公开(公告)号：CN110029081A

公开(公告)日：2019-07-19

申请号：CN201910301370.1

申请日：2019-04-15

Applicant: 厦门大学

Inventor： 何宁 ,  王玲伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/75 ,  C12P19/04 ,  C12R1/10

Abstract: 过表达碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因的工程菌及其构建方法。过表达碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因ccpN利用PCR扩增克隆多糖絮凝剂合成途径获得，核苷酸序列如SEQ ID No1。利用PCR扩增克隆碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因ccpN，将基因ccpN片段连接到表达载体上，导入地衣芽孢杆菌中，通过四环素抗性筛选获得目的基因的工程菌。构建方法：设计PCR引物；将目的基因插入到PHY300PLK-PamyL-TTamyL组成型启动子PamyL下游多克隆位点，得过表达质粒，导入到E.coli DH5α中扩增；将过表达质粒电转化地衣芽孢杆菌，筛选转化子，验证得地衣芽孢杆菌重组菌。

公开(公告)号：CN110029081B

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN201910301370.1

申请日：2019-04-15

Applicant: 厦门大学

Inventor： 何宁 ,  王玲伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/75 ,  C12P19/04 ,  C12R1/10

Abstract: 过表达碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因的工程菌及其构建方法。过表达碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因ccpN利用PCR扩增克隆多糖絮凝剂合成途径获得，核苷酸序列如SEQ ID No1。利用PCR扩增克隆碳分解代谢物阻遏效应转录抑制因子基因ccpN，将基因ccpN片段连接到表达载体上，导入地衣芽孢杆菌中，通过四环素抗性筛选获得目的基因的工程菌。构建方法：设计PCR引物；将目的基因插入到PHY300PLK‑PamyL‑TTamyL组成型启动子PamyL下游多克隆位点，得过表达质粒，导入到E.coli DH5α中扩增；将过表达质粒电转化地衣芽孢杆菌，筛选转化子，验证得地衣芽孢杆菌重组菌。

公开(公告)号：CN110129377A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910341891.X

申请日：2019-04-25

Applicant: 厦门大学

Inventor： 何宁 ,  王玲伟

IPC: C12P1/04 ,  C12N15/31 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12R1/10

Abstract: 本发明公开了一种利用过表达氮代谢调控蛋白基因的工程菌制备生物絮凝剂的方法，本发明将氮代谢调控蛋白NrgB基因(nrgB)克隆构建重组表达载体，通过电转化的方法将重组质粒导入到地衣芽孢杆菌，构建了工程菌，该工程菌在发酵过程中，絮凝活性提高了98.04％，该工程菌可用于多糖絮凝剂的工业化生产，能够提高絮凝效率并降低成本。

公开(公告)号：CN109929854A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910300784.2

申请日：2019-04-15

Applicant: 厦门大学

Inventor： 何宁 ,  王玲伟

IPC: C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12N15/75 ,  C12P19/04 ,  C12R1/10

Abstract: 一株过表达分解代谢物控制蛋白A编码基因的工程菌及其构建方法。过表达分解代谢物控制蛋白A编码基因ccpA利用PCR扩增克隆多糖絮凝剂合成途径获得，核苷酸序列如SEQ ID No1。将ccpA基因片段连接到表达载体上，导入地衣芽孢杆菌中，通过四环素抗性筛选获得目的基因的一株过表达分解代谢物控制蛋白A编码基因ccpA的地衣芽孢杆菌基因工程菌。构建方法：设计PCR引物；将扩增得到的目的基因插入到PHY300PLK-PamyL-TTamyL组成型启动子PamyL下游多克隆位点得过表达质粒，导入E.coli DH5α中扩增；将过表达质粒电转化地衣芽孢杆菌，筛选转化子，经验证得地衣芽孢杆菌重组菌。