公开(公告)号：CN101092604A

公开(公告)日：2007-12-26

申请号：CN200710040794.4

申请日：2007-05-17

Applicant: 华东理工大学

Inventor： 魏东芝 ,  马兴元 ,  郑宇 ,  赵莉 ,  刘美云

IPC: C12N1/21 ,  C12P7/28 ,  C12N15/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生产二羟基丙酮的基因工程菌，其构建方法及其用途。本发明公开了一种新的生产二羟基丙酮的基因工程菌株，该菌株为用重组基因工程质粒pET－gdh和pET－ndh转化的大肠杆菌。本发明进一步公开了上述工程菌的构建及其用途和应用。利用本发明的工程菌生产二羟基丙酮，提高了二羟基丙酮的转化率，同时收集到的菌体经处理后可循环利用，该工艺简化了微生物生产二羟基丙酮的工艺，降低了生产成本，缩短了发酵时间，提高了生产效率。

公开(公告)号：CN1861790A

公开(公告)日：2006-11-15

申请号：CN200610026019.9

申请日：2006-04-25

Applicant: 华东理工大学

Inventor： 刘清海 ,  陶欣艺 ,  熊玉春 ,  刘美云 ,  宋庆训 ,  马兴元 ,  杨忠 ,  童望宇 ,  魏东芝

IPC: C12N15/16 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C07K14/635 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种利用基因工程技术制备重组人甲状旁腺激素1－84的方法。采用大肠杆菌偏爱密码子，本发明设计合成了rhPTH 1－84的编码序列并构建了载体和工程菌。本发明以可溶形式在大肠杆菌胞质中高效表达含hPTH 1－84完整序列的融合蛋白，融合蛋白经金属螯合层析纯化后，以肠激酶酶切，再经离子交换、凝胶层析等进一步纯化，获得了纯度98％以上的rhPTH 1－84，得率可达300mg/l。

公开(公告)号：CN101104859A

公开(公告)日：2008-01-16

申请号：CN200710040184.4

申请日：2007-04-28

Applicant: 华东理工大学

Inventor： 马兴元 ,  郑宇 ,  郑文云 ,  刘美云 ,  魏东芝

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/31 ,  C12N1/19 ,  C12P1/02 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及对已有的甲醇酵母(Pichia pastoris)表达系统的改进技术及其应用。本发明依据毕赤酵母碳源与氮源代谢途径及其遗传特性，对可采用胆碱等无毒氮源营养物质诱导表达的甲醛脱氢酶1(FLD1)启动子PFLD1基因进行克隆与分析的基础上，提供了启动子为甲醛脱氢酶启动子的毕赤酵母表达载体、其制备方法及应用，以及相应的表达系统及其应用。采用本发明提供的表达载体或表达系统表达外源蛋白质可采用无毒的胆碱等氮源作为诱导剂，也可获得与采用有毒诱导物甲醇接近同样的外源蛋白表达效率。这种不用有毒诱导物的绿色安全表达体系可以应用于生产医药级与食品级的基因工程产品。

公开(公告)号：CN101113982A

公开(公告)日：2008-01-30

申请号：CN200710042364.6

申请日：2007-06-21

Applicant: 华东理工大学

Inventor： 魏东芝 ,  马昱澍 ,  殷晓浦 ,  刘美云

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/566 ,  A61K38/26 ,  A61P3/10

Abstract: 胰高血糖素样肽－1受体(GLP－1受体)是当今公认的、最重要的抗糖尿病药物作用靶点之一。本发明涉及胰高血糖素样肽－1受体的多肽类激动剂的体外筛选方法及筛选得到的多肽。本发明公开了一种体外筛选胰高血糖素样肽－1受体的多肽类激动剂的方法，该筛选方法以重组的GLP－1受体蛋白的膜外N端片段(N－GLP－1R)为靶点，利用其体外结合能力，并结合噬菌体展示技术和Phage－ELISA技术而建立。本发明还公开了用该方法筛选获得的多肽序列。本发明公开的筛选方法简便、快捷，适合体外高通量筛选GLP－1受体多肽类激动剂，为开发治疗糖尿病的多肽类药物提供了新的方法和思路，节省了筛选时间，降低了开发成本。