一种表达Sox4基因重组腺病毒的制备及纯化方法

    公开(公告)号:CN110846343B

    公开(公告)日:2020-12-01

    申请号:CN201911091174.2

    申请日:2019-11-09

    Abstract: 本发明提供了一种表达Sox4基因重组腺病毒的制备及纯化方法,属于基因工程领域。该方法将Sox4基因片段与腺病毒pAdtrack‑CMV载体连接,得到重组腺病毒表达质粒pAdtrack‑Sox4。线性化的pAdtrack‑Sox4与AdEasy载体形成的重组子转染HEK293细胞生成腺病毒。用氯化铯梯度离心纯化病毒,并采用微量全细胞病变法检测病毒滴度,最终实现腺病毒包装、生产和纯化的整个过程。该Sox4基因重组腺病毒可成功侵染293T细胞和小鼠腹股沟脂肪组织,实现了Sox4基因在体细胞和小鼠组织中的持续高表达,这为日后开展有关Sox4基因功能的研究奠定了良好的技术基础。

    一种表达Sox4基因重组腺病毒的制备及纯化方法

    公开(公告)号:CN110846343A

    公开(公告)日:2020-02-28

    申请号:CN201911091174.2

    申请日:2019-11-09

    Abstract: 本发明提供了一种表达Sox4基因重组腺病毒的制备及纯化方法,属于基因工程领域。该方法将Sox4基因片段与腺病毒pAdtrack-CMV载体连接,得到重组腺病毒表达质粒pAdtrack-Sox4。线性化的pAdtrack-Sox4与AdEasy载体形成的重组子转染HEK293细胞生成腺病毒。用氯化铯梯度离心纯化病毒,并采用微量全细胞病变法检测病毒滴度,最终实现腺病毒包装、生产和纯化的整个过程。该Sox4基因重组腺病毒可成功侵染293T细胞和小鼠腹股沟脂肪组织,实现了Sox4基因在体细胞和小鼠组织中的持续高表达,这为日后开展有关Sox4基因功能的研究奠定了良好的技术基础。

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