公开(公告)号：CN118006498A

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202410220480.6

申请日：2024-02-28

Applicant: 郑州大学 ,  南京工业大学

Inventor： 柳东 ,  刘书利 ,  应汉杰 ,  张迪 ,  王振宇 ,  熊文韬

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种细胞分离纯化技术领域，具体涉及从小细胞形成体系中分离出小细胞的方法。解决了现有技术中小细胞分离细胞成本高，分离技术十分复杂等问题，所述低成本小细胞纯化方法，包括以下步骤：将菌液通过差速离心、PBS清洗、再经混合纤维酯膜过滤，即得纯化的小细胞。根据不同需求，可省略PBS清洗和/或过膜步骤，进行简化版小细胞分离纯化方法，即将菌液超声2min，然后在离心机中800×g、5min离心收集上清液，然后根据实验需求选择是否过混合纤维酯膜，收集纯化后的小细胞。本发明操作简单方便，成本低，对设备要求低，不需要加抗生素来抑制菌体的生长，并且采用营养更丰富的降磷TB培养基增加了细胞的生物量。

公开(公告)号：CN119193643A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411339403.9

申请日：2024-09-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 柳东 ,  李梦婷 ,  张迪 ,  王振宇 ,  熊文韬 ,  朱晨杰 ,  应汉杰

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12N9/04 ,  C12N9/78 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种增大细菌尺寸的方法、重组大肠杆菌及其应用。本发明通过调控微生物细胞形态相关蛋白，对微生物细胞形态及分裂方式进行改造，从而优化微生物细胞的特性，以提高其在生物制造等领域的应用价值。具体的，以强化了minE基因或弱化了mreB、minC、minD、dacA、ftsZ基因中的任意一个或几个蛋白基因表达的大肠杆菌为底盘菌株，通过异源表达DivIVA增大了细胞尺寸。本发明获得了可分裂、培养、遗传的大尺寸细胞，为生产一些胞内/外产物提供了更大的生产空间，并可应用于多种生物大分子生产，为增强目标产物生产效率提供了一种新的解决方案。同时，增大的细胞形态有利于细胞截留、吸附、沉淀、产物分离等过程，提高了整体生产效率。