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公开(公告)号:CN115449524B
公开(公告)日:2024-08-27
申请号:CN202211122390.0
申请日:2022-09-15
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母中重复序列介导的基因无抗性整合系统及应用,属于基因工程领域。本发明首先选择或构建某参与细胞重要生理功能基因其表达盒一端存在突变或缺失而导致功能不足的缺陷型菌株,随后在特定位点整合携带该基因表达盒另一端中部分序列突变或缺失的截短型表达盒的表达载体,在菌株需要该基因功能才能正常生长或代谢的培养条件下,载体引入的截短型表达盒和缺陷型菌株中缺陷基因片段所含重复序列之间将通过分子内同源重组生成完整基因表达盒并剔除表达载体引入的抗生素基因,最终实现无抗性整合。本发明不需借助CRISPR‑Cas和位点特异性重组系统等基因编辑工具,可高效地实现外源基因在酵母中的无抗性整合,且操作简单。
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公开(公告)号:CN113186190A
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202110571089.7
申请日:2021-05-25
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/81 , C12N15/65 , C07K14/195
Abstract: 本发明公开了一种可被蓝光蛋白SV40‑VP‑EL识别并结合的蓝光调节启动子PC120,属于微生物技术领域。本发明还公开了一种包含该蓝光调节启动子PC120的蓝光介导调节质粒,该质粒中还包括转录翻译蓝光蛋白的融合基因PGAP‑SV40‑VP‑EL。本发明进一步公开所述质粒的制备方法以及所述质粒和/或构建方法在毕赤酵母调节中的应用。本发明的蓝光介导调节质粒为毕赤酵母的诱导表达提供了一种无创性、调节可逆性以及高时空分辨率的蓝光调节方式,有利于拓宽毕赤酵母在生产生活中的调节方法。
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公开(公告)号:CN118374535A
公开(公告)日:2024-07-23
申请号:CN202410528445.0
申请日:2024-04-29
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母高效无痕基因敲除载体及其应用,属于微生物基因工程领域。本发明毕赤酵母高效无痕基因敲除载体包括两个不同条件诱导的压力基因表达盒、筛选基因表达盒、待敲除片段的上、下游同源序列及该片段内部同源序列;本发明中敲除载体单交换整合入目的位点后,通过引导两轮分子内重组后即可高效地实现基因无痕敲除。本发明不需抑制NEHJ途径,仅需单个载体即可非常高效地实现毕赤酵母中基因的无痕敲除。
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公开(公告)号:CN115418371A
公开(公告)日:2022-12-02
申请号:CN202210974824.3
申请日:2022-08-15
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种解脂耶氏酵母中基因连续无标记整合系统及应用,属于微生物基因工程领域。本发明整合系统基于Cre/loxP位点特异性重组,首先通过第一型载体转化宿主完成第一轮基因无标记整合并引入左臂或右臂突变型lox序列,随后通过交替使用携带有两种特定组合的左臂、右臂突变型lox序列的第二型载体和第三型载体,最终能够高效地在解脂耶氏酵母基因组单个位点处实现目的基因的连续无标记整合。本发明仅需使用单个酵母筛选标记,且能高效地实现大肠杆菌复制起点与筛选标记、Cre基因表达盒、酵母筛选标记及冗余的同源片段等几乎所有非必须DNA片段的剔除,使得多个目的基因表达盒能以特定方式在单个基因位点处实现连续无标记整合。
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公开(公告)号:CN113462688B
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202110731798.7
申请日:2021-06-30
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/81 , C12N15/62 , C07K19/00 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种蓝光调节启动子、蓝光调节启动子的融合基因、蓝光介导调节质粒及构建方法和应用。本发明提供了一种蓝光调节启动子PC120‑CYC。本发明利用基于此合成的融合基因和蓝光介导调节质粒验证了蓝光诱导调节方式在解脂耶氏酵母的基因表达与调控过程中的可行性。本发明提供的蓝光介导调节质粒非常简洁紧凑,还能够在解脂耶氏酵母单细胞水平上被蓝光诱导。蓝光介导调节质粒的应用中,无毒无害、响应快速、操作简便、可逆性好,能够有效推动解脂耶氏酵母在食品、医药、农产品加工等领域的广泛应用。
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公开(公告)号:CN113488152B
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN202110793215.3
