一种去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法及其应用

    公开(公告)号:CN116162684A

    公开(公告)日:2023-05-26

    申请号:CN202310128111.X

    申请日:2023-02-17

    Applicant: 江汉大学

    Abstract: 本申请涉及基因测序技术领域,尤其涉及一种去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法及其应用,所述方法包括:在构建待测样本的测序文库的第一步PCR反应体系中加入DNA Spike‑ins,后以第一多重扩增引物进行第一步PCR扩增,得到第一扩增产物;向所述第一扩增产物中加入第二步PCR反应体系和第二PCR扩增引物,并进行第二步PCR扩增,得到测序文库;DNA Spike‑ins依据待测样本中目标生物的基因组标记位点的序列设计并合成;第一步PCR反应体系包括dUTP和UDG;第二步PCR反应体系包括dUTP;通过在第一步PCR反应体系中加入DNA Spike‑ins,减少扩增产物残余污染的扩增,再在每步PCR反应体系中加入dUTP,并在第一步PCR反应体系中加入UDG,能降解含尿嘧啶的PCR产物,去除扩增产物残余污染。

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