公开(公告)号：CN110004145B

公开(公告)日：2023-01-31

申请号：CN201910263714.4

申请日：2019-04-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 包文斌 ,  王诗琴 ,  戴开宇 ,  王海飞 ,  吴圣龙

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/12 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种sgRNA、双链DNA、载体和细胞。本发明还公开了一种KLF4基因的敲除方法。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术构建KLF4敲除的IPEC‑J2细胞系，可作为猪疾病研究的理想细胞模型；利用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除，比基因沉默、干扰等技术手段可更有效地敲除KLF4基因，更有助于KLF4蛋白的功能研究；基因测序检测表明KLF4基因序列被敲除，可造成KLF4基因功能的缺失，是较为理想的KLF4基因敲除的IPEC‑J2细胞模型。本发明的敲除方法简便，打靶效率高。

公开(公告)号：CN110004145A

公开(公告)日：2019-07-12

申请号：CN201910263714.4

申请日：2019-04-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 包文斌 ,  王诗琴 ,  戴开宇 ,  王海飞 ,  吴圣龙

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/12 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种sgRNA、双链DNA、载体和细胞。本发明还公开了一种KLF4基因的敲除方法。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术构建KLF4敲除的IPEC-J2细胞系，可作为猪疾病研究的理想细胞模型；利用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除，比基因沉默、干扰等技术手段可更有效地敲除KLF4基因，更有助于KLF4蛋白的功能研究；基因测序检测表明KLF4基因序列被敲除，可造成KLF4基因功能的缺失，是较为理想的KLF4基因敲除的IPEC-J2细胞模型。本发明的敲除方法简便，打靶效率高。

公开(公告)号：CN108220338A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201711170105.1

申请日：2017-11-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 包文斌 ,  戴开宇 ,  王诗琴 ,  王海飞 ,  吴圣龙

IPC: C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  C12N15/66

Abstract: 一种APN基因敲除的IPEC_J2细胞的构建方法，属于基因工程技术领域，本发明采用CRISPR/Cas9技术敲除IPEC_J2细胞系基因组中APN基因序列，建立的APN基因敲除的小肠上皮细胞可为深入揭示腹泻病原体致病机制以及抗腹泻病转基因猪的培育和应用提供更直接有效的研究模型。