申请日:2021-07-14
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种语义分诊方法及系统,方法包括:获取实际问诊数据;将实际问诊数据输入到科室分类模型中,得到目标科室;科室分类模型的建立方法包括:获取历史问诊数据;历史问诊数据包括历史病情描述和对应的历史科室;根据历史问诊数据对长短期记忆网络模型进行训练,得到科室分类模型。现有的分诊方法需要导诊员根据病情描述来人工判断对应的科室,而人工速度是有限的,本发明利用科室分类模型,只需要输入病情描述,即可自动得到目标科室,提高了分诊的效率;且导诊员完全凭借经验来进行科室分诊,易出错,本发明利用大量的历史数据训练得到的科室分类模型进行分诊操作,提高了分诊的准确率。
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公开(公告)号:CN119715721A
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202411935506.1
申请日:2024-12-26
Applicant: 华中科技大学
IPC: G01N27/28 , G01N27/30 , G01N27/414 , G01N27/48
Abstract: 本申请属于气体传感器领域,具体公开了一种基于量子点的硫化氢气体传感器及其制备方法。所述硫化氢气体传感器包括电子器件以及在所述电子器件的工作电极或栅极上覆盖的量子点薄膜,在所述量子点薄膜的表面结合有0.8 mg/cm2~4.0 mg/cm2的超氧化物歧化酶;所述电子器件为平面电化学三电极或高电子迁移率晶体管;所述硫化氢气体传感器使用1‑乙基‑3‑甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐作为电解液。本申请基于酶与底物“钥匙‑锁”的特异性催化作用设计了超氧化物歧化酶基量子点气体传感器解决了传统气体传感器有选择性但无特异性的制约,实现了硫化氢气体的特异性检测。
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公开(公告)号:CN115418371B
公开(公告)日:2024-07-02
申请号:CN202210974824.3
申请日:2022-08-15
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种解脂耶氏酵母中基因连续无标记整合系统及应用,属于微生物基因工程领域。本发明整合系统基于Cre/loxP位点特异性重组,首先通过第一型载体转化宿主完成第一轮基因无标记整合并引入左臂或右臂突变型lox序列,随后通过交替使用携带有两种特定组合的左臂、右臂突变型lox序列的第二型载体和第三型载体,最终能够高效地在解脂耶氏酵母基因组单个位点处实现目的基因的连续无标记整合。本发明仅需使用单个酵母筛选标记,且能高效地实现大肠杆菌复制起点与筛选标记、Cre基因表达盒、酵母筛选标记及冗余的同源片段等几乎所有非必须DNA片段的剔除,使得多个目的基因表达盒能以特定方式在单个基因位点处实现连续无标记整合。
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公开(公告)号:CN114806490B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202210454606.7
申请日:2022-04-27
Applicant: 华中科技大学
IPC: C09J177/04 , C08G69/48 , C12N9/02 , C12N11/10 , C12P7/18
Abstract: 本发明涉及一种贻贝仿生界面粘合材料及其制备方法与应用,属于仿生材料技术领域。方法为:合成仿生粘胶高分子前体PGA‑T‑A;用固定化酪氨酸酶在还原性环境中活化前体PGA‑T‑A,得到仿生粘胶高分子PGA‑D‑A;合成仿生还原性高分子前体PGA‑bis‑C,切断其中的二硫键,得到活化的仿生还原性高分子PGA‑C,将它与PGA‑D‑A混合,并用醋酸加强环境的酸性,以模拟贻贝仿生高分子在界面粘附之前的储存过程;在界面粘附时采用类似贻贝粘胶蛋白的延迟氧化环境,所得粘胶在潮湿环境下的剪切粘附力能达到9.5MPa,超过了其它贻贝仿生粘附材料。
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公开(公告)号:CN114806490A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210454606.7
申请日:2022-04-27
Applicant: 华中科技大学
IPC: C09J177/04 , C08G69/48 , C12N9/02 , C12N11/10 , C12P7/18
Abstract: 本发明涉及一种贻贝仿生界面粘合材料及其制备方法与应用,属于仿生材料技术领域。方法为:合成仿生粘胶高分子前体PGA‑T‑A;用固定化酪氨酸酶在还原性环境中活化前体PGA‑T‑A,得到仿生粘胶高分子PGA‑D‑A;合成仿生还原性高分子前体PGA‑bis‑C,切断其中的二硫键,得到活化的仿生还原性高分子PGA‑C,将它与PGA‑D‑A混合,并用醋酸加强环境的酸性,以模拟贻贝仿生高分子在界面粘附之前的储存过程;在界面粘附时采用类似贻贝粘胶蛋白的延迟氧化环境,所得粘胶在潮湿环境下的剪切粘附力能达到9.5MPa,超过了其它贻贝仿生粘附材料。
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