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公开(公告)号：CN101914603B
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201010221511.8
申请日：2010-07-08
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用乳糖诱导pMFH载体生产重组蛋白的发酵方法。本发明主要通过优化发酵培养基的配方、诱导前补料液的配方、诱导后补料液的配方、乳糖诱导液的配方以及发酵参数，成功运用乳糖替代IPTG作为诱导剂来诱导目的蛋白的表达。本发明的目的蛋白表达水平高，目的蛋白占菌体总蛋白的水平可达35～49％，与IPTG诱导水平相当。而且本发明在发酵过程中添加乳糖诱导后再补甘油作为碳源，既可大大提高生物量，又能减少代谢副产物乙酸的生成，还能避免由于发酵液中葡萄糖的存在而影响乳糖的诱导效果。可见，本发明不仅简便，发酵时间短，生产成本低，而且得到的产物中无毒害物质残留。
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公开(公告)号：CN1786031A
公开(公告)日：2006-06-14
申请号：CN200510102363.7
申请日：2005-12-16
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了胰高血糖素样多肽－1类似物及其制备方法与应用。本发明提供了在第5位，第6位，第8位，第34位，第35位和/或在第37位进行修饰后的胰高血糖素样多肽－1类似物。本发明提供了该多肽的化学制备和分离方法和通过采用重组DNA技术制备与纯化该多肽方法。该多肽在临床上可用于治疗2型糖尿病和肥胖症。本发明还提供了该多肽用于制备治疗2型糖尿病的缓释药物的应用。
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公开(公告)号：CN101985470B
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201010291350.X
申请日：2005-12-16
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了胰高血糖素样多肽-1类似物及其制备方法与应用。本发明提供了第5位，第6位，第34位，第35位和/或在第37位进行修饰后的胰高血糖素样多肽-1类似物。本发明提供了该多肽的化学制备和分离方法和通过采用重组DNA技术制备与纯化该多肽方法。该多肽在临床上可用于治疗2型糖尿病和肥胖症。本发明还提供了该多肽用于制备治疗2型糖尿病的缓释药物的应用。
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公开(公告)号：CN102174068A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110032128.2
申请日：2011-01-29
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种大规模纯化含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法与应用。该方法包括如下步骤：对表达含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的工程菌发酵液进行预处理，得到含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白粗提物，通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到融合蛋白粗提物的初次纯化蛋白，接着甲酸水解，再通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到初级纯化的目的多肽，HPLC精制后可得纯度高于95％的目的多肽。本发明所述的方法有效地对含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白进行大规模的制备，最终目的多肽的得率高、纯度高、耗时短、成本低，可达到g级别以上生产规模，可以满足动物实验以及临床前的实验研究。
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公开(公告)号：CN102585015B
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201210007118.8
申请日：2012-01-11
Applicant: 暨南大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , A61K38/26 , A61K47/48 , A61P3/10 , A61P3/04 , A61P3/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种含有胰高血糖素样肽-1的融合蛋白及制备方法与应用。该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过基因工程的方法，突变已知序列的一个氨基酸，得到编码本发明所述的融合蛋白的核苷酸序列；接着将该核苷酸序列克隆入表达载体中，通过表达、纯化，得到本发明所述的融合蛋白。本发明所提供的含有GLP-1的融合蛋白使GLP-1的生理作用具有更好的稳定性和持续性，而且，药效学结果表明，该融合蛋白具有显著的降低血糖效果。另外，经过长期注射本发明所提供的融合蛋白，能显著提高糖耐受性，刺激胰岛素的分泌，保护胰岛β细胞，延缓糖尿病病程的发展。因而本发明所提供的GLP-1融合蛋白非常具有优势和潜力应用于临床治疗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101294187B
