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公开(公告)号：CN119220742A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411591641.9
申请日：2024-11-08
Applicant: 四川农业大学 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13d体系检测PRRSV‑1的方法，属于分子生物学诊断技术领域。该方法能够有效检测临床阳性PRRSV‑1样本，并且可以通过结合RNA荧光报告分子，实现PRRSV‑1的现场可视化检测，检测过程中仅需使用蓝光透射仪照射，通过观察反应体系中是否产生荧光信号，即可判断检测结果。此外，该方法也支持使用qPCR仪器进行定量检测，在1小时内便可以快速判定结果。本发明不仅降低了诊断成本和时间，并且通过结果的可视化检测，提高了生猪养殖业中PRRSV‑1的检测能力，减少了养殖场的生物安全风险。
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公开(公告)号：CN118460682A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410936935.4
申请日：2024-07-12
Applicant: 畜科生物工程有限公司 , 四川农业大学 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/70 , C12N15/70 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/19 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种基于RAA和CRISPR‑Cas13d的PEDV检测方法、试剂盒及其应用，属于分子生物学诊断技术领域；本发明使用RAA引物和标准阳性质粒PMD‑19T‑PEDV M作为模板进行RAA扩增，扩增产物经过纯化后用于T7体外转录，将DNA模板转录成靶标ssRNA；将转录的ssRNA与Cas13d蛋白、crRNA和荧光RNA报告探针进行反应进行荧光信号检测。本发明将以RT‑RAA技术和CRISPR‑Cas13d技术结合，实现对PEDV临床样本的高灵敏度、低复杂性的可视化检测，具有操作简单、检测灵敏、结果可视化的优点，从而为提高生猪养殖行业检测PEDV，降低生物安全风险提供技术手段。通过体外合成用于扩增的标准阳性质粒pMD‑19T‑PEDV和RAA的引物，原核表达CRISPR/Cas13d蛋白、体外转录CrRNA，其应用于猪流行性腹泻病毒的检测。
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公开(公告)号：CN119639746A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411891326.8
申请日：2024-12-20
Applicant: 四川农业大学 , 成都市畜禽遗传资源保护中心 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒的快速可视化检测方法，属于分子生物学诊断技术领域。本发明将核酸免提取技术、等温扩增技术与CRISPR/Cas系统相结合，开发出一种适用于ASFV的快速、灵敏、现场即时检测方法。该方法首先利用等温扩增(RAA)技术对目标序列进行扩增，再结合CRISPR‑Cas13d系统进行特异性识别和信号放大，该方法兼具高灵敏度和高特异性。此外，本发明引入了核酸快速提取方法和多元化结果展示技术，以简化检测流程，提高检测效率，克服了当前商品化核酸提取试剂盒步骤复杂的问题，进一步推动其在现场即时检测中的应用潜力。
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公开(公告)号：CN118581277A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410785519.9
申请日：2024-06-18
Applicant: 四川农业大学 , 成都市畜禽遗传资源保护中心 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13d技术检测猪圆环病毒2型的方法，属于分子生物学诊断技术领域。该方法能够成功检测出临床阳性PCV2样本，并且通过结合使用RNA荧光报告分子，可以实现对PCV2的现场可视化检测，检测过程仅需使用蓝光透射仪进行照射，通过观察反应体系中扩增产物是否呈现荧光，即可判定检测结果。此外，该试剂盒也支持使用qPCR仪器进行定量检测，从而在1小时内快速判定结果。本发明不仅减少了诊断成本和时间，并且结果可视化，对于提高生猪养殖业中PCV2水平的检测能力、降低养殖场的生物安全风险将具有重要意义。
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公开(公告)号：CN119824147A
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202510261769.7
申请日：2025-03-06
Applicant: 四川农业大学 , 成都市畜禽遗传资源保护中心 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13d的塞内卡谷病毒的可视化检测方法，属于分子生物学诊断技术领域。该方法首先利用等温扩增技术RAA对目标病毒序列进行扩增，其使用的扩增引物序列如SEQ ID NO.3、6所示，再利用CRISPR‑Cas13d系统进行特异性识别和信号放大，其使用的crRNA序列如SEQ ID NO.13所示，最后利用多种可视化方法对检测结果进行可视化观察。本发明提供上述检测方法能够对SVA病毒进行精准、快速的现场及时检测，显著提升了SVA型病毒的检测能力，减少了生物安全风险。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118497422B
