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公开(公告)号：CN115725547A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202111019210.1
申请日：2021-09-01
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明公开了一种低温ɑ‑淀粉酶的突变体及构建方法和应用，解决现有技术中低温α‑淀粉酶热稳定性较差，不利于酶的长期储存、开发和工业应用的技术问题。本发明对一种低温ɑ‑淀粉酶进行定点突变，获得两个单突变体G181P、G451P和一个双突变体G181P/G451P。突变体的热稳定性都明显提高，在40℃保温60min，突变体的残余活性分别提高为原来的1.7、2.0和2.7倍；突变体的催化效率也都得以提高。本发明提供了突变后的基因序列、包含上述基因的重组载体以及突变方法。本发明利用基因工程改造后的突变低温ɑ‑淀粉酶在食品加工、纺织品退浆、生物燃料制造等方面展现出较大的应用潜能，可广泛应用于基因工程领域。
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公开(公告)号：CN106566819B
公开(公告)日：2020-04-14
申请号：CN201610410715.3
申请日：2016-06-03
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明提供了一种低温嗜盐α—淀粉酶的基因克隆、表达及分离纯化方法。通过提取该金属硫蛋白基因，设计引物TAC‑F7、TAC‑R5，经PCR扩增后与表达载体进行连接，构建重组质粒；将重组质粒转化入表达菌株，构建重组基因工程菌；建立了该重组蛋白的表达与纯化方法。其低温嗜盐α—淀粉酶核苷酸序列及编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，其信号肽的基因和氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。该淀粉酶具有如下性质：最适温度20℃，最适pH 8.0，最适盐浓度为1M NaCl；作为一种新型的低温嗜盐酶制剂，可有效的用于食品、发酵、医药、皮革、酿造、饲料、纺织和洗涤剂等工业中。
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公开(公告)号：CN106566819A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610410715.3
申请日：2016-06-03
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明提供了一种低温嗜盐α‑淀粉酶的基因克隆、表达及应用。通过提取该金属硫蛋白基因，设计引物TAC‑F7、TAC‑R5，经PCR扩增后与表达载体进行连接，构建重组质粒；将重组质粒转化入表达菌株，构建重组基因工程菌；建立了该重组蛋白的表达与纯化方法。该低温嗜盐α‑淀粉酶核苷酸序列及编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，其信号肽的基因和氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。该淀粉酶具有如下性质：最适温度20℃，最适pH 8.0，最适盐浓度为1M NaCl；作为一种新型的低温嗜盐酶制剂，可有效的用于食品、发酵、医药、皮革、酿造、饲料、纺织和洗涤剂等工业中。
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公开(公告)号：CN104549165B
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201510013799.2
申请日：2015-01-12
Applicant: 河南金丹乳酸科技股份有限公司 , 哈尔滨工业大学(威海)
Inventor： 任秀莲 , 文倩 , 魏崎峰 , 穆鹏宇 , 陈泳兴 , 刘腾阳 , 郭敬敬 , 刘清瑞 , 王晓飞 , 朱守林 , 王敏 , 韩英杰 , 李冰 , 马凯歌 , 郭廷 , 王然明 , 王俊丽 , 王新 , 顾永华 , 申介建 , 王浩 , 张树银 , 邢涛 , 毛鸿涛 , 普峰 , 徐向阳 , 代陶 , 张美霞 , 张国宣 , 刘雁 , 楚慧玲 , 姜建友 , 李义生
Abstract: 本发明公开从乳酸酸解液中提取L?乳酸的耦合吸附剂，由耦合剂、负载溶剂和耦合促进剂组成。耦合剂、负载溶剂和耦合促进剂三者的质量之比为：耦合剂：负载溶剂：耦合促进剂＝(20?35)：100：(5?15)。本发明偶和吸附剂能够将L?乳酸从乳酸酸解液中提取出来，改变现有从L?乳酸中将各种杂质逐一分离的工艺路线，利用耦合吸附剂直接将L?乳酸耦合吸附出来，而将各种杂质留在残液中，由于本发明的耦合吸附剂具有对L?乳酸的专一吸附性，达到一步提纯L?乳酸的目的，去除了现有工艺中的脱色工艺和绝大部分的离交工艺。
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公开(公告)号：CN105017443A
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201510390627.7
申请日：2015-07-06
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
IPC: C08B37/04
Abstract: 本发明公开一种海带酶解液或水解液中褐藻多糖硫酸酯的提取分离工艺，该工艺包括如下步骤：1)将海带酶解液或水解液进行预处理得预处理液；2)将预处理液进行萃取操作得萃取液；3)将萃取液进行反萃取操作得褐藻多糖硫酸酯水溶液。本发明采用的溶剂萃取法易于工业化和连续化操作，萃取剂可以回收利用，降低生产成本；提取过程具有较高的选择性，所得粗多糖产品纯度较高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105712298A
