公开(公告)号：CN106916217B

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN201710169790.X

申请日：2017-03-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁子国 ,  吕琳 ,  王亚培 ,  黄万意 ,  张秀香 ,  冯伟利 ,  吕淑媚 ,  郑玉香 ,  周雪 ,  陈雅俊

IPC: C07K14/47 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/6893 ,  C12Q1/04 ,  G01N30/89 ,  G01N21/33

Abstract: 本发明提供了一种应用iTRAQ技术研究弓形虫慢性感染小鼠脑组织差异表达蛋白质组的方法，包含以下步骤：(1)小鼠脑蛋白的提取；(2)对步骤(1)所得的蛋白质样品进行FASP酶解、肽段标记；(3)对步骤(2)标记的蛋白质样品进行HPLC分离肽段混合物及LC‑MS质谱分析；(4)对上步所得的质谱鉴定结果进行生物信息学分析、定量分析，获取弓形虫慢性感染小鼠脑组织过程中的差异表达蛋白质。本发明提供的iTRAQ结合LCMS/MS技术能快速有效地进行蛋白质组学研究，为研究弓形虫慢性感染致宿主CNS损伤机制以及发现新的生物标志物提供参考。

公开(公告)号：CN106810602A

公开(公告)日：2017-06-09

申请号：CN201710169788.2

申请日：2017-03-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁子国 ,  吕琳 ,  王亚培 ,  黄万意 ,  张秀香 ,  冯伟利 ,  吕淑媚 ,  郑玉香 ,  周雪 ,  陈雅俊

IPC: C07K14/47 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  G01N30/89 ,  G01N21/33

CPC classification number: C07K14/47 ,  C12Q1/6893 ,  G01N21/33 ,  G01N30/89

Abstract: 本发明提供了一种应用iTRAQ技术研究弓形虫慢性感染小鼠脑组织差异表达蛋白质组的方法，本发明还提供了一种与大脑发育调节蛋白相互作用的蛋白质或多肽、及其应用，本发明通过CoIP和Pulldown实验发现与大脑发育调节蛋白相互作用6个弓形虫蛋白，并进一步针对TgRPS14、TgH4基因进行基因敲除实验和神经行为学验证。本发明提供了的弓形虫慢性感染小鼠脑组织差异表达蛋白质组的方法能快速有效地进行蛋白质组学研究，有利于快速定位到具有研究价值或商业应用价值的检测靶标、防治药物靶点。

公开(公告)号：CN106916217A

公开(公告)日：2017-07-04

申请号：CN201710169790.X

申请日：2017-03-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁子国 ,  吕琳 ,  王亚培 ,  黄万意 ,  张秀香 ,  冯伟利 ,  吕淑媚 ,  郑玉香 ,  周雪 ,  陈雅俊

IPC: C07K14/47 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  G01N30/89 ,  G01N21/33

CPC classification number: C07K14/47 ,  C12Q1/6893 ,  G01N21/33 ,  G01N30/89

Abstract: 本发明提供了一种应用iTRAQ技术研究弓形虫慢性感染小鼠脑组织差异表达蛋白质组的方法，包含以下步骤：(1)小鼠脑蛋白的提取；(2)对步骤(1)所得的蛋白质样品进行FASP酶解、肽段标记；(3)对步骤(2)标记的蛋白质样品进行HPLC分离肽段混合物及LC‑MS质谱分析；(4)对上步所得的质谱鉴定结果进行生物信息学分析、定量分析，获取弓形虫慢性感染小鼠脑组织过程中的差异表达蛋白质。本发明提供的iTRAQ结合LCMS/MS技术能快速有效地进行蛋白质组学研究，为研究弓形虫慢性感染致宿主CNS损伤机制以及发现新的生物标志物提供参考。