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202410715620.7
申请日：2024-06-04
Applicant: 四川农业大学 , 成都市畜禽遗传资源保护中心 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13d体系检测猪乙脑病毒的方法，属于分子生物学诊断技术领域。本发明的方法可以成功检测出临床阳性JEV样本，结合RNA荧光报告分子可对JEV进行现场可视化检测，只使用蓝光透射仪进行照射，观察反应体系扩增产物是否呈现荧光即可判定检测结果，或者使用qPCR仪对其进行定量检测，1h以内即可判定结果。本发明的引物和crRNA特异性强、敏感性好，且操作简单、检测快速、结果可视化，使得本发明建立的基于RAA和CRISPR‑Cas13d技术的检测JEV的方法可以用于JEV的现场可视化检测，从而为提高生猪养殖行业检测JEV水平，降低养殖场生物安全风险提供技术手段。
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公开(公告)号：CN118497422A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410715620.7
申请日：2024-06-04
Applicant: 四川农业大学 , 成都市畜禽遗传资源保护中心 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13d体系检测猪乙脑病毒的方法，属于分子生物学诊断技术领域。本发明的方法可以成功检测出临床阳性JEV样本，结合RNA荧光报告分子可对JEV进行现场可视化检测，只使用蓝光透射仪进行照射，观察反应体系扩增产物是否呈现荧光即可判定检测结果，或者使用qPCR仪对其进行定量检测，1h以内即可判定结果。本发明的引物和crRNA特异性强、敏感性好，且操作简单、检测快速、结果可视化，使得本发明建立的基于RAA和CRISPR‑Cas13d技术的检测JEV的方法可以用于JEV的现场可视化检测，从而为提高生猪养殖行业检测JEV水平，降低养殖场生物安全风险提供技术手段。
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公开(公告)号：CN117431325A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202311420216.9
申请日：2023-10-30
Applicant: 重庆市畜牧科学院 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定荣昌猪品种的SNP位点组合及其应用，通过SNP位点对荣昌猪品种进行研究，采用生物信息学技术综合分析，并将研究结果进行初步验证，构建荣昌猪的品种特异性SNP位点集合，共包括位于基因组版本EnsemblSscrofa 11.1上54个SNP位点，可用于荣昌猪品种的真伪鉴定和遗传关系分析，为荣昌猪品种的知识产权保护提供了有效的科学依据。在荣昌猪品种鉴定评价时，只需将荣昌猪品种与已有特异性SNP位点比较分析，即可确定其是否为荣昌猪品种，大大降低了荣昌猪种质资源鉴定评价的效率，提高了荣昌猪品种鉴定评价的效率，具有显著的应用价值。
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公开(公告)号：CN102899274A
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201210430869.0
申请日：2012-11-01
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一株鸡源浸麻芽孢杆菌及其制备的菌剂和应用，鸡源浸麻芽孢杆菌保藏编号：CGMCC NO.6573。育雏阶段按0.15wt%浸麻芽孢杆菌微生物菌剂添加入饲料中；育成阶段到上市日龄按0.1wt%浸麻芽孢杆菌微生物菌剂添加入饲料中。本发明通过从健康成年160日龄放养公鸡的盲肠内容物分离出一株浸麻芽孢杆菌。在经历人工胃肠道环境耐受选择后，优化该菌株的固体发酵条件并生产出含足够活菌数的浸麻芽孢杆菌微生物菌剂。本发明将微生物活菌制剂直接添加入饲料，笼养鸡肉中具有特征“鸡香味”挥发性风味组分和含量得到了显著地提高。
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公开(公告)号：CN102899274B
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201210430869.0
申请日：2012-11-01
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一株鸡源浸麻芽孢杆菌及其制备的菌剂和应用，鸡源浸麻芽孢杆菌保藏编号：CGMCC NO.6573。育雏阶段按0.15wt%浸麻芽孢杆菌微生物菌剂添加入饲料中；育成阶段到上市日龄按0.1wt%浸麻芽孢杆菌微生物菌剂添加入饲料中。本发明通过从健康成年160日龄放养公鸡的盲肠内容物分离出一株浸麻芽孢杆菌。在经历人工胃肠道环境耐受选择后，优化该菌株的固体发酵条件并生产出含足够活菌数的浸麻芽孢杆菌微生物菌剂。本发明将微生物活菌制剂直接添加入饲料，笼养鸡肉中具有特征“鸡香味”挥发性风味组分和含量得到了显著地提高。
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