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201610293377.X
申请日：2016-05-05
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
IPC: C01B7/09
CPC classification number: C01B7/096
Abstract: 本发明公开一种从含溴溶液中提取溴的方法，该方法包括如下步骤：1)将含溴溶液酸化，然后氧化；2)对步骤1)氧化后的混合液进行萃取操作；3)对步骤2)得到的含溴萃取有机相进行反萃取操作；4)将步骤3)得到的反萃液酸化使溴析出，得到单质溴。本发明采用氧化?萃取法，具有萃取率高、设备简单、耗能低等优点，溴的萃取率达到98％以上，并且萃取剂可以反复使用。
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公开(公告)号：CN104984562A
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201510435011.7
申请日：2015-07-23
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
Abstract: 本发明公开一种DBA废液中二元有机酸分离纯化的方法，包括如下萃取步骤(Ⅰ)：(ⅰ)利用有机相萃取DBA废液中的二元有机酸，所述有机相为醇类、酮类、醚类、酯类或胺类中的一种或多种，所述醇类为正戊醇、仲辛醇、正己醇、环己醇和癸醇中的一种或多种；所述酮类为甲乙酮、3-戊酮、甲基异丁基甲酮(MIBK)、3-辛酮和环己酮中的一种或多种；所述醚类为异丙醚；所述酯类为P204、P507和TBP中的一种或多种；所述胺类为TOA、N235和N,N二正丁基戊酰胺中的一种或多种；(ⅱ)将负载有机相和萃余液分离。本发明的工艺反应条件温和，选择性好，劳动强度低，环境污染小，适于工业化生产。
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公开(公告)号：CN104549165A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510013799.2
申请日：2015-01-12
Applicant: 河南金丹乳酸科技股份有限公司 , 哈尔滨工业大学(威海)
Inventor： 任秀莲 , 文倩 , 魏崎峰 , 穆鹏宇 , 陈泳兴 , 刘腾阳 , 郭敬敬 , 刘清瑞 , 王晓飞 , 朱守林 , 王敏 , 韩英杰 , 李冰 , 马凯歌 , 郭廷 , 王然明 , 王俊丽 , 王新 , 顾永华 , 申介建 , 王浩 , 张树银 , 邢涛 , 毛鸿涛 , 普峰 , 徐向阳 , 代陶 , 张美霞 , 张国宣 , 刘雁 , 楚慧玲 , 姜建友 , 李义生
CPC classification number: B01J20/22 , B01J20/26 , B01J20/261 , B01J2220/445 , C07C51/47 , C07C59/08
Abstract: 本发明公开从乳酸酸解液中提取L-乳酸的耦合吸附剂，由耦合剂、负载溶剂和耦合促进剂组成。耦合剂、负载溶剂和耦合促进剂三者的质量之比为：耦合剂：负载溶剂：耦合促进剂＝(20-35)：100：(5-15)。本发明偶和吸附剂能够将L-乳酸从乳酸酸解液中提取出来，改变现有从L-乳酸中将各种杂质逐一分离的工艺路线，利用耦合吸附剂直接将L-乳酸耦合吸附出来，而将各种杂质留在残液中，由于本发明的耦合吸附剂具有对L-乳酸的专一吸附性，达到一步提纯L-乳酸的目的，去除了现有工艺中的脱色工艺和绝大部分的离交工艺。
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公开(公告)号：CN105017443B
公开(公告)日：2018-09-11
申请号：CN201510390627.7
申请日：2015-07-06
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
IPC: C08B37/04
Abstract: 本发明公开一种海带酶解液或水解液中褐藻多糖硫酸酯的提取分离工艺，该工艺包括如下步骤：1)将海带酶解液或水解液进行预处理得预处理液；2)将预处理液进行萃取操作得萃取液；3)将萃取液进行反萃取操作得褐藻多糖硫酸酯水溶液。本发明采用的溶剂萃取法易于工业化和连续化操作，萃取剂可以回收利用，降低生产成本；提取过程具有较高的选择性，所得粗多糖产品纯度较高。
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公开(公告)号：CN106519023A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610410714.9
申请日：2016-06-03
Applicant: 哈尔滨工业大学(威海)
CPC classification number: C07K14/825 , C12N15/66 , C12N15/70 , C12P21/02
Abstract: 本发明提供了一种嗜冷酵母金属硫蛋白的基因克隆、表达方法及应用。通过提取该金属硫蛋白基因，设计引物F1、R1，经PCR扩增后与表达载体进行连接，构建重组表达载体；将重组表达载体转化入表达菌株，构建重组表达转化体；建立了该重组蛋白的表达与纯化方法。所述金属硫蛋白基因，其核苷酸序列及编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。本发明克隆获得的新型金属硫蛋白，含有16个半胱氨酸，丰富的巯基能够螯合多种金属重金属离子，在医药、食品保健及化妆品添加剂、基因工程试剂、化工、环保、动物、农业等领域前景广阔。
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