公开(公告)号：CN110964785B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN201911291884.X

申请日：2019-12-16

Applicant: 武汉大学

Inventor： 王富安 ,  魏洁 ,  李丰哲

IPC: C12Q1/682 ,  C12Q1/6841 ,  C12Q1/6886

Abstract: 本发明公开了一种基于恒温交叉催化核酸酶反应的核酸分析方法。通过目标物激活HCR放大器中亚稳态发夹的自主和连续打开，产生包含大量DNAzyme的双链DNA纳米线，随后该DNAzyme不断催化剪切底物释放出大量的新引发链以反向激活HCR反应。由于DNAzyme可以持续不断地积累HCR引发链以及HCR又可以持续组装大量的DNAzyme，这种交叉催化放大反应可以将分子识别过程转换为显著放大的信号输出。该R‑HCR放大器很容易与辅助传感模块结合发展成为一个通用的传感体系，成功实现了单分子miRNA的超灵敏体外检测和细胞内成像。在细胞生物学和临床诊断中对痕量生物标志物的体内检测方面具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN110964785A

公开(公告)日：2020-04-07

申请号：CN201911291884.X

申请日：2019-12-16

Applicant: 武汉大学

Inventor： 王富安 ,  魏洁 ,  李丰哲

IPC: C12Q1/682 ,  C12Q1/6841 ,  C12Q1/6886

Abstract: 本发明公开了一种基于恒温交叉催化核酸酶反应的核酸分析方法。通过目标物激活HCR放大器中亚稳态发夹的自主和连续打开，产生包含大量DNAzyme的双链DNA纳米线，随后该DNAzyme不断催化剪切底物释放出大量的新引发链以反向激活HCR反应。由于DNAzyme可以持续不断地积累HCR引发链以及HCR又可以持续组装大量的DNAzyme，这种交叉催化放大反应可以将分子识别过程转换为显著放大的信号输出。该R-HCR放大器很容易与辅助传感模块结合发展成为一个通用的传感体系，成功实现了单分子miRNA的超灵敏体外检测和细胞内成像。在细胞生物学和临床诊断中对痕量生物标志物的体内检测方面具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN107574227A

公开(公告)日：2018-01-12

申请号：CN201710937113.8

申请日：2017-10-10

Applicant: 武汉大学

Inventor： 王富安 ,  魏洁

IPC: C12Q1/6818 ,  C12Q1/6886

Abstract: 本发明公开了一种基于级联杂交链式反应的核酸分析方法，属于分子检测领域。本发明在单个杂交链式反应HCR的基础上，通过设计两级HCR反应，在单个HCR反应基础上达到了信号的进一步扩增，最终一个目标物可以使多个标记有不同荧光染料的发夹核酸探针之间发生交替杂交，形成枝状的DNA纳米结构，通过荧光共振能量转移提供信号输出，根据荧光团的荧光强度改变值判断目标核酸的浓度。本方法可用于DNA和miRNA的体外检测，特异性好，灵敏度高。本方法还可用于细胞内的miRNA的成像分析，有利于实现癌症的早期诊断。

公开(公告)号：CN107574227B

公开(公告)日：2020-03-10

申请号：CN201710937113.8

申请日：2017-10-10

Applicant: 武汉大学

Inventor： 王富安 ,  魏洁

IPC: C12Q1/6818 ,  C12Q1/6886

Abstract: 本发明公开了一种基于级联杂交链式反应的核酸分析方法，属于分子检测领域。本发明在单个杂交链式反应HCR的基础上，通过设计两级HCR反应，在单个HCR反应基础上达到了信号的进一步扩增，最终一个目标物可以使多个标记有不同荧光染料的发夹核酸探针之间发生交替杂交，形成枝状的DNA纳米结构，通过荧光共振能量转移提供信号输出，根据荧光团的荧光强度改变值判断目标核酸的浓度。本方法可用于DNA和miRNA的体外检测，特异性好，灵敏度高。本方法还可用于细胞内的miRNA的成像分析，有利于实现癌症的早期诊断。

公开(公告)号：CN118048439A

公开(公告)日：2024-05-17

申请号：CN202410380597.0

申请日：2024-03-30

Applicant: 武汉大学深圳研究院

Inventor： 王富安 ,  尚金桦

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6883 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于自催化滚环反应的核酸分析方法，属于分子检测领域。本发明在传统RCA反应基础上，通过在模板链中引入I‑R3DNAzyme自剪切单元，在单级RCA线性扩增基础上进行进一步信号放大，引发RCA与DNAzyme模块交叉激活，实现指数级信号扩增，由于扩增产物上有周期性排列的重复序列，为报告链提供足够的结合位点，这一自催化滚环扩增反应可以与不同的信号输出方式进行集成，将目标序列的输入转换为扩增的信号输出。本方法可以用于DNA与miRNA的体外检测，具有较高的灵敏性与特异性，并且可以实现两种miRNA的同时分析。本方法还可以用于不同种类细胞中两种miRNA的同时原位成像，为miRNA相关疾病的早期诊断与筛查提供有力工具。

公开(公告)号：CN115181743A

公开(公告)日：2022-10-14

申请号：CN202110366516.8

申请日：2021-04-06

Applicant: 武汉大学

Inventor： 王富安 ,  王庆 ,  李丰哲

IPC: C12N15/113 ,  C12Q1/26 ,  A61K48/00 ,  A61K31/7088 ,  A61P35/00 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明提供一种功能核酸活性调控的方法，包括将所述功能的其中一个或多个碱基修饰，将功能核酸活性封闭。优选地，将所述功能核酸或者功能核酸作用的底物的其中一个或多个碱基修饰，将功能核酸活性封闭之后，还包括将所述修饰基团脱除，活化所述功能核酸。本发明还提供一种脱氧核酶分子探针，所述脱氧核酶分子探针包括结构域a、结构域b和结构域c。通过筛选得到m6A封闭的Dz，实现了m6A去甲基化酶的高效灵敏检测以及抑制剂小分子药物的筛选和检测。