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公开(公告)号：CN110846337B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN201911170226.5
申请日：2019-11-26
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用，该多功能融合酶XABT基因，可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶，并具有高效的酶活，该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性，对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物，消除饲料中主要抗营养因子，达到提高饲料消化率，减少污染排放的目的。
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公开(公告)号：CN110564774B
公开(公告)日：2021-10-15
申请号：CN201910782035.8
申请日：2019-08-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用修饰的ssODN提高细胞基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与经修饰后的ssODN共同作用于细胞来实现。具体地为，CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段，可以定点识别目的基因，并使目的基因发生双链断裂，而在断裂处ssODN与目的基因碱基互补配对，高效的完成基因组定点修饰，而经修饰后的ssODN可以显著提高定点修饰的效率。
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公开(公告)号：CN112852845A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110156059.X
申请日：2021-02-04
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/56 , C12N9/42 , C12N15/85 , A23K20/189 , A23K50/75 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种新型多功能酶基因HG32及应用，该酶来源于中华竹鼠肠道微生物，能够兼容真核生物细胞表达系统，表达高生物活性的纤维素酶，其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备、食品和药品行业等领域应用，以解决植物纤维素难降解、饲料营养利用率低等问题，减轻动物排泄物中氮和、有机物等污染问题。本发明通过对竹鼠肠道微生物宏转录组测序，序列拼接，与NCBI上已有的糖苷水解酶家族进行同源性对比，筛选高表达的、同源性高于50％的疑似纤维素酶的基因，预测其信号肽，并用猪腮腺分泌蛋白信号肽替换原有的信号肽，按猪密码子偏好优化后克隆到真核表达载体上，通过脂质体转染到猪肾上皮细胞中表达，收集细胞培养上清液进行酶活分析比较后获得。
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公开(公告)号：CN111394393A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010116317.7
申请日：2020-02-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了通过筛选出可以提高基因组定点整合效率的抑制剂，包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂或JAK抑制剂中的至少一种。组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以在基因组定点整合时，抑制组蛋白的去乙酰化，而促进组蛋白的乙酰化，进而有利于DNA与组蛋白八聚体的解离，核小体结构松弛，从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合，激活基因的转录及定点整合效率。JAK抑制剂通过抑制细胞JAK自发性磷酸化，影响其与STAT蛋白结合，使STAT转录因子磷酸化不能有效转移至细胞核内，影响非DNA连接因子的结合，有利于NHEJ/HDR因子的结合，进而有效增加基因整合至基因组的概率，提高基因组定点整合效率。
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公开(公告)号：CN110846337A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911170226.5
申请日：2019-11-26
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用，该多功能融合酶XABT基因，可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶，并具有高效的酶活，该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性，对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物，消除饲料中主要抗营养因子，达到提高饲料消化率，减少污染排放的目的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110564774A
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201910782035.8
申请日：2019-08-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用修饰的ssODN提高细胞基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与经修饰后的ssODN共同作用于细胞来实现。具体地为，CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段，可以定点识别目的基因，并使目的基因发生双链断裂，而在断裂处ssODN与目的基因碱基互补配对，高效的完成基因组定点修饰，而经修饰后的ssODN可以显著提高定点修饰的效率。
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公开(公告)号：CN104946581B
公开(公告)日：2017-10-13
申请号：CN201510210334.6
申请日：2015-04-28
Applicant: 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明公开了一种培养猪滋养层干细胞的专用培养基及方法，该专用培养基成分包括bFGF、activin A、Y27632、Knockout SR和β‑巯基乙醇。培养方法是将干细胞培养器皿预先用细胞外基质包被；然后将猪囊胚用蛋白酶消化去除透明带，转入干细胞培养器皿中，添加本发明的专用培养基；培养至形成总细胞数为1000~2000个的滋养层干细胞克隆团时，消化成单细胞，转入新的经细胞外基质包被的培养器皿进行细胞的传代培养。本发明的专用培养基成分确定，使用安全性高，避免异源细胞的污染。培养方法简单高效，对猪滋养层干细胞培养具有克隆形成率高、细胞凋亡率低、增殖传代能力强和安全稳定的优点。
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公开(公告)号：CN103509812B
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201310343067.0
申请日：2013-08-07
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种唾液腺组织特异性的转基因载体及其构建方法。所述唾液腺组织特异性的转基因载体是通过将小鼠腮腺蛋白启动子上游调控区序列和可视化筛选neo-EGFP融合双标记整合到piggyBac转座系统和Lox-Cre酶系统中构建得到，该转基因载体可使目的蛋白在特定组织表达，实现大片段的高效整合效率；且该载体还具有便于筛选的绿色荧光标记和真核细胞筛选的新霉素抗性基因，使转基因细胞筛选和转基因动物鉴定更简单、直接、准确；本发明的转基因载体是一种唾液腺特异表达高效整合通用载体，可用于转基因小鼠和猪等动物方面转基因应用。本发明首次克隆FVB小鼠上游调控区，克隆方法简单高效，有效克服了大片段载体构建难度。
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公开(公告)号：CN110846297A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911170441.5
申请日：2019-11-26
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种多功能融合酶和多功能融合酶真核表达载体及其构建方法，该多功能融合酶可以表达木聚糖酶、植酸酶、果胶酶，葡聚糖酶和纤维素酶，将其用于后期制备相应的转基因动物，该动物将自身分泌这些酶，起到消化饲料中木聚糖、植酸、果胶、葡聚糖酶和纤维素等抗营养因子，达到提高饲料利用率，减少污染排放的功效。同时，解决刚性肽介导两个以上融合蛋白共表达时相互干扰问题；解决2A连接肽多基因共表达效率低的问题，及多基因共表达中2A多肽残基对上游酶蛋白干扰的问题，达到多基因高效共表达的目的。
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公开(公告)号：CN110499336A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910782039.6
申请日：2019-08-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/90
Abstract: 本公开涉及基因工程技术领域，特别涉及一种利用小分子化合物提高基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与小分子化合物共同作用于细胞来实现。具体地为，CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段，可以定点识别目的基因，并使目的基因发生双链断裂，而在断裂处，小分子化合物发挥作用，进行同源重组修复，高效的完成基因组定点修饰，经小分子化合物处理的细胞基因组定点修饰效率显著提高。
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