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公开(公告)号:CN115433687B
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202211194134.2
申请日:2022-09-28
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C02F3/34 , C12R1/645 , C02F101/20
Abstract: 本发明涉及广谱、高效吸附并偶联生物矿化去除重金属离子的工程菌,涉及属于微生物基因工程及生物矿化领域。本发明以解脂耶氏酵母为表达宿主,利用细胞表面展示系统,构建了一种集重金属离子吸附‑生物矿化于一体的工程菌,含有吸附系统和矿化系统;吸附系统含有第一锚定蛋白和重金属吸附蛋白或多肽;矿化系统含有第二锚定蛋白和碳酸酐酶。本发明将此基因工程菌应用于修复重金属污染修复,在反应2h后,工程菌对铅离子、汞离子、镍离子、镉离子、钴离子等诸多重金属离子都具有良好的吸附效果,且实现重金属离子吸附后的工程菌还能进行生物矿化。因此,本发明的菌株在重金属环境污染治理领域具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN110408645B
公开(公告)日:2021-01-08
申请号:CN201910747704.8
申请日:2019-08-14
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种解脂耶氏酵母中目的基因多次无痕整合系统及方法,属于基因工程技术领域。本发明所述系统通过质粒1转化解脂耶氏酵母能够引入lox位点,而后通过质粒2和质粒3依次转化,能够实现目的基因任意次数无痕整合到解脂耶氏酵母基因组。本发明仅需一个酵母筛选标记即可实现目的基因任意次数的整合,同时,本发明极大地降低了非目的基因的引入,且每次整合后的基因组均是已知可控的,这有利于解脂耶氏酵母表达系统在食品、医药、农产品加工等领域的应用。
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公开(公告)号:CN117625668A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311592995.0
申请日:2023-11-27
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及属于微生物基因工程及生物工程技术领域,涉及一种产硫化氢工程菌、构建方法及应用。本发明以解脂耶氏酵母为底盘细胞,通过分析硫代谢通路,利用CRISPR‑Cas9技术,构建了能高产硫化氢的解脂耶氏酵母中Met25基因和YALI0F14047g基因突变菌株。经过改造内源硫代谢途径之后,硫化氢从几乎不产到产量可达560ppm。本发明将此基因工程菌应用于重金属污染修复领域,在处理12h后,工程菌对Cd2+、Cu2+、Pb2+的去除率可达到90%以上,对Hg2+的去除率可达40%。因此,本发明菌株在重金属环境污染治理领域具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN117229990A
公开(公告)日:2023-12-15
申请号:CN202311400003.X
申请日:2023-10-26
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明属于基因工程及生物矿化领域,涉及一种高酶活的碱性磷酸酶表面展示工程菌、构建及应用。本发明以大肠杆菌为宿主,利用细胞表面展示系统,将碱性磷酸酶展示在细胞表面,构建了多种可高效去除重金属离子的生物矿化工程菌,并通过对底物的作用,诱导重金属离子的矿化。使用本发明的基因工程菌应用于修复重金属污染修复,在反应2h后,工程菌对Cd2+、Co2+、Cu2+、Mn2+、Ni2+等诸多重金属离子均具有良好的吸附及生物矿化效果。因此,本发明的菌株在重金属环境污染治理领域具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN108004264B
公开(公告)日:2020-09-08
申请号:CN201711340835.1
申请日:2017-12-14
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了毕赤酵母基因敲除和抗性基因回收载体及构建方法与运用,属于微生物基因工程领域。本发明毕赤酵母基因敲除的模板载体包括毕赤酵母甲醇型启动子AOX1调控的mazf基因表达盒以及两端的lox71和lox66特异性重组酶识别位点和博来霉素抗性基因表达盒;本发明毕赤酵母基因抗性基因回收载体包括利用毕赤酵母甲醇型启动子AOX1调控的mazf基因表达盒、利用GAP启动子组成型表达的cre基因表达盒和HygB抗性基因表达盒。本发明极大地提高了毕赤酵母基因的敲除效率。本发明提供了基因敲除后抗生素标记回收的方法,为多基因的高效敲除提供了极大的便利,且敲除的效率高,使用的同源臂短。
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公开(公告)号:CN115433687A
公开(公告)日:2022-12-06
申请号:CN202211194134.2
申请日:2022-09-28
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C02F3/34 , C12R1/645 , C02F101/20
Abstract: 本发明涉及广谱、高效吸附并偶联生物矿化去除重金属离子的工程菌,涉及属于微生物基因工程及生物矿化领域。本发明以解脂耶氏酵母为表达宿主,利用细胞表面展示系统,构建了一种集重金属离子吸附‑生物矿化于一体的工程菌,含有吸附系统和矿化系统;吸附系统含有第一锚定蛋白和重金属吸附蛋白或多肽;矿化系统含有第二锚定蛋白和碳酸酐酶。本发明将此基因工程菌应用于修复重金属污染修复,在反应2h后,工程菌对铅离子、汞离子、镍离子、镉离子、钴离子等诸多重金属离子都具有良好的吸附效果,且实现重金属离子吸附后的工程菌还能进行生物矿化。因此,本发明的菌株在重金属环境污染治理领域具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN110408645A
公开(公告)日:2019-11-05
申请号:CN201910747704.8
申请日:2019-08-14
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种解脂耶氏酵母中目的基因多次无痕整合系统及方法,属于基因工程技术领域。本发明所述系统通过质粒1转化解脂耶氏酵母能够引入lox位点,而后通过质粒2和质粒3依次转化,能够实现目的基因任意次数无痕整合到解脂耶氏酵母基因组。本发明仅需一个酵母筛选标记即可实现目的基因任意次数的整合,同时,本发明极大地降低了非目的基因的引入,且每次整合后的基因组均是已知可控的,这有利于解脂耶氏酵母表达系统在食品、医药、农产品加工等领域的应用。
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公开(公告)号:CN108004264A
公开(公告)日:2018-05-08
申请号:CN201711340835.1
申请日:2017-12-14
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了毕赤酵母基因敲除和抗性基因回收载体及构建方法与运用,属于微生物基因工程领域。本发明毕赤酵母基因敲除的模板载体包括毕赤酵母甲醇型启动子AOX1调控的mazf基因表达盒以及两端的lox71和lox66特异性重组酶识别位点和博来霉素抗性基因表达盒;本发明毕赤酵母基因抗性基因回收载体包括利用毕赤酵母甲醇型启动子AOX1调控的mazf基因表达盒、利用GAP启动子组成型表达的cre基因表达盒和HygB抗性基因表达盒。本发明极大地提高了毕赤酵母基因的敲除效率。本发明提供了基因敲除后抗生素标记回收的方法,为多基因的高效敲除提供了极大的便利,且敲除的效率高,使用的同源臂短。
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