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公开(公告)号：CN118086446A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410130197.4
申请日：2024-01-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供一种奶牛乳腺铁死亡模型的建立方法与应用，所述方法包括以下步骤：挤奶后，将消毒后的乳头经乳导管在左后乳区注射含肺炎克雷伯菌的生理盐水，作为感染组，右后乳区注射无菌生理盐水作为对照组；感染一段时间后，将将奶牛麻醉后采集乳腺组织，立即将部分乳腺组织转移到甲醛溶液中，并收集剩余组织放入低温保存管中保存。本发明所述模型构建方法具有便利、快捷、成功率高，易重复等优点，能够实现铁死亡在个体水平的定性和定量，使奶牛乳腺组织能够成为便利的模型来研究铁死亡现象。
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公开(公告)号：CN111454872A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010180295.0
申请日：2020-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了一种禽致病性大肠杆菌VI型分泌系统clpV基因缺失株及其构建方法和应用，用于禽致病性大肠杆菌的致病机理的研究和防控。利用Red同源重组系统成功构建APEC TW-XM菌株的clpV基因缺失株，获得缺失株TW-XM△clpV。将clpV基因克隆到表达载体pBR322中，转化入缺失株TW-XM△clpV，获得相应的基因回补株TW-XMC△clpV。本发明通过腹腔注射大肠杆菌构建小鼠感染动物模型，检测发现脑、血、肺组织载菌量以及脑组织中脑膜炎相关炎症因子mRNA的表达均显著下降。证明clpV与APEC致病力密切相关。
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公开(公告)号：CN118356273A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410719341.8
申请日：2024-06-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及基于超声引导下的山羊子宫内膜炎模型的建立方法，所述方法包括以下步骤：将全身麻醉后的山羊清空直肠内粪便并消毒外阴后，将超声探头伸入直肠，使用阴道扩张器暴露子宫颈，在超声影像引导下，使输精管经阴道进入子宫角，撤阴道扩张器，采用输精管将大肠杆菌悬液推注于两侧子宫角内。该方法操作简单，全程可视，可实现在子宫角释放大肠杆菌，生理反应小，可重复性高。
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公开(公告)号：CN117363572A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202310996935.9
申请日：2023-08-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及伪中间葡萄球菌诱导犬角膜上皮细胞焦亡模型的建立方法和应用，包括以下步骤：将复苏与传代后的犬角膜上皮细胞按MOI＝1:1加入对数生长期的伪中间葡萄球菌培养3h，加入庆大霉素和溶菌酶清除胞外菌，后添加低浓度的溶菌酶和庆大霉素进行维持培养3h，培养后使用细胞刮沿一个方向刮下细胞收集并离心，加入戊二醛溶液固定，乙醇梯度脱水，使用不含EDTA的胰酶消化细胞，采用流式细胞仪检测，以PI+/Caspase‑1+判定为Caspase‑1介导的细胞焦亡。该实验方法操作简单，可成功构建伪中间葡萄球菌诱导犬角膜上皮细胞焦亡模型，重复性高，不会导致细胞出现细胞坏死或凋亡。
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公开(公告)号：CN116836900A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310556506.X
申请日：2023-05-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12N15/113 , C12N15/31 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种肠炎沙门菌ryhB‑1和sopE双基因缺失株及其作为减毒疫苗的应用，其中的双基因缺失株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20221957。该缺失株利用λ‑Red同源重组技术，敲除肠炎沙门菌的非编码小RNA RyhB‑1和侵袭相关靶基因sopE，获得双基因缺失的减毒沙门菌。本发明制备的减毒沙门菌毒力显著降低，具有良好的安全性；攻毒后保护试验表明其具有良好的保护效果可保护鸡群免于发病；鸡群免疫后机体内会诱导全面高效的体液、细胞免疫。本发明为预防禽肠炎沙门菌感染提供了安全、免疫原性好、保护效力高的禽肠炎沙门菌减毒疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111134089B
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202010106019.X
