请日：2022-08-02

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李晓娟 ,  苏晓

IPC: G01Q60/24

Abstract: 本发明公开了一种适用于原子力显微镜检测植物细胞质膜损伤程度的方法，包含以下步骤：步骤1、制备拟南芥原生质体；步骤2、将原生质体过滤后100g离10min，去除上清液，加入W5洗涤液洗脱两次；步骤3、将洗脱后的原生质体分成两份，一份直接加入4％的戊二醛进行过夜固定，另外一份加入10mM的MβCD进行处理，处理15min后，立即用W5洗涤液进行洗脱，洗脱两次后加入4％的戊二醛进行过夜固定；步骤4、将固定后的原生质体，用蒸馏水洗脱两次后，滴加在云母片上，室温下干燥后，即可用AFM扫描成像，本发明提供了造成拟南芥细胞质膜损伤的方法，和可以定量分析其损伤程度的方法。

公开(公告)号：CN115267260A

公开(公告)日：2022-11-01

申请号：CN202210923781.6

申请日：2022-08-02

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李晓娟 ,  苏晓

IPC: G01Q60/24

Abstract: 本发明公开了一种适用于原子力显微镜检测植物细胞质膜损伤程度的方法，包含以下步骤：步骤1、制备拟南芥原生质体；步骤2、将原生质体过滤后100g离10min，去除上清液，加入W5洗涤液洗脱两次；步骤3、将洗脱后的原生质体分成两份，一份直接加入4％的戊二醛进行过夜固定，另外一份加入10mM的MβCD进行处理，处理15min后，立即用W5洗涤液进行洗脱，洗脱两次后加入4％的戊二醛进行过夜固定；步骤4、将固定后的原生质体，用蒸馏水洗脱两次后，滴加在云母片上，室温下干燥后，即可用AFM扫描成像，本发明提供了造成拟南芥细胞质膜损伤的方法，和可以定量分析其损伤程度的方法。