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公开(公告)号:CN113621637A
公开(公告)日:2021-11-09
申请号:CN202110938727.4
申请日:2021-08-16
Applicant: 广西科学院
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,尤其涉及一种大肠杆菌助溶表达质粒及其构建方法与应用。本发明助溶表达质粒的构建方法,包括如下步骤:(1)以链霉菌DNA为模板,扩增得到伴侣基因groEL1、groES1和groEL2;(2)将伴侣基因groEL1、groES1和groEL2克隆至删除groEL和groES基因片段的大肠杆菌质粒载体pGro7上,得到助溶表达质粒pGroE。将本发明的pGroE质粒与dnmS和/或dnmQ基因编码的糖基化转移酶共表达,较pGro7质粒能显著提高其可溶性,该助溶表达质粒的开发,为解决基因表达时的包涵体问题提供了良好的解决方案。
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公开(公告)号:CN114657161A
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN202210053909.8
申请日:2022-01-18
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶DnmS的克隆表达与纯化的方法。本发明从Streptomyces peucetius ATCC 27952中获得糖基转移酶dnmS基因并提供了一种克隆表达和纯化该糖基转移酶的方法,最后首次在体外条件下获得高纯度的糖基转移酶。本发明实施后将为体外酶催化方式合成多种抗癌活性的糖苷产物提供了条件,也为后续的糖基转移酶结构解析奠定基础。
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