公开(公告)号：CN103773891A

公开(公告)日：2014-05-07

申请号：CN201410067290.1

申请日：2014-02-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  于恩琪 ,  林伟东 ,  秦爱建 ,  张军 ,  房东升 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  梁祥焕 ,  王锦荣

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测耐药基因TetK的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst？DNA聚合酶8Μ/μL、l0mM？dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、l0μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B（50mM？MgCl2）和反应液C（100X的荧光染料SYBR？GreenⅠ）。通过对细菌基因组DNA提取、耐药基因TetK的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测，从而检测出耐药基因TetK。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。

公开(公告)号：CN103773891B

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201410067290.1

申请日：2014-02-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  于恩琪 ,  林伟东 ,  秦爱建 ,  张军 ,  房东升 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  梁祥焕 ,  王锦荣

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测耐药基因TetK的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶8Μ/μL、l0mM dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、l0μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B（50mM MgCl2）和反应液C（100X的荧光染料SYBR GreenⅠ）。通过对细菌基因组DNA提取、耐药基因TetK的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测，从而检测出耐药基因TetK。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。