大白菜几丁质酶CHB4基因及其克隆方法

    公开(公告)号:CN1974773A

    公开(公告)日:2007-06-06

    申请号:CN200610096152.1

    申请日:2006-09-22

    Abstract: 大白菜几丁质酶CHB4基因及其克隆方法,其特征是利用已知的十字花科植物几丁质酶基因序列,通过比较设计引物,从大白菜基因组DNA中克隆特异性DNA片段,以及5′端序列片段;利用水杨酸诱导并以酶活力最高的处理植株的叶片RNA为模板,通过RACE反应得到3′端序列片段,在大白菜几丁质酶基因片段已经克隆的基础上,重新设计引物通过PCR反应从基因组DNA中扩增出该几丁质酶CHB4基因的全长1517bp。本发明为更进一步利用生物工程技术将外源几丁质酶基因转入各种植物中,从而提高植物抗真菌能力,培育抗病品种提供基础。

    玉米兼抗矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN101974549A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010270483.9

    申请日:2010-09-02

    Abstract: 本发明公开了一种玉米兼抗矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体及其构建方法。RT-PCR分别扩增玉米矮花叶病毒及粗缩病毒外壳蛋白基因特异性片段,构建反向重复表达载体,利用中间载体分别将玉米矮花叶病毒外壳蛋白及粗缩病毒外壳蛋白两个反向重复片段串联在一起;将含双T的真核表达载体酶切,连入Ubiquitin启动子及Nos终止子,再将串联重复片段连入载体中,构建成兼抗玉米矮花叶病毒及粗缩病毒的无选择标记siRNA复合表达载体。本发明能够在转化后代中通过自交分离获得剔除选择标记的双抗性植株。本发明对开展抗病毒RNA干扰调控技术研究,创建高抗病毒玉米新种质具有重要的理论和实践意义。

    转基因改良禾谷类作物籽粒淀粉品质的方法

    公开(公告)号:CN1623370A

    公开(公告)日:2005-06-08

    申请号:CN200410065610.6

    申请日:2004-11-08

    Abstract: 转基因改良禾谷类作物籽粒淀粉品质的方法,其特征是分别构建淀粉分支酶基因和参与植物糖酵解及TCA循环的一个或多个代谢酶的基因RNA干涉表达载体,通过农杆菌介导或者基因枪转化把目的干涉片段整合到植物基因组中,特异性地抑制植物淀粉分支酶和参与植物糖酵解及TCA循环的一个或多个代谢酶的基因活性,从而提高作物籽粒淀粉中直链淀粉的比例和籽粒总淀粉的含量。采用本方法可以方便、有效地改良禾谷类作物籽粒淀粉品质。

    玉米体外应用dsRNA抗矮花叶病毒干扰调控技术

    公开(公告)号:CN101974526A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010270473.5

    申请日:2010-09-02

    Abstract: 本发明是一种生物技术领域的利用RNA干涉技术,玉米体外应用dsRNA抗MDMV干扰调控技术。利用RT-PCR扩增玉米矮花叶病毒CP基因两个特异性片段,构建反向重复表达载体LMCP1及LMCP2,利用IPTG诱导表达,在大肠杆菌HT115(DE3)中生产抗MDMV的dsRNA,将提取的dsRNA稀释,稀释浓度大于1/15后喷洒三叶期的玉米叶片。本发明对开展抗病毒RNA干扰调控技术研究,建立玉米体外应用dsRNA诱导抗病毒非转基因RNA干扰调控技术体系和筛选出高效dsRNA干扰制剂具有重要理论和指导意义,可为玉米病毒病防治提供一种简单、有效和廉价的新方法,也可为其它植物病毒病防治提供借鉴。

    简便高效的农杆菌介导玉米转基因方法

    公开(公告)号:CN1286978C

    公开(公告)日:2006-11-29

    申请号:CN200410065611.0

    申请日:2004-11-08

    Abstract: 农杆菌介导玉米转基因方法,其特征是利用含有外源基因的农杆菌菌液感染玉米雌幼穗花丝进行玉米原位转化,所述玉米原位转化是先用剪刀把花丝贴近苞叶剪平,用利器穿透苞叶,刺伤幼穗,并用含有目的基因的农杆菌菌液涂抹或滴注以感染损伤部位,然后进行授粉,感染,反复处理3-4次,通过对当代种子的抗性筛选和分子检测,获得转基因植株。本发明方法避免了组织培养和植株再生的繁杂过程,简便快捷,转化的后代可直接成株。

    简便高效的农杆菌介导玉米转基因方法

    公开(公告)号:CN1602672A

    公开(公告)日:2005-04-06

    申请号:CN200410065611.0

    申请日:2004-11-08

    Abstract: 简便高效的农杆菌介导玉米转基因方法,其特征是利用含有外源基因的农杆菌菌液感染玉米雌幼穗花丝进行玉米原位转化,所述玉米原位转化是先损伤花丝和雌幼穗,并用含有目的基因的农杆菌菌液涂抹或滴注以感染损伤部位,然后进行授粉,感染,反复处理3-4次,通过对当代种子的抗性筛选和分子检测,获得转基因植株。本发明方法避免了组织培养和植株再生的繁杂过程,简便快捷,转化的后代可直接成株。

    玉米对生性状基因的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN1663357A

    公开(公告)日:2005-09-07

    申请号:CN200510038489.2

    申请日:2005-03-16

    Abstract: 玉米对生性状基因的分子标记及其应用,其特征是利用对生自交系H4D与互生自交系H53杂交(H4D×H53)和对生自交系H4D与互生自交系H28杂交(H4D×H28)两组合亲本和F2群体获得与op1、op2、op3和op4四个对生基因位点分别连锁的对生性状基因分子标记Bnlg1720、Bnlg1175、Umc1627、SCAR312和SCAR442。利用这些连锁标记存在状况进行对生基因位点的辅助选择。可大大提高选择效率,借助这些分子标记已选择了含有不同对生基因位点的互生自交系30多个,通过标记的互补选配亲本使F1聚合全部对生基因而表现为对生组合,利用该方法已获得3个特用对生组合。

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