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公开(公告)号:CN117025731A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202311139014.7
申请日:2023-09-05
Applicant: 山西省林业和草原科学研究院
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/689 , C12R1/01
Abstract: 一种沙棘植原体的LAMP快速分子检测方法,包括以下步骤:S1、设计并提供用于检测沙棘植原体16S rRNA片段的LAMP引物;S2、采用植物基因组提取试剂盒提取待测沙棘植原体总DNA作为模板;S3、配制LAMP反应体系:反应体系为10×Bst Reaction(10×ThermoPol)2.5μL、内外引物各0.5μL、dNTPs混合液(10μM)3.5μL、Bst DNA聚合酶1.0μL、DNA模板1.0μL;综上所述,本发明对沙棘植原体检测的灵敏度高,比普通的PCR方法高10000倍以上,检测高效快捷,结果明显,可直接通过肉眼观察鉴定,阳性结果为荧光绿色,阴性结果为橘黄色;总之,本发明将LAMP等温扩增技术应用于沙棘植原体的检测,可实现在沙棘植原体发病早期、含量较低时的快速、准确检测和诊断,对此类病害的早期诊断和检测具有重要意义,适合于基层推广使用。