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公开(公告)号：CN106434723A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610867378.0
申请日：2016-09-30
Applicant: 华侨大学
IPC: C12N15/70
CPC classification number: C12N15/70
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开一种利用聚乙烯亚胺提高热激法质粒转化大肠杆菌感受态效率的方法，包括以下步骤：制备感受态细胞；配置浓度为10-7v/v-10-8v/v的PEI溶液备用；在转化体系中加入所述的聚乙烯亚胺溶液进行转化和克隆，得到重组的DNA分子克隆。本发明可以显著提高热激法质粒DNA转化E.coli BL21(DE3)的效率，填补了将化合物，如聚乙烯亚胺PEI作为增效剂应用于提高转化效率这一领域的空白。
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公开(公告)号：CN105200074A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510602398.0
申请日：2015-09-21
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种利用DNA非特异性结合蛋白HU蛋白构建克隆载体的方法，通过对待连接的DNA片段设计引物，并引入DNA同源同组序列，在分别进行扩增，扩增产物和HU混合，利用传统的转化方法在大肠杆菌中进行转化和克隆，得到重组DNA质粒。本发明方法不依赖于任何重组酶，不受载体和目的片段的酶切位点限制，用同源重组的方法和HU蛋白一起完成目的片段与载体相连接的基因克隆技术。该技术操作简单，PCR产物一步定向克隆，目的片段与载体同源重组连接，常温反应时间短至15分钟，阳性率高达90％以上。
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公开(公告)号：CN114014939A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111393764.8
申请日：2021-11-23
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明属于食品技术领域，具体涉及一种牛乳铁蛋白肽融合蛋白、编码基因和保鲜剂及其在水果保鲜中的应用。本发明提供了一种从N端至C端包括依次连接的牛乳铁蛋白肽、单链DNA结合蛋白和绿色荧光蛋白的牛乳铁蛋白肽融合蛋白。利用本发明所述融合蛋白能够长时间维持水果的新鲜度。
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公开(公告)号：CN104845965A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510206587.6
申请日：2015-04-28
Applicant: 华侨大学
Abstract: 一种利用多聚化合物提高RCA扩增效率的方法，包括：分别配置浓度为0.1g/ml的PEG 3350、0.2mg/l的mPEG-SC 2000和0.1mg/l的mPEG-SC 5000三种溶液；使用TempliPhi DNA测序模板扩增试剂盒，按照试剂盒的说明进行变性操作和培育操作，通过在滚环扩增过程中添加一定浓度的聚乙二醇或其衍生物，然后分别将RCA扩增产物于1％琼脂糖凝胶中进行电泳。本发明可以显著地提高滚环扩增的效率，增强滚环扩增的灵敏度，实现了对市售RCA试剂盒的进一步优化。
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公开(公告)号：CN114230672B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202111395810.8
申请日：2021-11-23
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明属于食品技术领域，具体涉及一种牛乳铁蛋白肽融合蛋白、编码基因及其在海鲜保鲜和/或防腐中的应用。本发明提供一种从N端至C端包括依次连接的α‑Factor信号肽、单链DNA结合蛋白、牛乳铁蛋白肽和组蛋白标签的牛乳铁蛋白肽融合蛋白。利用本发明所述的融合蛋白具有稳定性高的优势，能够在长时间维持海产品的新鲜度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114411335A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210097829.2
申请日：2022-01-27
Applicant: 华侨大学
IPC: D04H1/728 , D04H1/4309 , D01D5/00 , D01F6/50 , D01F1/10
Abstract: 本发明涉及食品保鲜技术领域，提供了一种保鲜膜及其制备方法和应用。本发明提供了一种保鲜膜的制备方法，包括以下步骤：将聚乙烯醇缩丁醛、肉桂精油和无水乙醇混合，得到纺丝溶液；将所述纺丝溶液进行静电纺丝，得到所述保鲜膜。本发明提供的方法采用聚乙烯醇缩丁醛作为纺丝主体，与肉桂精油的相容性更好，降低了肉桂精油的挥发速度，使其在保鲜过程中长效缓释，提高了被保鲜物的感官接受性和保鲜时间。本发明采用静电纺丝的方式，操作简单，在保鲜过程中无需采用复杂的杀菌保鲜工序，成本相对低廉。同时，本发明采用无毒的原料以及有机溶剂制备保鲜膜，得到的保鲜膜安全性更高。
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公开(公告)号：CN105400772A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510915182.X
申请日：2015-12-10
Applicant: 华侨大学
IPC: C12N15/10
CPC classification number: C12N15/102
Abstract: 本发明提供一种基因定点多位点突变的方法，所述方法步骤如下：根据基因定点突变的碱基位置设计包含突变位点的引物，即通过引物设计在重叠区域引入突变位点；然后利用PCR扩增，制备包含突变位点的PCR片段；利用和非特异性DNA结合的蛋白HU取代重组酶从而将几个片段无缝拼接，以实现定点多位点的突变。
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公开(公告)号：CN105200037A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510602428.8
申请日：2015-09-21
Applicant: 华侨大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种利用非特异性结合蛋白来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法，其通过如下步骤实现：S1：设计需要合成的DNA序列，得到混合重叠寡核苷酸；其中，每个序列都有25bp的重叠寡核苷酸，以覆盖整个DNA序列(200到1500碱基)；S2：将含有脱氧核糖核甘酸，DNA聚合酶，寡核苷酸引物，以及作为模板的上述混合重叠寡核苷酸的反应液中加入HU蛋白原液；S3：按照常规PCR的解链，退火，延伸三个步骤进行反复的循环，将目的核酸片段合成并且扩增。采用上述方案后，本发明方法能够特异性地、高效地合成和扩增目标核酸序列。
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公开(公告)号：CN104593491A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201410848236.0
申请日：2014-12-31
Applicant: 华侨大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2522/101 , C12Q2531/113 , C12Q2549/00
Abstract: 本发明提供一种利用整合宿主因子来提高PCR扩增灵敏度的方法，所述方法如下：将含有脱氧核苷三磷酸、DNA聚合酶、寡核苷酸引物、以及作为模板的核酸片段的反应溶液中，加入整合宿主因子IHF，按照常规PCR的解链、退火、延伸三个步骤，进行反复的热循环，从而将目标核酸片段扩增，所述引物与整合宿主因子IHF的摩尔比例为0.005-1。本发明方法能够特异性地、高效地扩增目标核酸序列。
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公开(公告)号：CN105505972B
公开(公告)日：2019-02-26
申请号：CN201610040618.X
申请日：2016-01-21
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明提供一种利用聚乙烯亚胺提高T4DNA连接酶连接效率的方法，包括以下步骤：对目的DNA片段设计带有酶切位点的引物；通过PCR反应获得两端带有酶切位点的目的DNA片段；经酶切得到待连接的线性化载体和目的DNA片段；配置聚乙烯亚胺溶液备用；在连接体系中添加预设体积的聚乙烯亚胺溶液进行连接反应；在大肠杆菌中进行转化和克隆，得到重组DNA分子的克隆。本发明可以显著地提高T4DNA连接酶的连接效率，填补了将电正性高分子聚合物(聚乙烯亚胺)应用于提高T4DNA连接酶连接效率这一领域的空白。
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