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公开(公告)号：CN116064828A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202210976918.4
申请日：2022-08-15
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测斯克里布纳短体线虫的RPA引物、试剂盒及检测方法，属于生物技术领域。通过比对斯克里布纳短体线虫的18S、28S和ITS等多个区域、不同短体线虫的基因组序列，设计筛选出一套特异性高、灵敏性强的用于检测斯克里布纳短体线虫的RPA引物对。利用该特异性引物对和RPA试剂盒，以斯克里布纳短体线虫为模板进行反应，所获的特异性片段大小为329bp；以其他不同种线虫为模板时，均无条带。该特异性引物可检测出单条或混合样本中的斯克里布纳短体线虫，特异性高，灵敏性强，操作便利，对仪器设备的依赖性低，可以应用于田间病害发生时早期诊断、辅助鉴定为病害防治提供指导。
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公开(公告)号：CN115927652A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210977336.8
申请日：2022-08-15
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速检测桑尼短体线虫的RPA引物、试剂盒及检测方法，涉及生物技术领域。本发明通过比对桑尼短体线虫的不同基因区段进行引物的设计筛选，获得特异性RPA引物，利用Basic RPA试剂盒进行反应，反应产物通过琼脂糖凝胶电泳检测。若电泳结果出现277bp的特异性条带，则待测线虫为桑尼短体线虫，反之则无，可以高效、快速、便捷、准确的获得检测结果，为早期田间预测预报和防控提供技术支持，同时操作简单，不依赖昂贵的精密仪器和专业技术背景，为基层人员使用提供了便利。
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公开(公告)号：CN116769005B
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202310733057.1
申请日：2023-06-20
Applicant: 新疆农业科学院植物保护研究所 , 河南农业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12N15/82 , A01G7/06 , A01G13/00
Abstract: 本发明公开了一种根腐线虫效应蛋白Pc‑NEX2，所述效应蛋白Pc‑NEX2的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其编码基因Pc‑NEX2的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，涉及生物基因工程技术领域。基于该基因设计的原位杂交探针显示编码基因Pc‑NEX2在咖啡短体线虫食道腺细胞中表达，且在不同发育阶段的表达水平不同，基于该基因设计的dsRNA可降低咖啡短体线虫的繁殖和致病能力，因此利用该蛋白或其编码基因进行生物防控具有重大价值；且对于短体线虫致病机理研究以及抗线虫植物制备提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN115992250A
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202210877836.4
申请日：2022-07-25
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于寄生虫检测试剂制备技术领域，具体涉及一种检测咖啡短体线虫的RPA引物对、试剂盒及其应用。该RPA引物对包括如SEQIDNO：1所示序列的上游引物和如SEQIDNO：2所示序列的下游引物。该RPA引物对可以通过RPA扩增或PCR扩增检测咖啡短体线虫，灵敏度高，特异性强；对腐烂茎线虫、水稻干尖线虫、小叶螺旋线虫、饰环矮化线虫和其它短体线虫的不同种群均无特异性条带；还可检测出单条或混合线虫DNA样本。
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公开(公告)号：CN116751769B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202310721293.1
申请日：2023-06-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N9/64 , C12N15/57 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12Q1/6841 , A01N57/16 , A01P5/00
Abstract: 本发明公开了咖啡短体线虫Pc‑CL蛋白、编码基因及其应用，属于生物技术领域。本发明提供咖啡短体线虫食道腺表达基因Pc‑CL，它在雌虫的表达量显著高于幼虫、雄虫和卵中表达量。通过基因沉默，使咖啡短体线虫摄入Pc‑CL dsRNA片段，结果表明Pc‑CL基因经dsRNA处理沉默后，咖啡短体线虫的繁殖力与对照eGFP dsRNA相比下降了42.8％，线虫对寄主玉米的侵染力和致病力与对照eGFP dsRNA相比也显著下降，表明Pc‑CL基因可作为靶标基因在防治咖啡短体线虫中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116769005A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310733057.1
申请日：2023-06-20
