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公开(公告)号:CN118127241A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410440647.X
申请日:2024-04-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种用于检测猪繁殖障碍疾病相关病原体的荧光定量PCR引物探针组、试剂盒及应用。所述的用于检测猪繁殖障碍疾病相关病原体的荧光定量PCR引物探针组,包含用于检测PRRSV、PCV2和PCV3的引物和探针组合,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的引物探针组和试剂盒可以检测到GenBank中收录的所有已知序列的PRRSV、PCV2和PCV3毒株,对PRRSV、PCV2和PCV3标准品质粒最低检出下限均为10copies/μL。本发明为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环二型病毒和圆环三型病毒提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN114805600B
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202210320567.1
申请日:2022-03-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/135 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的病毒样颗粒及其制备方法与应用。所述VLPs由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒单个表位或不同抗原表位组合后得到的重组蛋白组装而成,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示。利用上述VLPs制备亚单位疫苗,免疫BALB/c雌鼠后,可诱导机体产生特异性免疫反应,能有效预防PCV2d和FMDV的感染,对控制和净化我国猪O型口蹄疫和断奶仔猪多系统衰竭综合征具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114277191A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202111670783.0
申请日:2021-12-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物组合物及应用。所述引物组合物含有核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物;所述应用为核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物在制备检测非洲猪瘟和/或猪瘟的试剂盒中的应用。本发明提供了检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物,并建立了非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒双重RAA琼脂糖凝胶电泳法的检测方法。通过使用本发明提供的引物对待测样本的基因组DNA和/或cDNA进行重组酶介导的等温扩增,再进行琼脂糖凝胶电泳检测,可快速、准确地检测出是否存在非洲猪瘟病毒和/或猪瘟病毒,具有操作简便、检测效率高等优点,对防控非洲猪瘟和猪瘟以及促进养猪业的发展具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN107686833B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201710254163.6
申请日:2017-04-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种猪细小病毒毒株及其应用,属于疫苗领域。该病毒是从广东地区采集并分离得到的,经鉴定,命名为猪细小病毒PPVGD株,于2016年03月18日保藏于中国.武汉.武汉大学的中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:V201618。其全基因序列如SEQ ID NO:1所示。将PPVGD株制备的灭活疫苗接种豚鼠后,28d后,测HI抗体效价的几何平均为1:194;接种四月龄的猪细小病毒抗体阴性的猪,在免疫28d后,测HI,抗体效价的几何平均约为1:147。可知,本发明表明了以广东分离株PPVGD株制备的灭活疫苗接种豚鼠和后备母猪后具有良好的免疫原性,且略高于商品化的灭活疫苗。
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公开(公告)号:CN109880838A
公开(公告)日:2019-06-14
申请号:CN201910185963.6
申请日:2019-03-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/866 , C12N15/66 , C12N7/01 , C07K19/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种分泌表达猪O型口蹄疫病毒多表位基因的重组病毒及其制备方法和应用。本发明通过将猪O型口蹄疫病毒T、B细胞表位串联的方法,根据密码子的偏爱性,人工设计合成了融合蜂毒信号肽的猪O型口蹄疫多表位重组抗原的基因序列,并构建了含有上述重组基因的重组杆状病毒,提高了基因在杆状病毒中分泌表达水平和免疫原性。利用本发明的重组杆状病毒Ac-RBT所表达RBT蛋白制备亚单位疫苗,免疫猪后,可诱导机体产生特异性免疫反应,诱导猪体产生较高水平特异性抗体,能有效预防口蹄疫病毒的感染,对控制和净化我国猪O型口蹄疫具有重要意义。
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公开(公告)号:CN107164558A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710260637.8
申请日:2017-04-20
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2521/101 , C12Q2565/625
Abstract: 本发明公开一种检测流行性乙型脑炎的重组酶常温扩增核酸(RT‑RPA)试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如权利要求1所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配置RT‑RPA反应体系,进行常温恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内;阴性结果仅在质控区一条红色条带,在检测区内无红色条带出现。本发明系首次采用RPA‑核酸试纸条技术建立快速检测猪JEV的方法,具有操作简单,特异性好,且反应结果易于观察,安全无污染等特点,非常适用于临床现场检测。
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公开(公告)号:CN103695561B
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201310628630.9
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:配制RT-LAMP反应体系,进行恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103667334A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201310542901.9
申请日:2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板,PCR得到znuA基因的上、下游同源臂,并将其连接,得到片段ΔznuA;将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上,得到重组质粒pRE-ΔznuA;将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中,分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选,得到同源重组双交换子,为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株,生长特性一致,遗传稳定使其不易返祖,毒力小且免疫效果保持良好,并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此,该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。
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公开(公告)号:CN103276103A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310153789.X
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪流行性腹泻病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN102399909B
公开(公告)日:2013-05-01
申请号:CN201110416855.9
申请日:2011-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。
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