一种表达并纯化可溶性屋尘螨主要过敏原Der p 2蛋白的方法

    公开(公告)号:CN106282213A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201510296062.6

    申请日:2015-06-03

    Abstract: 本发明涉及一种在大肠杆菌中高可溶性表达并纯化屋尘螨主要过敏原Derp2蛋白的方法。本方法以大肠杆菌伴侣蛋白触发因子(TriggerFactor,TF)作为融合标签实现了Derp2的高可溶性表达并优化出高效的纯化工艺,用该方法获得的样品纯度高于98%。经验证,纯化的重组Derp2蛋白与天然提取的Derp2蛋白具有一致的二级结构折叠状态,并具有相同的屋尘螨过敏患者血清中特异性IgE结合活性。本发明所使用的融合表达方法能够实现Derp2蛋的可溶性表达,具有融合标签易于切除,重组蛋白表达量高,纯化工艺简单,适合于大规模工业化生产,产物保持天然活性的优点。

    一种快速逆转录microRNA文库的方法

    公开(公告)号:CN102817085B

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201210125851.X

    申请日:2012-04-26

    Abstract: 本发明公开了一种快速逆转录microRNA文库的方法。本发明方法是在逆转录时通过使用PolyA加尾酶,在所有miRNA的末端增加一段PolyA序列,同时将逆转录引物中与miRNA特异性结合的部分换成可以与PolyA序列相结合的PolyT序列,并将加PolyA尾和逆转录合为一步进行,使所有miRNA的逆转录可以使用相同的逆转录引物,从而一次性完成全部miRNA的逆转录。使用本发明方法可以极大的简化实验步骤,为实验带来方便,适于实验室推广应用。

    一种快速逆转录microRNA文库的方法

    公开(公告)号:CN102817085A

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201210125851.X

    申请日:2012-04-26

    Abstract: 本发明公开了一种快速逆转录microRNA文库的方法。本发明方法是在逆转录时通过使用PolyA加尾酶,在所有miRNA的末端增加一段PolyA序列,同时将逆转录引物中与miRNA特异性结合的部分换成可以与PolyA序列相结合的PolyT序列,并将加PolyA尾和逆转录合为一步进行,使所有miRNA的逆转录可以使用相同的逆转录引物,从而一次性完成全部miRNA的逆转录。使用本发明方法可以极大的简化实验步骤,为实验带来方便,适于实验室推广应用。

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