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN200810028614.5
申请日：2008-06-06
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开一种缓释生物活性多肽的方法与应用，该方法是用一种对血浆环境敏感的连接分子将生物活性多肽与血清白蛋白结合多肽连接起来组成一个融合多肽并转入宿主，宿主的血浆蛋白酶或血液的微碱性pH催化裂解连接分子，释放其中包涵的生物活性多肽，从而达到延长生物活性肽在人体内循环半衰期的目的。本发明的缓释生物活性多肽的方法可用于制备抗人类2-型糖尿病多肽药物、抗人类骨质疏松症多肽药物和抗癌多肽药物等多肽药物。本发明的缓释生物多肽的方法，不但延长了生物活性多肽在人体内循环的半衰期，还保持了生物活性多肽的生理活性，此外，使用融合多肽也比单独使用活性多肽具有更强的药物动力学性质。
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公开(公告)号：CN1786031B
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN200510102363.7
申请日：2005-12-16
Applicant: 暨南大学
IPC: C07K14/605 , A61P3/10 , A61K38/26
Abstract: 本发明公开了胰高血糖素样多肽-1类似物及其制备方法与应用。本发明提供了在第5位，第6位，第8位，第34位，第35位和/或在第37位进行修饰后的胰高血糖素样多肽-1类似物。本发明提供了该多肽的化学制备和分离方法和通过采用重组DNA技术制备与纯化该多肽方法。该多肽在临床上可用于治疗2型糖尿病和肥胖症。本发明还提供了该多肽用于制备治疗2型糖尿病的缓释药物的应用。
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公开(公告)号：CN101914603A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010221511.8
申请日：2010-07-08
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用乳糖诱导pMFH载体生产重组蛋白的发酵方法。本发明主要通过优化发酵培养基的配方、诱导前补料液的配方、诱导后补料液的配方、乳糖诱导液的配方以及发酵参数，成功运用乳糖替代IPTG作为诱导剂来诱导目的蛋白的表达。本发明的目的蛋白表达水平高，目的蛋白占菌体总蛋白的水平可达35～49％，与IPTG诱导水平相当。而且本发明在发酵过程中添加乳糖诱导后再补甘油作为碳源，既可大大提高生物量，又能减少代谢副产物乙酸的生成，还能避免由于发酵液中葡萄糖的存在而影响乳糖的诱导效果。可见，本发明不仅简便，发酵时间短，生产成本低，而且得到的产物中无毒害物质残留。
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公开(公告)号：CN101294187A
公开(公告)日：2008-10-29
申请号：CN200810028614.5
申请日：2008-06-06
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开一种缓释生物活性多肽的方法与应用，该方法是用一种对血浆环境敏感的连接分子将生物活性多肽与血清白蛋白结合多肽连接起来组成一个融合多肽并转入宿主，宿主的血浆蛋白酶或血液的微碱性pH催化裂解连接分子，释放其中包涵的生物活性多肽，从而达到延长生物活性肽在人体内循环半衰期的目的。本发明的缓释生物活性多肽的方法可用于制备抗人类2－型糖尿病多肽药物、抗人类骨质疏松症多肽药物和抗癌多肽药物等多肽药物。本发明的缓释生物多肽的方法，不但延长了生物活性多肽在人体内循环的半衰期，还保持了生物活性多肽的生理活性，此外，使用融合多肽也比单独使用活性多肽具有更强的药物动力学性质。
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公开(公告)号：CN102174068B
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201110032128.2
申请日：2011-01-29
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种大规模纯化含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法与应用。该方法包括如下步骤：对表达含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的工程菌发酵液进行预处理，得到含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白粗提物，通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到融合蛋白粗提物的初次纯化蛋白，接着甲酸水解，再通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到初级纯化的目的多肽，HPLC精制后可得纯度高于95％的目的多肽。本发明所述的方法有效地对含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白进行大规模的制备，最终目的多肽的得率高、纯度高、耗时短、成本低，可达到g级别以上生产规模，可以满足动物实验以及临床前的实验研究。
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