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公开(公告)号:CN117126754A
公开(公告)日:2023-11-28
申请号:CN202210546159.8
申请日:2022-05-19
Applicant: 华北制药集团新药研究开发有限责任公司
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/12 , C12P21/02 , C07K14/78 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/18 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种重组I型胶原蛋白毕赤酵母工程菌及其构建方法与应用。合成I型人源化胶原蛋白α1链成熟肽的基因序列,插入载体的α‑factor分泌信号肽Kex2蛋白酶识别位点下游,构建重组质粒pPICZalphaA‑col(I)α1,导入毕赤酵母X‑33,筛选得到重组菌株。本发明还提供一种应用该重组菌株制备I型胶原蛋白的方法,其中提供了一种改良型发酵培养基和高密度发酵方法,表达水平达到6g/L以上,纯化制备的重组I型胶原蛋白纯度达到98%以上,与人I型胶原蛋白氨基酸序列相应部分100%相同。生产过程绿色环保,产品具有更高的生物相容性和生物安全性,产品可以应用于医美、医疗器械及医用生物材料等广泛领域。