Applicant: 新疆农业科学院植物保护研究所 , 河南农业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12N15/82 , A01G7/06 , A01G13/00
Abstract: 本发明公开了一种根腐线虫效应蛋白Pc‑NEX2，所述效应蛋白Pc‑NEX2的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其编码基因Pc‑NEX2的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，涉及生物基因工程技术领域。基于该基因设计的原位杂交探针显示编码基因Pc‑NEX2在咖啡短体线虫食道腺细胞中表达，且在不同发育阶段的表达水平不同，基于该基因设计的dsRNA可降低咖啡短体线虫的繁殖和致病能力，因此利用该蛋白或其编码基因进行生物防控具有重大价值；且对于短体线虫致病机理研究以及抗线虫植物制备提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN116254269A
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202210827945.5
申请日：2022-07-13
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/12 , C07K14/435 , C12N15/113 , C12N15/87 , A01K67/033 , C12Q1/6888 , C12Q1/6841 , A01G7/06 , A01G13/00 , A01H1/04
Abstract: 本发明涉及一种根腐线虫侵染致病相关基因Pc‑CZ、其编码蛋白及其应用，旨在解决根腐线虫难以防治的技术问题。本发明筛选得到一种Pc‑CZ基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码Pc‑CZ蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。在本发明中抑制Pc‑CZ基因的表达（如使其沉默或下调表达），则能抑制根腐线虫对植物的侵染和/或致病；Pc‑CZ基因在咖啡短体线虫的生殖、侵染和致病过程中发挥重要作用，可作为植物抗线虫工程的靶标基因；本发明对于根腐线虫致病机理研究以及抗线虫植物选育等方面具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN117568504A
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202311060907.2
申请日：2023-08-22
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/77
Abstract: 本发明申请涉及一种可视化快速检测假禾谷镰孢RAA‑LFD试剂盒、引物组合物及其应用，旨在解决现有检测方法难以从种类繁多且高度相似的镰孢中快速有效的区别鉴定出强致病力的假禾谷镰孢的技术问题。结合长期实践研究及大量的筛选试验，发现1对基于假禾谷镰孢EF‑1a基因序列而设计的RAA引物具有非常好的特异性和稳定性，能够从众多具有相似特性的镰孢中有效地区别鉴定出假禾谷镰孢；进一步综合考量RAA‑LFD引物和探针的设计原则，将所筛选得到的RAA引物进一步设计成适用于RAA‑LFD试剂盒的引物，并在其适合的位置设计探针，再通过侧流纸层析试纸条检测特异性扩增结果，建立了灵敏性、特异性好且操作简便的假禾谷镰孢RAA‑LFD快速检测方法。
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公开(公告)号：CN113912698B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202111218472.0
申请日：2021-10-20
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/85 , A01K67/033
Abstract: 本发明涉及一种咖啡短体线虫Pc‑CD蛋白、其编码基因及应用，旨在解决咖啡短体线虫难以防治的技术问题。本发明筛选得到一种Pc‑CD蛋白，获取自咖啡短体线虫，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码该蛋白的Pc‑cd基因核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明利用dsRNA处理沉默Pc‑cd基因后，咖啡短体线虫的繁殖力及其对寄主玉米的致病力与对照GFP dsRNA处理组相比均显著降低，表明此基因在咖啡短体线虫的生殖和侵染致病过程中具有重要作用，可作为植物抗线虫工程的靶标基因；本发明对于短体线虫致病机理研究以及抗线虫植物制备具有重大应用价值。
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公开(公告)号：CN114304074A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210043819.0
申请日：2022-01-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: A01K67/033
Abstract: 本发明公开了一种小叶螺旋线虫人工培养方法，涉及线虫培育技术领域，包括以下步骤：(1)将胡萝卜灭菌后削去表皮，切片，于25℃暗培养至长出愈伤组织；(2)将小叶螺旋线虫消毒处理，无菌水洗涤，制备成小叶螺旋线虫悬浮液，滴加在胡萝卜愈伤组织上；27.5℃暗培养90天，得到大量小叶螺旋线虫。本发明方法培育的小叶螺旋线虫繁殖量大，繁殖效率高、周期短且稳定简便，可为小叶螺旋线虫生物学研究提供大量的供体。
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