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公开(公告)号：CN116426565A
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202310275729.9
申请日：2023-03-16
Applicant: 武汉市农业科学院 , 新疆农业科学院海南三亚农作物育种试验中心 , 新疆农业科学院哈密瓜研究中心
IPC: C12N15/84 , C12N15/113 , C12N15/53 , A01H5/00 , A01H6/34
Abstract: 本发明涉及基因编辑技术领域，具体涉及一种适用于甜瓜CRISPR/Cas9基因编辑的载体及其应用。本发明通过将pYL_Cas9Pubi_B载体启动子修改为“pAtUBQ10+SV40NLS”，“Cas9+SV40NLS+NOS(t)”元件替换为pMOD_A0501载体上的“AtCas9+SV40NLS+HSP(t)”，之后在Asc酶切位点处按顺序加入pAtU6‑26启动子、2X的BsaI酶切位点、gRNA‑sc和AtU6‑1(t)终止子，使其能够适用于甜瓜CRISPR/Cas9基因编辑的载体，且当其不添加可视化元件时，在甜瓜中的编辑效率可达到3.23％，添加可视化元件后，其编辑效率可达到2.08％，该研究对于完善优化pYL_Cas9Pubi_B载体在甜瓜中的应用并为进一步提高甜瓜的基因编辑效率奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119020406A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411094789.1
申请日：2024-08-10
Applicant: 武汉市农业科学院
IPC: C12N15/84 , C12N15/29 , C12N1/21 , C07K14/415 , A01H4/00 , A01H5/00 , A01H6/20 , A01H6/34 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种提高顽拗基因型植物遗传转化再生效率的表达载体及应用，属于遗传转化技术领域。该表达载体包括构建在单一开放阅读框中的AtGRF5和BoFT基因组合，以及驱动所述基因组合表达的驱动元件。本发明通过植物发育调控基因AtGRF5与芸薹属BoFT基因在遗传转化载体中表达，可以快速获得顽拗基因型种质资源的转基因植株，为顽拗基因型种质资源的基因功能验证和筛选研究提供技术支持。
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公开(公告)号：CN117844962A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202311685190.0
申请日：2023-12-07
Applicant: 武汉市农业科学院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , A01H1/04
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种与西瓜果皮耐裂性状相关的SNP标记及其应用。该SNP标记位于西瓜基因组第10号染色体的第2493883位，其多态性为G或A；其中，西瓜基因组参考版本为97103，V2。该SNP标记位点可以快速、高效、准确地鉴定西瓜中是否存在果皮耐裂性状相关控制基因，利用该SNP分子标记进行耐裂西瓜辅助育种时，不仅可以克服性状表型鉴定的困难，还能实现早期、快速鉴定，缩短育种周期，大幅降低人力物力成本，有助于促进果皮耐裂西瓜新品种的选育。
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公开(公告)号：CN117051159A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202311123840.2
申请日：2023-08-30
Applicant: 武汉市农业科学院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及基因工程育种技术领域，具体涉及一种鉴定西瓜果皮耐裂性状的InDel分子标记及其应用，所述InDel分子标记在耐裂西瓜中的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述InDel分子标记在果皮不耐裂西瓜中的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该InDel分子标记的正向引物：TGCAGTCTATCGCCCAATGA、反向引物：TGCATGCTAAGCTTTCATTTTGT。本发明提供的InDel分子标记可以快速、高效、准确地鉴定西瓜中是否存在果皮耐裂性状相关控制基因；利用该InDel分子标记进行果皮耐裂西瓜辅助育种时，不仅可克服性状表型鉴定的困难，还能实现早期、快速鉴定，缩短周期，大幅降低人力物力成本，有助于促进果皮耐裂西瓜新品种的选育。
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公开(公告)号：CN109207565B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201811058800.3
申请日：2018-09-11
Applicant: 武汉市农业科学院