申请日：2020-02-20
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/027 , A61K35/74 , A61D1/00 , A61D7/00
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型的建立方法；实验犬麻醉后，使用聚维酮碘溶液冲洗角膜和结膜囊，使用乳酸钠林格溶液将残留的聚维酮碘溶液冲洗干净，开睑器开睑，实验犬右侧卧保定，调整显微镜焦距以及犬头部位置，确保眼球完全暴露在视野内；吸取伪中间葡萄球菌菌液，在显微镜观察下注射器针头从瞳孔正中央水平线右侧0.3mm处进针，穿过角膜上皮层，于正中角膜基质层注入菌液，按住进针点拔出注射器，按压片刻；取下开睑器，闭合上下眼睑。该方法实验设备简单，操作方法简便，可成功构建犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型，重复性好，不会导致实验犬并发感染和死亡等不理想情况的发生，适用范围广。
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公开(公告)号：CN112126627A
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN202011055337.4
申请日：2020-09-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/37 , C12Q1/6851 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种犬角膜上皮细胞永生化细胞系的构建方法和应用，包括以下步骤：将实验犬麻醉后，采集角膜组织，收集角膜上皮组织，进行上皮细胞原代培养；将纯化后的原代犬角膜上皮细胞进行携带SV40T抗原基因的病毒转染，通过单克隆获得永生化犬角膜上皮细胞。本发明方法建立的细胞易于培养，增殖快，且具有血清依赖性，无肿瘤变，有利于进行角膜相关疾病致病机理、药物开发和疾病防治的体外研究，提供基础材料制备方法。
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公开(公告)号：CN111560341A
公开(公告)日：2020-08-21
申请号：CN202010428277.X
申请日：2020-05-19
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了泛性型惰性载体沙门氏菌S9H及其潜在应用。泛性型惰性载体沙门氏菌S9H是由惰性载体菌S9使用LB固体和液体培养基连续在体外培养传代至第四十代获得，在工作浓度细菌数量下能与人源、鼠源、牛源、猪源和禽源（包括鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子、鹌鹑）血清和全血都不发生非特异性凝集反应，且具有携带和表面表达展呈人源、鼠源、牛源、猪源和禽源（包括鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子、鹌鹑）不同抗原因子的特性，可应用于简便快速检测人和多种类动物抗原或感染抗体的间接凝集试验检测方法的开发，改进和完善现有凝集抗原抗体检测的凝集试验的特异性、敏感性不佳的技术瓶颈，具有广泛的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号：CN111564219B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202010274141.8
申请日：2020-04-09
Applicant: 扬州大学
IPC: G16H50/50 , G16B5/00 , C12Q1/6851 , C12N1/20 , A01K67/02
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法和应用，并利用该动物模型进行了细菌感染检测研究和益生菌辅助治疗研究。该模型的构建方法包括：细菌接种，益生菌（屎肠球菌）干预，血液学检查，肠道病理组织学分析和肠道炎症相关基因表达分析。该方法具有简便、快速、高效、经济等优点，可以用于反刍动物肠炎的研究提供模型，益生菌和药物筛选等。本发明对于研究反刍动物消化系统感染机制和防控治疗研究具有重大意义。
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公开(公告)号：CN111374094A
公开(公告)日：2020-07-07
申请号：CN202010137564.5
申请日：2020-03-02
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/027
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及驴源马流产沙门氏菌经皮下致非妊娠期小鼠子宫感染模型的建立方法，包括以下步骤：选取清洁级ICR非妊娠期小鼠，分为空白处理组和驴源马流产沙门氏菌处理组，饲养于常规环境中，消毒小鼠背部，驴源马流产沙门氏菌处理组背部皮下接种驴源马流产沙门氏菌菌液，空白对照组皮下接种PBS。该方法改进了接种方式，缩短了感染周期，降低了实验成本，为进一步探究驴源马流产沙门氏菌的致病机理和防控技术，提供动物模型。
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