一种基于CRISPR-Cas9系统构建EPB41基因敲除THP-1细胞系的方法

    公开(公告)号:CN112481305A

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN202011374637.9

    申请日:2020-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统构建EPB41基因敲除THP‑1细胞系的方法。本发明方法以人EPB41基因第一外显子中的蛋白编码序列,第四外显子和第七外显子中的蛋白编码序列中符合5‘‑G‑N18‑NGG‑3或5‘‑G‑N20‑NGG‑3’或5’‑CCN‑N18‑C‑3’或5’‑CCN‑N20‑C‑3’序列规则排列的片段的“N18或N20”为靶序列;得到随着细胞的分裂、增殖传递到下一代,形成稳定的敲除EPB41基因的THP‑1细胞系。实验证明,本发明所得的敲除EPB41基因的THP‑1细胞系不能正确的表达4.1R蛋白。研究蛋白4.1R缺失对细胞膜功能的影响,也可用于研究蛋白4.1R与一些免疫反应或其它信号通路蛋白分子直接或间接的相互作用。

    一种北平顶猴T细胞的体外扩增方法

    公开(公告)号:CN111607565A

    公开(公告)日:2020-09-01

    申请号:CN202010497827.3

    申请日:2020-06-04

    Abstract: 本发明公开了一种北平顶猴T细胞的体外扩增方法,属于生物技术领域,本发明利用已商品化的非人灵长类动物T细胞激活/扩增试剂盒进行北平顶猴T细胞的体外扩增,该试剂盒包含磁珠、生物素化抗体,可模拟体内抗原提呈细胞的作用,提供T细胞活化的第一信号、第二信号,有效激活和纯化外周血单核细胞中的静息T细胞。CD3分子是T细胞表面的重要标志,其与TCR以非共价键结合形成TCR-CD3复合体,向胞内传递活化信号,诱导T细胞活化与增值。CD28介导的共刺激信号可以诱导T细胞的分化、增殖和IL-2等细胞因子的分泌。

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