IPC: C12Q1/6851 , C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种西瓜倍性检测方法。步骤包括：原生质体制备、总DNA提取、定量PCR法检测DNA浓度。以不同倍性西瓜叶片为材料分离原生质体，提取等量原生质体中的总DNA，根据西瓜5S rDNA序列设计定量PCR特异引物，以不同浓度DNA绘制Ct值与DNA浓度的标准曲线，根据不同倍性西瓜DNA溶液测得Ct值换算其浓度并计算其倍性。本发明对样品要求较低，除营养物质较多的果实、种子之外的其他植物组织均可进行原生质体分离；对仪器设备要求较低，价格低廉的荧光定量PCR仪可满足需求，无需购置价格相对昂贵的流式细胞仪；准确性与流式细胞法相近，检测精度高于气孔保卫细胞叶绿体计数法，操作流程较染色体计数法更容易实现；为西瓜倍性检测提供了新的途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108401808A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810062200.8
申请日：2018-01-23
Applicant: 武汉市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种大棚西瓜与藜蒿轮作栽培方法，1：定植西瓜嫁接苗；2：西瓜嫁接苗缓苗后，在大棚内继续生长进入西瓜伸蔓期，在西瓜伸蔓期进行整枝留蔓处理；3：在大棚内继续生长进入开花坐果期，西瓜果实成熟后收获西瓜果实，铲除西瓜根，并整地用于藜蒿种植；4：在温室大棚中采用茎秆扦插无性繁殖的方式种植绿秆藜蒿或者白秆藜蒿；5：茎秆扦插后3～4天浸灌1次透水，茎秆扦插后7～10天萌芽生根，藜蒿嫩梢长至3㎝时，施提苗肥；当藜蒿幼苗长到5～6㎝时，追施尿素；并用叶面肥进行叶面喷施；藜蒿采收前7天，追施尿素作促产肥，并分茬收获。本发明可以有效的减轻西瓜连作障碍。
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公开(公告)号：CN114836462A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210309348.3
申请日：2022-03-28
Applicant: 武汉市农业科学院
Abstract: 一种高效的农杆菌介导甜瓜遗传转化方法，包括：S1、选种消毒后接种于种子发芽培养基MeM1上暗培养，备用；S2、用农杆菌浸染培养基I M悬浮菌液将经步骤S1生长健壮的甜瓜苗上切除的子叶外植体进行浸染，最后将浸染的子叶外植体置入农杆菌共培养基MeM2上共培养，备用；S3、将经步骤S2共培养后的子叶外植体置于诱导芽再生培养基MeM3上培养，每两周继代一次，备用；S4、将步骤S3培养基上再生的芽丛切下置于芽延长培养基MeM4中继续筛选培养，直到芽延长至2cm后转移到生根培养基中；S5、将经步骤S4获得的芽转移至生根培养基MeM5上生长，之后转移至营养钵内培养；优点是：同时适用于薄皮甜瓜、厚皮甜瓜，并使得再生芽的黄化率低至1.6％。
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公开(公告)号：CN109169254A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201810991016.1
申请日：2018-08-28
Applicant: 武汉市农业科学院
Abstract: 本发明所设计的甜酸味甜瓜的杂交育种方法，步骤为：1、以甜瓜杂交品种风味5号为原始材料，获得遗传稳定的高代自交系甜瓜父本；以甜瓜杂交品种风味5号的果实变异株为原始材料，获得遗传稳定的高代自交系甜瓜母本；2、选用父本和母本进行育苗；3、在父本和母本的幼苗有1～2片真叶期定植；4、在父本幼苗和母本幼苗的生长过程中进行单蔓整枝处理；5、进行杂交处理；6、授粉后的种瓜成熟时进行采收，切开瓜皮取出种子。本发明的杂交后代的口感都可具备一定酸味口感，由此高代自交系甜瓜母本可以作为一份选育特色甜瓜品种的核心材料进行利用。
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公开(公告)号：CN108353737A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810105397.9
申请日：2018-01-28
Applicant: 武汉市农业科学院
Abstract: 本发明属农作物栽培技术领域，公开了一种大棚甜瓜-藜蒿栽培方法，将甜瓜、藜蒿两种作物进行轮作；进行甜瓜的栽培：品种选择、整地施肥、定植、田间管理；进行藜蒿栽培：品种选择、整地施肥、定植、田间管理、适时采收。本发明将当地两个主要的经济作物进行轮作，提高了大棚复种指数；本发明因地制宜的进行栽培模式的创新；选用两种高效的经济作物进行轮作，减轻了甜瓜的连作障碍，较种植单一作物经济效益提高30％-80％，综合经济效益更高。
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公开(公告)号：CN114836462B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210309348.3
申请日：2022-03-28
Applicant: 武汉市农业科学院
Abstract: 一种高效的农杆菌介导甜瓜遗传转化方法，包括：S1、选种消毒后接种于种子发芽培养基MeM1上暗培养，备用；S2、用农杆菌浸染培养基I M悬浮菌液将经步骤S1生长健壮的甜瓜苗上切除的子叶外植体进行浸染，最后将浸染的子叶外植体置入农杆菌共培养基MeM2上共培养，备用；S3、将经步骤S2共培养后的子叶外植体置于诱导芽再生培养基MeM3上培养，每两周继代一次，备用；S4、将步骤S3培养基上再生的芽丛切下置于芽延长培养基MeM4中继续筛选培养，直到芽延长至2cm后转移到生根培养基中；S5、将经步骤S4获得的芽转移至生根培养基MeM5上生长，之后转移至营养钵内培养；优点是：同时适用于薄皮甜瓜、厚皮甜瓜，并使得再生芽的黄化率低至1.6％。
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