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公开(公告)号：CN109512469A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811552777.3
申请日：2018-12-19
Applicant: 华南农业大学 , 温氏食品集团股份有限公司
IPC: A61B10/00
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种从猪活体提取子宫腔液外泌体的方法，具体包括以下步骤：S1：对猪进行预处理；S2：沿腹中线切开待手术部位的皮肤和皮下结缔组织；S3：分离皮下脂肪和腹膜，慢慢牵引出子宫；S4：插入并固定冲胚管；S5：使缓冲液向输卵管侧流动，使得子宫冲洗液从冲胚管开口流出即得到子宫腔液；另一侧的子宫采用同样的方法得到子宫腔液。本发明首次公开了一种实现活体收集猪子宫腔液的方法，使用活体收集子宫腔液节约了样品收集的成本，提高了外泌体的回收率，减少了背景杂质的干扰。此外还公开了从该子宫腔液中提取外泌体的方法，该方法步骤简单、成本低且提取的外泌体纯度高。
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公开(公告)号：CN111019885B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN201911112690.9
申请日：2019-11-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪子宫内膜来源的外泌体及其提取方法与应用。本发明先分离得到子宫内膜组织，然后剪碎成组织块；冲洗后在20～30℃，80～100g条件下离心3～10min，弃上清液；再将组织块置于Hanks’Balanced Salt Solution中孵育，收集猪子宫内膜培养液；最后采用超速离心法提取外泌体，得到猪子宫内膜来源的外泌体。与现有技术相比，本发明提供的方法更加简单便捷，节约了样品收集的成本，减少了人力的损耗，同时也节约了采样的时间，增加了采样的效率。提取的外泌体在电镜下外泌体形状更加明显，背景干净且无杂质，可以作为促进猪胚胎体外培养效率的添加剂。
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公开(公告)号：CN116376811A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310162741.9
申请日：2023-02-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/073 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61P15/06
Abstract: 本发明提供了ssc‑miR‑199a‑3p在促进猪胚胎着床中的应用，本发明的研究发现，促进ssc‑miR‑199a‑3p的表达，可以提高猪胚胎滋养层细胞增殖/迁移能力，进而促进猪胚胎着床；进一步研究发现，ssc‑miR‑199a‑3p通过抑制ACSL4基因的表达发挥促进猪胚胎着床的作用，通过抑制猪ACSL4基因的表达可以提高猪胚胎着床的成功率。本发明能够解决养猪业自发性胎儿丢失的问题，对于养猪业具有重要的价值和意义。
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公开(公告)号：CN111019885A
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201911112690.9
申请日：2019-11-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪子宫内膜来源的外泌体及其提取方法与应用。本发明先分离得到子宫内膜组织，然后剪碎成组织块；冲洗后在20～30℃，80～100g条件下离心3～10min，弃上清液；再将组织块置于Hanks’Balanced Salt Solution中孵育，收集猪子宫内膜培养液；最后采用超速离心法提取外泌体，得到猪子宫内膜来源的外泌体。与现有技术相比，本发明提供的方法更加简单便捷，节约了样品收集的成本，减少了人力的损耗，同时也节约了采样的时间，增加了采样的效率。提取的外泌体在电镜下外泌体形状更加明显，背景干净且无杂质，可以作为促进猪胚胎体外培养效率的添加剂。
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