公开(公告)号：CN110343715B

公开(公告)日：2021-08-20

申请号：CN201910635948.7

申请日：2019-07-15

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 刘巧林 ,  许宝红 ,  肖调义 ,  陈蕾 ,  吕丽刚 ,  刘益

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/745 ,  C07K16/36

Abstract: 一种pET‑28a‑SUMO‑草鱼凝血因子II蛋白抗原及多克隆抗体的制备方法，是利用草鱼凝血因子II特异性引物通过PCR扩增技术合成草鱼凝血因子II基因序列，再克隆到pET‑28a‑SUMO表达载体后导入到大肠杆菌(E.coli Rosetta)中表达，纯化，得到pET‑28a‑SUMO‑草鱼凝血因子II蛋白抗原，将该抗原多次免疫实验级日本大耳白兔，采血，收集抗血清，用pET‑28a‑SUMO‑草鱼凝血因子II蛋白作抗原亲合纯化，得到浓缩的草鱼凝血因子II多克隆抗体。通过本方法能得到满足后续实验需求的浓缩草鱼凝血因子II多克隆抗体，为后续检测草鱼凝血因子II的表达提供重要实验试剂。

公开(公告)号：CN110343715A

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201910635948.7

申请日：2019-07-15

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 刘巧林 ,  许宝红 ,  肖调义 ,  陈蕾 ,  吕丽刚 ,  刘益

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/745 ,  C07K16/36

Abstract: 一种pET-28a-SUMO-凝血因子II蛋白抗原及多克隆抗体的制备方法，是利用草鱼凝血因子II特异性引物通过PCR扩增技术合成草鱼凝血因子II基因序列，再克隆到pET-28a-SUMO表达载体后导入到大肠杆菌（E.coli Rosetta）中表达，纯化，得到pET-28a-SUMO-凝血因子II蛋白抗原，将该抗原多次免疫实验级日本大耳白兔，采血，收集抗血清，用pET-28a-SUMO-凝血因子II蛋白作抗原亲合纯化，得到浓缩的草鱼凝血因子II多克隆抗体。通过本方法能得到满足后续实验需求的浓缩草鱼凝血因子II多克隆抗体，为后续检测草鱼凝血因子II的表达提供重要实验试剂。